抑制结直肠癌的靶标制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及结直肠癌细胞生长增殖研究的新靶点及其应用，检测

【技术实现步骤摘要】
抑制结直肠癌的靶标TRIM40及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及结直肠癌细胞生长增殖研究的新靶点及其应用，检测
TRIM40
的
mRNA
或者蛋白表达水平，可以作为结直肠癌诊断和预后的标志物，以及期望其成为结直肠癌治疗新靶点
。

技术介绍

[0002]结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率长期居高不下
。
更为严峻的是，结直肠癌发病风险与中国城镇化水平呈正相关，可以预见，随着国家城镇化水平的进一步提高，未来结直肠癌发病风险可能会继续攀升
。
因此，不论是放眼全球还是立足国内，结直肠癌严重威胁人们的生命健康
。
目前结直肠癌的治疗仍是以手术切除为主，辅以放化疗或其他辅助治疗手段
。
但传统放化疗毒副作用明显，患者耐受性差
、
依从性低，而新型单克隆抗体靶向治疗仅能针对特定基因型患者，绝大数患者无法从中受益
。
因此不断开发新型治疗方法对于结直肠癌的治疗显得尤为迫切和重要
。
[0003]TRIM40
基因定位于人体6号染色体短臂2区2带1亚带，为蛋白质编码基因，编码的蛋白质分子量约为
29kDa。
已有
《E3
泛素连接酶
TRIM40
通过靶向
MDA5
及
RIG
‑
I
从而负向调控抗病毒天然免疫应答
》
>的研究公开了
TRIM40
在免疫调节中具有重要作用
。
但是
TRIM40
在结直肠癌发展过程中的功能和分子机制还未有研究
。
本研究发现
TRIM40
在结直肠癌组织样本中表达显著下调，
TRIM40
表达量与结直肠癌患者预后呈正相关
。
体内体外实验均表明
TRIM40
可以显著抑制结直肠癌细胞的增殖能力，显示了
TRIM40
的重要生物学功能
。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的问题是提供
TRIM40
作为抑制结直肠癌生长的靶标与诊断标志物及其应用
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供
TRIM40
作为靶点
(
特异性标志物
)
在制备诊断和治疗结直肠癌的药物中的应用
。
[0006]作为本专利技术应用的改进：作为结直肠癌细胞生长增殖的靶点
。
[0007]作为本专利技术应用的进一步改进：检测
TRIM40
的
mRNA
或者
TRIM40
的蛋白表达水平
。
[0008]作为本专利技术应用的进一步改进：用于扩增
TRIM40
基因片段的引物
(
即特异性扩增
TRIM40 mRNA
的引物
)
为：
[0009]Forward 5'
‑
AGCCACTACAAGGAACGACTC
‑
3'
[0010]Reverse 5'
‑
TCCCGTGGTCTACCTGAAAC
‑
3'。
[0011]作为本专利技术应用的进一步改进：包括与
TRIM40
蛋白特异性结合的抗体
。
[0012]说明：图1的
C
，图1的
E
，图3的
A
，图3的
D
，图3的
G
均使用与
TRIM40
蛋白特异性结合的抗体
。
[0013]作为本专利技术应用的进一步改进：
TRIM40
基因表达的增强剂用于制备治疗结直肠癌的药物
。
[0014]作为本专利技术应用的进一步改进：药物包含
TRIM40
基因表达的增强剂和药物学可接受的载体
。
[0015]作为本专利技术应用的进一步改进：所述增强剂为
TRIM40
基因过表达质粒，具体为：制备过表达
TRIM40
的药物，用于治疗结直肠癌
。
[0016]作为本专利技术应用的进一步改进，至少为以下任一：
[0017]过表达
TRIM40
抑制结直肠癌细胞增殖；过表达
TRIM40
抑制结直肠癌细胞裸鼠皮下成瘤能力
。
[0018]本专利技术首次公开
TRIM40
在结直肠癌中的作用，可以在体内外抑制结直肠癌细胞的增殖
。
同时，
TCGA
和临床标本的数据一致表明
TRIM40
在结直肠癌中降低，其表达量与结直肠癌病人的生存期成正相关，进一步功能实验结果也发现
TRIM40
在结直肠癌中发挥其生物学功能
。
由此可见
TRIM40
可以作为结直肠癌特异性预后及治疗靶标
。
[0019]本专利技术所采取的技术方案如下：通过生物信息学分析
TCGA
数据库
(Cancer Genome Atlas)
中的结直肠癌数据，筛查到
TRIM40
在结直肠癌中的表达下调，进一步采用
Real
‑
Time PCR
和免疫组织化学染色
(IHC)
技术检测
TRIM40
在人结直肠癌组织与癌旁组织中的表达情况
。
[0020]体外软琼脂集落形成实验
(soft agar assay)
检测
TRIM40
对结直肠癌细胞生长增殖能力的影响
。
过表达
TRIM40
可在体外显著抑制结直肠癌细胞增殖能力，可在体内显著抑制结直肠癌细胞的裸鼠皮下成瘤能力
。
[0021]本专利技术有益效果如下：本专利技术以结直肠癌
HCT116、RKO
和
SW480
细胞为模型，过表达
TRIM40
可在体内外抑制结直肠癌细胞生长增殖能力
。
可见，可以通过增加外源性
TRIM40
水平来治疗结直肠癌
。
利用实时荧光定量
PCR
技术，生物信息学分析
TCGA
数据库等方法发现临床大部分结直肠癌组织中
TRIM40
表达均显著下调
。
可见，通过检测
TRIM40
的表达，可以辅助诊断结直肠癌
。
[0022]综上所述，本专利技术公开了一个结直肠癌细胞生长增殖相关的靶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.TRIM40
作为靶点在制备诊断
、
治疗结直肠癌的药物中的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征是：作为结直肠癌细胞生长增殖的靶点
。3.
根据权利要求1或2所述的应用，其特征是：检测
TRIM40
的
mRNA
或者
TRIM40
的蛋白表达水平
。4.
根据权利要求3所述的应用，其特征是：用于扩增
TRIM40
基因片段的引物为：
Forward 5'
‑
AGCCACTACAAGGAACGACTC
‑
3'Reverse 5'
‑
TCCCGTGGTCTACCTGAAAC
‑
3'。5.<...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄海山，胡方雨，黄传书，赵玲玲，金红蕾，李洪岩，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：