基于适配体调控制造技术

本发明专利技术专利公开了基于适配体调控

【技术实现步骤摘要】
基于适配体调控V6O13活性的氨基甲酸乙酯快检方法及酶片


[0001]本专利技术涉及一种氨基甲酸乙酯的快速便捷检测方法，特别是基于适配体调控
V6O13
活性的氨基甲酸乙酯快检方法及酶片
。

技术介绍

[0002]氨基甲酸乙酯
(Ethyl Carbamate,EC)
是一种
2A
类致癌性的物质，通常在发酵食品
、
白酒中残留存在
。
当人们接触到过量氨基甲酸乙酯时，会对皮肤和免疫系统造成极大损害，其也会通过肠道和血液被人体吸收从而导致肝
、
肺和皮肤恶性肿瘤发生率增加
。
因此引起人们对白酒中
EC
残留量的密切关注
。
部分国家如加拿大，美国，日本，巴西等将蒸馏酒
EC
的最高限量定为
150
μ
g/L。
由于白酒中存在一定的干扰物质，导致检测
EC
成为一项挑战，因此需要开发一种新的
EC/>检测技术
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
基于适配体调控
V6O13
活性的氨基甲酸乙酯快检方法
,
其特征在于：通过核酸适配体调控
V6O
13
纳米带的过氧化物酶活性，同时结合核酸适配体的特异性识别作用，实现氨基甲酸乙酯的比色快检，具体包括以下步骤：
(1)
绘制氨基甲酸乙酯浓度与灰度值变化量的标准曲线；
(2)
根据氨基甲酸乙酯浓度与灰度值变化量标准曲线建立有关氨基甲酸乙酯浓度与灰度值变化之间相互关系的回归方程；
(3)
制备未知氨基甲酸乙酯浓度的待测溶液，得
C
品；
(4)
取
C
品用软件处理得到区域灰度值，计算
C
品与空白对照组的灰度值差值，将该灰度值差值代入线性回归方程中，即可获得
C
品中氨基甲酸乙酯的浓度
。2.
根据权利要求1所述的基于适配体调控
V6O13
活性的氨基甲酸乙酯快检方法，其特征在于：所述步骤
(1)
绘制氨基甲酸乙酯浓度与灰度值变化量标准曲线的具体方法为：
A1
：取多支刻度离心管，每支刻度离心管加入一定量已知浓度的
V6O
13
纳米带和核酸适配体混匀后孵育，制备成
V6O
13
‑
aptamer
识别探针，随后将其识别探针固定在纸片上，制备出氨基甲酸乙酯比色纳米酶片，然后在酶片上加入已知浓度的氨基甲酸乙酯标准液，反应一定时间后，加入
NaAc
缓冲液，最后加入
H2O2和底物
TMB
即可制备得到待测组，为
A1
品；
A2
：取已经固载好
V6O
13
‑
aptamer
识别探针的酶片，用超纯水替代已知浓度的氨基甲酸乙酯标准液，按照
A1
的方法即可制备得到空白对照组，为
A2
品；
A3
：取
A1
品和
A2
品，分别用软件处理得到区域灰度值；
A4
：根据灰度值，将不同浓度的
A1
品与
A2
品之间的灰度值差值作为纵坐标，氨基甲酸乙酯浓度作为横坐标绘制得到靶标浓度与灰度值变化量标准曲线
。3.
根据权利要求1所述的基于适配体调控
V6O13
活性的氨基甲酸乙酯快检方法，其特征在于：所述步骤
(2)
中，当氨基甲酸乙酯浓度
C
为
20
μ
g/L≤C≤200
μ
g/L
时，其浓度与灰度值变化量之间相互关系的回归方程为：
y
＝
0.003C
‑
0.077
；
y
为灰度值差值＝含靶标氨基甲酸乙酯的待测品的灰度值
‑
空白对照组的灰度值值
。4.
根据权利要求2所述的基于适配体调控
V6O13
活性的氨基甲酸乙酯快检方法，其特征在于：所述步骤
(3)
中，制备未知氨基甲酸乙酯浓度的待测溶液
C<...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴远根，杨洪丽，夏恋，何欢欢，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：