一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及组织工程技术领域，并提供一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法和应用，包括以下步骤

【技术实现步骤摘要】
一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法和应用


[0001]本专利技术属于组织工程
，具体涉及一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]在疾病的终末期，组织或器官的替换是重要方法，不论组织还是器官损伤都会涉及到血管，血管损伤时通常使用外源性人工血管供代替患者本身的血管或者取自身的血管异位移植，临床常用的人工血管和冷冻保存同种血管无生长性且容易引起狭窄钙化多须再次手术治疗，给患者带来莫大痛苦的同时造成大量医疗资源的浪费
。
[0003]如公告号为
CN115737209A
的专利技术所公开的一种脱细胞猪带瓣血管的制备方法和应用，包括原材料的准备
、
实验仪器的准备
、
实验进程的监测
、
试验结果的分析以及实验成品的获取
。
该脱细胞猪带瓣血管的制备方法在应用裁剪合适大小或形状作为主动脉瓣膜或者主动脉带瓣血管的的替代物，此进程中脱细胞方法脱细胞干净，对胶原破坏小，试剂相对简单容易获取，脱细胞后去细胞基质带瓣血管可以用于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、
猪动脉血管的提取以及放置存储；
S2、
对猪动脉血管进行处理，得到去细胞的血管；
S3、
对血管进行灭菌处理，并取部分
S3
中的血管样本进行检测；
S4、
骨髓干细胞培养并将骨髓干细胞种植于去细胞基质血管上；
S5、
自制含培养基的生物反应器中孵化1天～2周后用于血管移植
。2.
根据权利要求1所述的一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法，其特征在于：所述
S1
具体操作如下：在猪上充分游离动脉，除去周围的脂肪，心包膜，心包等多余组织，取出猪含有动脉的血管，收集好后在玻璃容器中备用，再制含2％～
10
％十二烷基硫酸钠溶液，加入含有血管的玻璃容器中
。3.
根据权利要求1所述的一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法，其特征在于：所述
S2
具体操作如下：将容器置于调速多用振荡器中振荡6小时后倒掉容器中的液体，用去离子水冲洗
20
次，每次3分钟，含2％～
10
％十二烷基硫酸钠溶液震荡6小时，倒掉容器中的液体，用蒸馏水或去离子水冲洗
20
次，每次3分钟，加入新的低渗的去离子水继续振荡6小时，如此循环往复3～7天
。4.
根据权利要求1所述的一种含活细胞的猪动脉基质的制备方法，其特征在于：所述
S4
具体操作如下：
S41、
取出去细胞血管置于
‑
20
°
冰箱保存备用，并裁剪合适长度和口径作为动脉置换或修补的替代物；
S42、
抽取血液或骨髓
10
～
15ml
，每毫升骨髓加
100u
肝素抗凝，充分混匀后，保存于
4℃
冰箱，
24
小时内分离骨髓
MNC
，骨髓先加入等量
PBS
或
Hanks
液混匀后，以1份淋巴细胞分离液上面加2份稀释骨髓的比例，将稀释骨髓缓慢加入
ficoll
液面上，水平离心机
20℃
条件下
500g
离心
25
～
30
分钟，从界面上取出的
MNC
用
PBS
液洗涤2‑3次后，加适量培养液计数；
S43、
数细胞数量达到
106～
107/ml
后即进行原代培养，按5×
106/ml
浓度接种于
50ml
培养瓶中，每瓶含
5ml L
‑
DMEM
完全培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢霆，董念国，李崧，李庚，周奔腾，
申请(专利权)人：海南省人民医院，
类型：发明
国别省市：