一种RAA-LFD检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的引物和探针及其方法和应用技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种RAA‑LFD检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的引物和探针及其方法和应用。根据急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌pVA1质粒的pirB基因保守序列设计RAA‑nfo特异性引物和探针；所述pirB基因的上下游引物和探针序列为SEQ ID NO.1～NO.4所示；该方法特异性强，灵敏度高，最低可检测到的菌体细胞浓度达到3.8×10<supgt;2</supgt; CFU/mL，质粒检测限为1.17×10<supgt;1</supgt; copies/μL；检测时间短，能够在37℃恒温反应20 min，LFD显色5min后完成结果判定，操作简单且结果肉眼可视，同时该方法具有良好的重复性和可信度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，具体涉及一种raa-lfd检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的引物和探针及其方法和应用。

技术介绍

1、急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreas necrosis disease, ahpnd)是由携带了能编码昆虫相关光杆菌杀虫二元毒素（photorhabdus insect-related,pir）pira/pirb的pva1质粒(69 kbp)的副溶血弧菌特定毒力株(ahpnd–causing vibrio  parahaemolyticus， vpahpnd)引起的虾类疫病。已报道的携带有pva1质粒弧菌种类包括副溶血弧菌、哈维氏弧菌( vibrio harveyi)、欧文氏弧菌( vibrio owensii)和坎贝氏弧菌( vibrio campbellii)等，携带有pva1质粒的弧菌种类增多无疑会增加该病传播风险，快速准确的监测ahpnd病本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种RAA-LFD检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的引物和探针，其特征在于，根据急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌pVA1质粒的pirB基因保守序列设计RAA-nfo特异性引物和探针；其中用于检测肝胰腺坏死病副溶血弧菌pVA1质粒的pirB的引物序列是：

2.权利要求1所述的引物和探针在制备检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的试剂或试剂盒中的应用。

3.一种检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的引物和探针。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括RAA-nfo反应试剂、侧流层析试纸条和装有冻干酶...

【技术特征摘要】

1.一种raa-lfd检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的引物和探针，其特征在于，根据急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌pva1质粒的pirb基因保守序列设计raa-nfo特异性引物和探针；其中用于检测肝胰腺坏死病副溶血弧菌pva1质粒的pirb的引物序列是：

2.权利要求1所述的引物和探针在制备检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的试剂或试剂盒中的应用。

3.一种检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的引物和探针。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括raa-nfo反应试剂、侧流层析试纸条和装有冻干酶粉的反应管。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述raa-nfo反应试剂包括缓冲液a、缓冲液b。

6.一种权利要求3-5任一项所述的试剂盒检测急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

7.根据权利要求6所...

【专利技术属性】
技术研发人员：田飞焱，裴建明，孟霞，徐节华，刘文珍，黄海莉，
申请(专利权)人：江西省农业技术推广中心，
类型：发明
国别省市：