白介素制造技术

本发明专利技术公开了白介素

【技术实现步骤摘要】
白介素
‑
10含量检测试剂盒、制备方法及其应用方法


[0001]本专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及白介素
‑
10
含量检测试剂盒
、
制备方法及其应用方法
。

技术介绍

[0002]目前针对白介素
‑
10
的免疫学检测有化学发光法
、
流式细胞术等常见检测方法
。
[0003]化学发光法，原理是将吖啶类衍生物直接标记在目标抗体
(
抗原
)
上，与待测标本中相应的抗原
(
抗体
)
发生免疫反应后，形成固相包被抗体
(
如磁珠交联抗体
)
‑
待测抗原
‑
吖啶酯标记抗体复合物，最后加入氧化剂
(H2O2)
和
NaOH
使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解
、
发光，并通过光电倍增管
(PMT)
收集光信号强度，一定时间内光子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
白介素
‑
10
含量检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：将氨丙基修饰后的石英针的底部表面包被捕获抗体后烘干，制成石英针生物传感器；将标记生物素的抗白介素
‑
10
抗体用保存液室温下稀释到
1ug/mL
后，于
2℃
‑
8℃
保存待用；将多聚糖标记的链霉亲和素荧光物质用保存液室温下稀释到
5ug/mL
后，于
2℃
‑
8℃
保存待用；制备浓度为
10mM 、PH
值为
7.4
的
PBST
清洗液，并将清洗液分装为每瓶
100mL
，均于
2℃
‑
8℃
保存待用；将步骤（1）制备的石英针生物传感器放入探针孔内，将步骤（2）制备的稀释后的标记生物素的抗白介素
‑
10
抗体倒入相应试剂孔，将步骤（3）制备的稀释后的多聚糖标记的链霉亲和素荧光物质倒入相应试剂孔，将步骤（4）制备的清洗液倒入清洗孔；步骤（1）中，捕获抗体包括
30ug/mL
的抗
FITC
抗体和浓度为
20ug/ml
的荧光素标记的白介素
‑
10
抗体
。2.
根据权利要求1所述的白介素
‑
10
含量检测试剂盒的制备方法，其特征在于：步骤（1）包括以下步骤：制备
30ug/mL
的抗
FITC
抗体和浓度为
20ug/ml
的荧光素标记的白介素
‑
10
抗体；用
APS
修饰的石英针置于
30ug/mL
的抗
FITC
抗体溶液中反应
900s
，转速
500rpm
，然后置于封闭溶液中封闭
60s
，转速
500rpm
，之后置于浓度为
10mM
的
PBST
溶液中清洗
20s
，转速
500rpm
；再置于
20ug/ml
的荧光素标记的白介素
‑
10
抗体溶液中反应
180s
，转速
500rpm
；最后置于封闭溶液中封闭
10s
，转速
500rpm
；将包被完成后的石英针在
40℃
的温度下烘干
5h
后制成石英针生物传感器，并保存在干燥环境中待用
。3.
根据权利要求2所述的白介素
‑
10
含量检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述
30ug/mL
的抗
FITC
抗体是由
PBS
缓冲液稀释而成
。4.
根据权利要求2所述的白介素
‑
10
含量检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述
20ug/ml
的荧光素标记的白介素
‑
10
抗体是由包含
3.58g/L
十二水磷酸氢二钠
、0.27g
磷酸二氢钾
、9g/L
氯化钠
、0.2g
的氯化钾
、0.05%
吐温
‑
20、0.5%BSA、1mg/ml Ficoll
‑
400、0.05%proclin300
的稀释液稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：喻誉，
申请(专利权)人：星童医疗技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：