一种重组制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种重组

【技术实现步骤摘要】
一种重组VSV载体、重组VSV病毒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种重组
VSV
载体
、
重组
VSV
病毒及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]克里米亚
‑
刚果出血热病毒
(Crimean
‑
Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)
，又称新疆出血热病毒，属于布尼亚病毒目
(Bunyavirales)、
内罗病毒科
(Nairoviridae)、
正内罗病毒属
(Orthonairovirus)
，是一种分节段有囊膜的负链
RNA
病毒
。
基因组分为3个节段分别为
S、M
和
L
，分别编码病毒核衣壳蛋白
、
包膜糖蛋白和
RNA
依赖的
RNA
聚合酶
。CCHFVr/>感染所引发的克本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CCHFV
包膜糖蛋白
GPC
突变体，其特征在于，其在野生型
CCHFV
包膜糖蛋白
GPC
的序列中缺失
C
端末尾
53
个氨基酸，且包含
R516K
或
L518V
单点突变；所述野生型
CCHFV
包膜糖蛋白
GPC
的氨基酸序列如
SEQ ID NO.23
所示
。2.
编码
CCHFV
包膜糖蛋白
GPC
突变体的核酸片段，其特征在于，包括：
i)、
编码权利要求1所述的
CCHFV
包膜糖蛋白
GPC
突变体的核酸片段；和
/
或
ii)、
编码
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列的核酸片段
。3.
根据权利要求2所述的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段的序列为：
I)、
如
SEQ ID NO:1
所示的序列；或
II)、SEQ ID NO:1
所示的序列中第
1547
位碱基由
G
突变为
A
获得的序列；
III)、SEQ ID NO:1
所示的序列中第
1552
位碱基由
C
突变为
G
获得的序列；
IV)、
在
I)、II)
或
III)
所示的核苷酸序列中取代
、
缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且编码的蛋白功能相同或相似的核苷酸序列；或
V)、
与
I)
～
IV)
任一项所述序列至少有
90
％同源性的序列
。4.
重组
VSV
载体，其特征在于，包括：
VSV
载体质粒
、
权利要求2或3所述的核酸片段和目的基因；所述
VSV
载体质粒为包含
VSV
基因组序列且编码
VSV
包膜糖蛋白的
G
基因缺失的质粒
。5.
根据权利要求1所述的重组
VSV
载体，其特征在于，所述目的基因为报告基因；所述报告基因为
GFP、EGFP、mCherry、RFP、YFP、mNeonGreen、TurboGFP、mGreenLantern、ZsGreen、mKate2、NanoLuc luciferase、Firefly luciferase、Gaussia luciferase
或
Renilla luciferase。6.
根据权利要求1所述的重组
VSV
载体，其特征在于，所述目的基因为抗原蛋白基因；所述抗原蛋白基因包括编码病毒抗原
、
肿瘤抗原或表达宿主与病原微生物抗原的基因
。7.
根据权利要求1所述的重组
VSV
载体，其特征在于，
VSV
载体质粒的骨架包括
pBlueScript
系列载体
、pSMART
系列载体或细菌人工染色体
BAC
系列载体
。8.
一种水疱性口炎病毒
VSV
的可复制型假病毒系统，其特征在于，包括权利要求4～7任一项所述的重组
VSV
载体
、
含
VSV
病毒
N
基因
、P
基因
、L
基因和
/
或
G
基因的辅助质粒以及包装细胞
。9.
根据权利要求8所述的水疱性口炎病毒
VSV
的可复制型假病毒系统，其特征在于，包含
VSV
病毒
N、P、L、G
基因的辅助质粒包括辅助质粒
1、
辅助质粒
2、
辅助质粒3和辅助质粒4，分别表达
N、P、L、G
蛋白
。10.
根据权利要求9所述的可复制型假病毒系统，其特征在于，所述重组病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：张荣，马艳龙，马雪，
申请(专利权)人：上海市重大传染病和生物安全研究院，
类型：发明
国别省市：