一种烟草不定根的诱导培养基和烟草不定根的培养方法技术

本申请涉及植物组织培养的技术领域，具体涉及一种烟草不定根的诱导培养基和烟草不定根的培养方法

【技术实现步骤摘要】
一种烟草不定根的诱导培养基和烟草不定根的培养方法


[0001]本申请涉及植物组织培养的
，具体涉及一种烟草不定根的诱导培养基和烟草不定根的培养方法
。

技术介绍

[0002]烟草是我国重要经济作物之一，烟草根系的生长发育情况与烟叶产量和品质形成息息相关，其中不定根的发育是整个根系发育的重要部分，通常不定根多
、
根系活力高的烟株生长较旺盛，烟碱等化合物的含量也相对较高
。
[0003]组织培养既可以保持烟草的优良性状，又可以为市场提供大量的种苗，在烟草的繁育上发挥了积极作用
。
在组织培养技术，烟草不定根的诱导一直是研究人员的关注重点，通过改善培养基的配方来提高烟草不定根的生根数和根系活力
。
[0004]现有技术中烟草培养基的配方大多是在
MS
培养基的基础上，添加生长素及生长素类似物来促进生根，如
IAA、IBA、NAA
等，通过调整它们的含量来确定较优的培养基配方
。
目前，烟草组织培养的培养基对烟草不定根的诱导效果，难以满足技术人员更高的诱导要求，需要新的烟草不定根的诱导培养基来进一步提高烟草不定根的生根效果
。

技术实现思路

[0005]为了解决烟草组织培养中培养基难以满足技术人员对烟草不定根更高的诱导效果的问题，本申请提供一种烟草不定根的诱导培养基和烟草不定根的培养方法，该烟草不定根的诱导培养基相比于现有技术具有更好的诱导效果，同时还能降低烟草组织培养时的污染率
。
[0006]第一方面，本申请提供一种烟草不定根的诱导培养基，采用如下的技术方案：一种烟草不定根的诱导培养基，每升诱导培养基包括以下重量的组分：
MS
培养基干粉
4.74g
，
IBA 0.5
‑
1mg
，啤酒花提取物
10
‑
20mg
，蔗糖
25
‑
30g
，琼脂
7.5
‑
8g。
[0007]通过采用上述技术方案，
IBA
是烟草促进生根的常用激素，
IBA
促进生根的原因一方面通过激活生根相关基因的表达，调控细胞分裂和分化的过程，从而促进植物根系的形成，另一方面通过提高细胞壁松弛酶的活性，使细胞壁松弛，促进根系细胞伸长和分裂；
IBA
在促进烟草生根的过程中，过氧化氢是重要的信号分子，部分
IBA
促进烟草生成过氧化氢，部分
IBA
促进其他生根相关基因的表达；啤酒花提取物中含有一定量的黄腐酚，黄腐酚在一定程度上能够提高
NADPH
氧化酶的活性，
NADPH
氧化酶同样能够促进过氧化氢生成；从而
IBA
促进生根的过程中，啤酒花提取物提高了过氧化氢的生成量，一方面大量的过氧化氢能够加快烟草生根过程的速率，加强了烟草生根的效果；另一方面，随着过氧化氢生成量的增加，通过烟草中负反馈过程降低
IBA
用于促进过氧化氢生成的量，让更多的
IBA
促进生根其他相关基因的表达，进一步提高烟草生根效果；此外，啤酒花提取物具有一定的防腐效果，能够提高诱导培养基的抗菌能力；本申请的诱导培养基相对于现有技术，在
IBA
和啤酒花提取物的协同作用下，烟草
组织既能长出更多的不定根，同时降低了培养后烟草组织的污染率
。
[0008]优选的，所述啤酒花提取物中含有
2.5
‑
5wt
％的黄腐酚
。
[0009]通过采用上述技术方案，当啤酒花提取物中黄腐酚的含量过低时，难以通过
NADPH
氧化酶提升过氧化氢的生成量，从而难以促进烟草组织的生根效果；当啤酒花提取物中黄腐酚的含量过高时，过氧化氢的生成量过多，容易导致细胞程序性死亡，降低烟草组织的生根效果；为此申请人经过大量研究和试验验证后最终确定，本申请的啤酒花提取物中黄腐酚的含量以上述为宜
。
[0010]优选的，所述
IBA
与所述啤酒花提取物之间的质量比例为1：
15
‑
25。
[0011]通过采用上述技术方案，当啤酒花提取物含量相对于
IBA
的含量过低时，啤酒花提取物难以协同促进
IBA
的生根效果，从而降低烟草不定根的生成量和根长度；当啤酒花提取物含量过高时，过氧化氢的生成量过多，容易导致细胞程序性死亡，降低烟草组织的生根效果；为此申请人经过大量研究和试验验证后最终确定，本申请的
IBA
与啤酒花提取物之间的质量比例以上述为宜
。
[0012]优选的，所述诱导培养基的
pH
值为
5.5
‑
6.0。
[0013]通过采用上述技术方案，若诱导培养基
pH
过低时，诱导培养基难以凝固，不利于烟草不定根的生成和生长；若诱导培养基
pH
过高时，诱导培养基凝固度过高，同样不利于烟草不定根的生成和生长；为此申请人经过大量研究和试验验证后最终确定，本申请的诱导培养基
pH
值以上述为宜
。
[0014]第二方面，本申请提供一种烟草不定根的培养方法，采用如下的技术方案：一种烟草不定根的培养方法，包括以下步骤：插接：将烟草无菌苗切割成茎段，将所述茎段插接到上述任一种所述的诱导培养基上；培养：将所述茎段进行培养，培养条件包括：温度
24
‑
26℃
，光照强度为
1900
‑
2100lx。
[0015]通过采用上述技术方案，培养时，在
24
‑
26℃
下，烟草茎段的活力更强，提高茎段吸收诱导培养基中
IBA
和啤酒花提取物的量，随着
IBA
和啤酒花提取物吸收量的增加，茎段生成不定根的能力更强；在
1900
‑
2100lx
光照强度下，茎段的光合作用效率较高，能够更好的利用诱导培养基中的营养元素继续增长，同时为生成烟草不定根提供更多的营养物质和能量
。
[0016]优选的，在插接的步骤中，所述茎段的长度为3‑
5cm。
[0017]通过采用上述技术方案，当茎段长度过短时，茎段中细胞含量较低容易造成茎段活性降低，降低烟草不定根的生成量和根长度；当茎段长度过长时，茎段活力已经足够高了，烟草不定根的生成量和根长度增长已经趋于平稳，为了更多的插接量，无需继续增加茎段的长度；为此申请人经过大量研究和试验验证后最终确定，本申请的茎段的长度以上述为宜
。
[0018]优选的，在培养的步骤中，所述茎段诱导出的不定根根长达到...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种烟草不定根的诱导培养基，其特征在于：每升诱导培养基包括以下重量的组分：
MS
培养基干粉
4.74 g
，
IBA 0.5
‑
1 mg
，啤酒花提取物
10
‑
20 mg
，蔗糖
25
‑
30 g
，琼脂
7.5
‑
8 g。2.
根据权利要求1所述的烟草不定根的诱导培养基，其特征在于：所述啤酒花提取物中含有
2.5
‑
5 wt%
的黄腐酚
。3.
根据权利要求2所述的烟草不定根的诱导培养基，其特征在于：所述
IBA
与所述啤酒花提取物之间的质量比例为1：
15
‑
25。4.
根据权利要求1所述的烟草不定根的诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基的
pH
值为
5.5
‑
6.0。5.
一种烟草不定根的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：插接：将烟草无菌苗切割成...

【专利技术属性】
技术研发人员：王清华，孙永灿，姚睿，谭国昇，巫恬静，熊炘，
申请(专利权)人：浙江觅得优生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：