一种中国制造技术

本发明专利技术公开了一种中国

【技术实现步骤摘要】
一种中国HSV临床分离株及基于其的溶瘤病毒和应用


[0001]本专利技术属于生物
，涉及病毒学
、
分子生物学
、
神经生物学及肿瘤学
、
免疫学等，具体涉及一种中国
HSV
临床分离株及基于其的溶瘤病毒和应用，更具体地涉及一种中国
HSV
临床分离株
、
中国
HSV
临床分离株的应用
、
基于中国
HSV
临床分离株
HSV1
‑
CH003
的溶瘤病毒及其构建方法和应用
。

技术介绍

[0002]近年来，肿瘤免疫疗法已逐渐成为继手术
、
化疗
、
放疗之后的第四大肿瘤治疗手段
。
溶瘤病毒作为一种新型肿瘤免疫生物疗法，为恶性肿瘤的治疗带来了新希望
。
溶瘤病毒
(oncolytic virus,OV)
是一类天然或者经过人工修饰改造，特异在肿瘤细胞内复制杀伤肿瘤而不伤及正常细胞的病毒
。
溶瘤病毒主要通过直接杀伤肿瘤细胞
、
诱导机体抗肿瘤系统性免疫以及阻止肿瘤血管生成等多方面实现治疗肿瘤目的，具有杀伤效率高
、
毒副作用小
、
适应症广以及成本低等优势
。
另外，当其与免疫检查点抑制剂
、
放
/
化疗等联合应用时，具有协同效应，可进一步提高肿瘤治疗的效果，有着巨大的应用前景，成为未来肿瘤治疗的新方向
。
[0003]利用病毒治疗肿瘤的概念已有
100
多年的历史
。
随着基因工程技术的不断发展，溶瘤病毒已经发展到第三代，如今有
160
多种不同的溶瘤病毒正在进行临床前及临床试验
。
全球基于十余类病毒载体在研发溶瘤病毒药物，根据基因组构成，
OV
载体可分为两大类：一类是
DNA
病毒载体，其包括腺病毒
、
单纯疱疹病毒
、
痘病毒和细小病毒等；一类是
RNA
病毒载体，其包括呼肠孤病毒
、
脊髓灰质炎病毒
、
新城疫病毒
、M1
病毒和水泡型口炎病毒等
。
腺病毒和疱疹病毒是目前应用最多的两类溶瘤病毒载体
。
[0004]2015
年基于单纯疱疹病毒1型
(Herpes simplex virus,HSV1)
载体的溶瘤病毒药物
Imlygic(Amgen
公司产品，又名
T
‑
VEC)
被美国
FDA
批准上市，作为黑色素瘤患者不可切除病灶的局部治疗方案
。
这是经过
FDA
批准的首个
、
也是唯一一个溶瘤病毒疗法，
2016
年在欧洲和加拿大也获批上市
。2021
年6月，日本第一三共株式会社的溶瘤
HSV
病毒产品
G47
Δ
被日本厚生劳动省
(MHLW)
批准，用于治疗恶性胶质细胞瘤
。
两种
oHSV
溶瘤病毒的相继上市标志着溶瘤病毒技术的成熟，全球各大制药巨头纷纷通过收购或合作方式布局溶瘤病毒药物研发
。
[0005]HSV
‑1在人群中广泛流行，主要引起口面部疱疹，国内高达
90
％的人在
65
岁时检测出血清
HSV
既往感染阳性
。
然而，
HSV
‑1临床株
(
即从患唇疱疹个体中取样分离的病毒株
)
在进化生物学特性
(
如感染力
、
毒力
、
复制效率等
)
方面存在实质性的自然变异
。
目前全球基于单纯疱疹病毒开发的溶瘤病毒多是选用典型的
HSV
‑
1“实验室”标准株如
17+、KOS
或
F
株，这些毒株已通过长期的连续传代会被弱化，或可能不是溶瘤治疗的最佳病毒骨架
。T
‑
VEC
最初是在将两个临床分离株与
17+
毒株进行比较后筛选的，两株临床株病毒对人肿瘤细胞的杀伤效果均优于
17+
毒株，其中最有希望的毒株
JS1
被筛选并构建转化为
T
‑
VEC。
[0006]目前溶瘤病毒行业尚存在技术瓶颈难题，如溶瘤病毒安全性
、
临床治疗实体瘤
/
转
移瘤效果不佳
、
肿瘤靶向性弱
、
抗体中和作用
、
载体大规模制备效率低等
。
随着相关技术的快速发展，病毒载体层面的问题日益凸显，亟待攻关研制高效治疗实体瘤的新型溶瘤病毒，
OV
病毒载体的深度改造和优化仍是研发核心内容
。
基于国外
HSV
‑1流行感染株和中国人群流行的
HSV
‑1感染株势必不同
、
存在实质性的自然变异，所以筛选最适的病毒骨架来构建更适合国人和增效的新型
HSV
溶瘤病毒具有重要意义
。

技术实现思路

[0007]为了解决溶瘤病毒开发现有技术中的不足，本专利技术旨在提供一种中国
HSV
临床分离株及基于其的溶瘤病毒和应用
。
[0008]本专利技术提供一种单纯疱疹病毒
HSV1
‑
CH003
株，其保藏编号为
CCTCC NO
：
V202210。
[0009]本专利技术提供一种病毒载体，其通过首先敲除单纯疱疹病毒
HSV1
‑
CH003
株基因组中神经毒力因子
γ
34.5
双拷贝基因得到
。
[0010]进一步地，所述病毒载体在敲除的
γ
34.5
基因座位插入外源基因表达盒；或，
[0011]所述病毒载体还包括在其基因组任何插入不影响功能的位点插入外源基因表达盒；
[0012]所述外源基因表达盒中的外源基因选自表达任意目的蛋白的基因
。
[0013]本专利技术提供所述的病毒载体在病毒学基础研究
、
作为大携载容量病毒载体
、
作为溶瘤病毒
、
作为目的基因递送载体
、
作为神经系统靶向基因治疗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种单纯疱疹病毒
HSV1
‑
CH003
株，其特征在于，其保藏编号为
CCTCC NO
：
V202210。2.
一种病毒载体，其特征在于，通过敲除单纯疱疹病毒
HSV1
‑
CH003
株基因组中神经毒力因子
γ
34.5
双拷贝基因得到
。3.
根据权利要求2所述的病毒载体，其特征在于，所述病毒载体在敲除的
γ
34.5
基因座位插入外源基因表达盒；或，所述病毒载体还包括在其基因组任何插入不影响功能的位点插入外源基因表达盒；所述外源基因表达盒中的外源基因选自表达任意目的蛋白的基因
。4.
权利要求2或3所述的病毒载体在病毒学基础研究
、
作为大携载容量病毒载体
、
作为溶瘤病毒
、
作为目的基因递送载体
、
作为神经系统靶向基因治疗药物
、
在动物感染模型建立或抗病毒药物筛选中的应用
。5.
一种重组溶瘤病毒，其特征在于，通过敲除单纯疱疹病毒
HSV1
‑
CH003
株基因组中神经毒力因子
γ
34.5
双拷贝基因得到
。6.
根据权利要求5所述的重组溶瘤病毒，其特征在于，溶瘤病毒载体还包括在敲除的
γ
34.5
基因座位插入肿瘤治疗序列基因表达盒；或，所述溶瘤病毒载体基因组还包括在任何插入不影响功能的位点插入肿瘤治疗序列基因表达盒；优选地，所述肿瘤治疗序列基因选自免疫检查点蛋白抗体基因
、
肿瘤免疫治疗细胞因子基因和免疫调控增强基因中的一种或以上；优选地，所述肿瘤治疗序列基因表达盒包含启动子和肿瘤治疗序列基因；优选地，在肿瘤治疗序列基因下游引入
WPRE
增强表达元件；优选地，所述肿瘤治疗序列基因为免疫检查点蛋白
PD1
抗体基因；优选地，在敲除的
γ
34.5
基因座位还插入荧光蛋白表达盒，所述荧光蛋白表达盒的转录方向与所述肿瘤治疗序列基因表达盒保持一致
。7.
权利要求5或6所述的重组溶瘤病毒在制备治疗抗肿瘤药物中的用途；优选地，所述肿瘤包括脑瘤
、
恶性胶质母细胞瘤
、
宫颈癌
、
肺癌
、
胃肠癌
、
头颈癌
、
恶性间皮瘤
、
乳腺癌
、
恶性黑素瘤
、
血液肿瘤
、
多发性骨髓瘤
、
急性髓性白血病
、
慢性髓性白血病
、
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华东，徐富强，应敏，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：