【技术实现步骤摘要】
一种用于同时检测miRNA和信使RNA的刚性四边形DNA生物传感器的构建及应用
[0001]本专利技术属于分析化学检测
,具体涉及一种用于同时检测
miRNA
和信使
RNA
的刚性四边形
DNA
生物传感器的构建及应用
。
技术介绍
[0002]肿瘤的转移性表现为上皮细胞转化为间充质细胞的特性,间充质细胞具有迁移和侵袭能力
。
因此,同时检测转移性肿瘤细胞中的多种标志物对于准确了解癌症的进展具有重要意义
。
[0003]miRNA
‑
10b
高表达与多种肿瘤细胞密切相关,并且在转移性肿瘤中也表现出高表达水平
。
波形
(vimentin)
蛋白通过提供粘弹性框架来保护癌细胞在迁移或挤压通过狭窄空间期间免受机械应力,并在上皮间充质转化
(EMT)
和癌症进展期间支持细胞器
(
尤其是细胞核
)
的定位和完整性,检测
vi ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种用于同时检测
miRNA
和信使
RNA
的刚性四边形
DNA
生物传感器的构建及应用,其特在于以下合成步骤:
S1、S2、S3、S4、S5
和
S6(10
μ
L
,
50
μ
M)
与
140
μ
L TAMg
缓冲液混合均匀,在
95℃
退火
5min
,完成后迅速置于
48℃
水浴锅中孵育
60min
,自然冷却至
40℃
后孵育
60min
,自然冷却至
30℃
后孵育
60min
,自然冷却至
20℃
后孵育
60min
形成刚性四边形探针
(RQP)。2.
根据权利要求1所述的一种用于同时检测
miRNA
和信使
RNA
的刚性四边形
DNA
生物传感器的构建及应用,其特在于:
(1)
刚性四边形生物传感器由六条
DNA
单链组成,分别为
S1、S2、S3、S4、S5
和
S6
;
(2)
在没有目标物的情况下,
S5
上5’
端的
Cy5
和
S6
上5’
端的
FAM
分别与
S4
上3’
端的
BHQ2
和
S5
上3’
端的
BHQ1
接近,
Cy5
和
FAM
的荧光被猝灭,导致较低的背景信号;
(3)
在目标物
miRNA
‑
10b
存在的情况下,
S5
与
miRNA
‑
10b
结合,
Cy5
远离
BHQ2
,
Cy5
的荧光信号回升;在目标物
vimentin mRNA
存在的情况下,
S6
...
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