一种鸽蛋清中功能肽的制备及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种鸽蛋清中功能肽的制备及其应用，属于生物技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种鸽蛋清中功能肽的制备及其应用


[0001]本专利技术涉及一种鸽蛋清中功能肽的制备及其应用，属于生物

。

技术介绍

[0002]鸽蛋
(Pigeon egg)
，据
《
本草纲目
》
中记载，具有调精益气
、
生津止渴
、
滋阴补阳的功效
。
鸽蛋清是鸽蛋的蛋白成分，富含多种矿物质，还包含高生物价的蛋白质，属于理想蛋白
。
前期研究发现，鸽蛋清中蛋白质氨基酸组成和糖基化位点与鸡蛋
、
鹅蛋
、
鹌鹑蛋等来源蛋白均有较大区别，结构差别与其生理功能密切相关
。
[0003]目前对于鸽蛋清中提取蛋白的现有技术主要局限于对鸽蛋清中卵白蛋白
。
例如，一种鸽蛋清卵白蛋白的提取方法
(CN112028990B)
，优化从鸽蛋清中提取卵白蛋白的工艺，对鸽蛋清卵白蛋白的提取率达到
107.44mg/g
；鸽蛋清中卵白蛋白的提取及其在伤口修复
、
抗衰老方面的应用
(CN116421708A)
公开了从鸽蛋清中提取的卵白蛋白的相关应用
。
[0004]上述现有技术对于鸽蛋清中的开发均只停留于大分子的卵白蛋白，忽视了鸽蛋清中有效的活性小分子肽
。
现有技术对鸽蛋清功能肽的挖掘较少，小分子肽的制备技术更复杂，其分离难度更高，难以定位和纯化；而现有研究对小分子肽的研究也停留于混合肽，难以定位具体发挥活性作用的小分子肽
。
因此，挖掘鸽蛋清中功能肽的制备及其应用对于鸽蛋产品开发具有重要意义，充分挖掘鸽蛋清中这些有潜力的活性小分子是当前亟需解决的问题
。

技术实现思路

[0005]功能肽作为一种具有特定生理活性的肽类化合物，具有抗氧化
、
抗肿瘤
、
调节免疫功能以及降血压等多种功能活性，鸽蛋清经酶水解可获得具有多种生理功能的低分子活性肽，是制备功能肽的良好原料
。
[0006]本专利技术提供了一种肽
(KEWTSPNVM)
的制备方法及肽的应用
。
本专利技术提供的肽具有较强的抗氧化性，具有能够抑制结肠癌细胞扩增
、
促进上皮细胞跨膜转运
、
降低血压等多种功能
。
此外，本专利技术的肽可以从鸽蛋清中分离得到，制备方法简单
、
成本低廉
。
[0007]本专利技术的第一个目的是提供一种肽，所述肽的氨基酸序列为
KEWTSPNVM(Lys
‑
Glu
‑
Trp
‑
Thr
‑
Ser
‑
Pro
‑
Asn
‑
Val
‑
Met
，如
SEQ ID NO:1
所示
)。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供一种核酸分子，所述核酸分子可以编码本专利技术所述的肽
。
[0009]本专利技术的第三个目的是提供一种肽的衍生物，所述肽衍生物含有本专利技术所述肽的氨基酸序列
。
[0010]本专利技术的第四个目的是提供一种生物材料，所述生物材料含有编码本专利技术所述肽的氨基酸序列或者本专利技术所述核酸分子的核苷酸序列，包括重组
DNA、
表达盒
、
转座子
、
质粒载体，病毒载体，工程菌或转基因细胞系
。
[0011]本专利技术的第五个目的是提供一种本专利技术所述肽的制备方法，所述方法可以是通过
鸽蛋清制备
、
通过基因工程菌合成，或通过人工合成
。
[0012]在一种实施方式，所述肽的制备方法从鸽蛋清中制备，包括如下步骤：
[0013](1)
从新鲜鸽蛋中分离的鸽蛋清，采用滤网过滤以去除鸽蛋清中悬浮物和杂质，加入纯净水稀释至一定浓度；
[0014](2)
对步骤
(1)
稀释后的蛋清液进行热处理，经热变性后冷却至室温；
[0015](3)
调节步骤
(2)
溶液的
pH
至
5.0
‑
7.0
，在水浴摇床中预热，加入蛋白酶水浴振荡数小时，加热灭酶后冷却至室温；
[0016](4)
再次步骤
(3)
中溶液的
pH
至
2.0
‑
4.0
，加入蛋白酶进行二次酶解水浴振荡数小时后加热灭酶，冷却后调节
pH
至
6.0
‑
8.0
后离心；
[0017](5)
将步骤
(4)
中所得上清液进行超滤分离，留存滤过液；
[0018](6)
将
(5)
中所得滤过液经离子交换柱分离，干燥，得到鸽蛋清功能肽粉末
。
[0019]其中，在上述鸽蛋清肽的制备方法中，步骤
(2)
所述的热变性条件为，
75
‑
90℃
变性
15
‑
25min。
[0020]其中，在上述鸽蛋清肽的制备方法中，步骤
(3)
所述的蛋白酶浓度为底物质量分数的3％
‑7％，其水浴振荡温度为
40
‑
60℃
，加热灭酶温度为
85
‑
100℃
，时间为5‑
15min。
[0021]其中，在上述鸽蛋清肽的制备方法中，步骤
(4)
所述的蛋白酶浓度为底物质量分数的1％
‑3％，其水浴振荡温度为
40
‑
60℃
，加热灭酶温度为
85
‑
100℃
，时间为
10
‑
20min。
[0022]其中，在上述鸽蛋清肽的制备方法中，步骤
(5)
所述的超滤分离涉及的膜，分子量为
3000
‑
10000Da。
[0023]其中，在上述鸽蛋清肽的制备方法中，步骤
(6)
中所述的干燥方式为喷雾干燥，使用条件为
80℃
‑
120℃
喷雾干燥，进料流量为8‑
15mL/min
，进料温度
20
‑
40℃
，出口温度
60
‑
80℃。
[0024]本专利技术的第六个目的是提供一种制备具有抗氧化功能的组合物
、
或抑制结肠癌细胞扩增的药物
、
或促进上皮细胞的跨本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种功能肽，其特征在于，所述肽的氨基酸序列为
KEWTSPNVM(Lys
‑
Glu
‑
Trp
‑
Thr
‑
Ser
‑
Pro
‑
Asn
‑
Val
‑
Met)。2.
核酸分子，其特征在于，所述核酸分子用于编码权利要求1所述的肽
。3.
肽的衍生物，其特征在于，所述肽衍生物含有权利要求1所述肽的氨基酸序列
。4.
生物材料，其特征在于，所述生物材料含有编码权利要求1所述肽的氨基酸序列或者权利要2所述核酸分子的核苷酸序列，包括重组
DNA、
表达盒
、
转座子
、
质粒载体，病毒载体，工程菌或转基因细胞系
。5.
一种权利要求1所述肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括通过鸽蛋清制备或通过基因工程菌合成或通过人工合成
。6.
根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，功能肽从鸽蛋清中制备，制备方法包括如下步骤：
(1)
从鸽蛋中分离的鸽蛋清，采用滤网过滤以去除鸽蛋清中悬浮物和杂质，加入水稀释至一定浓度；
(2)
对步骤
(1)
稀释后的蛋清液进行热处理，经热变性后冷却；
(3)
调节步骤
(2)
溶液的
pH
至
5.0
‑
7.0
，在水浴摇床中预热，加入蛋白酶
A...

【专利技术属性】
技术研发人员：续晓琪，赵泽云，徐虹，孟俊，李莎，邱益彬，徐铮，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：