【技术实现步骤摘要】
一种提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法
[0001]本专利技术涉及人工诱导鱼类雌核发育育种
,尤其是涉及一种提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法
。
技术介绍
[0002]人工诱导鱼类雌核发育育种技术是快速建立纯系
、
加速良种选育和控制性别的有效手段,该技术已经应用于多种鱼类的良种选育
。
雌核发育技术结合定向选育和杂交技术,培育出了许多优良性状的品系,成为目前鱼类良种选育的一种有效方法
。
其中有丝分裂雌核发育技术可以产生完全纯合的个体,有助于消除有害等位基因,并可以通过杂交获得具有杂种优势的新品系
。
由于有丝分裂雌核发育产生的个体在每个基因位点都是纯合的,使其在固定优良基因方面具有较大的应用价值
。
[0003]因此,有丝分裂雌核发育是选择性育种的强大工具
。
然而有丝分裂雌核发育个体具有繁殖性状低的特点,如何提高有丝分裂雌核发育个体繁殖性状已成为该育种方法亟待解决的问题 >。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法,其特征在于,所述制种方法包括以下步骤:对野生牙鲆的卵子进行减数分裂雌核发育诱导,得到第一代群体,所述第一代群体为减数分裂雌核发育牙鲆;对第一代群体的卵子进行有丝分裂雌核发育诱导,得到第二代群体,所述第二代群体为双单倍体牙鲆;以第二代群体作为亲本进行人工受精,得到第三代群体,所述第三代群体为杂合克隆牙鲆;对第三代群体的卵子进行有丝分裂雌核发育诱导,得到目标繁殖性状的重组双单倍体牙鲆
。2.
根据权利要求1所述的提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法,其特征在于,所述减数分裂雌核发育诱导包括以下步骤:将牙鲆卵子和灭活后的真鲷精子混合,采用海水激活,再置于海水中进行冷休克处理;处理结束后,将受精卵进行孵化,得到第一代群体,所述第一代群体为减数分裂雌核发育牙鲆
。3.
根据权利要求2所述的提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法,其特征在于,所述真鲷精子和牙鲆卵子混合的体积比为
(30
~
50):(1
~
3)
;优选地,所述激活采用的海水温度为
15
~
20℃
,优选为
17℃
;优选地,所述激活的时间为1~
5min
,优选为
3min
;优选地,所述冷休克处理采用的海水温度为
‑2~
2℃
,优选为
0℃
;优选地,所述冷休克处理的时间为
40
~
50min
,优选为
45min
;优选地,所述孵化在孵化缸中进行,孵化的温度为
15
~
20℃
,优选为
17℃
;优选地,所述孵化的过程中还需统计受精率
、
孵化率和畸形率
。4.
根据权利要求1所述的提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法,其特征在于,所述对第一代减数分裂雌核发育群体的卵子进行有丝分裂雌核发育诱导前,还需筛选出高繁殖性状的第一代减数分裂雌核发育群体;优选地,所述筛选标准以人工挤卵量作为第一优先标准,受精率和孵化率作为第二标准,畸形率是第三标准;优选地,所述对第一代群体的卵子进行有丝分裂雌核发育诱导具体包括以下步骤:将牙鲆卵子和灭活后的真鲷精子混合,采用海水激活,后进行静水压处理,处理结束后孵化受精卵,得到第二代群体,所述第二代群体为双单倍体牙鲆
。5.
根据权利要求4所述的提高有丝分裂雌核发育双单倍体牙鲆繁殖性状的制种方法,其特征在于,所述真鲷精子和牙鲆卵子混合的体积比为
(30
~
50):(1
~
3)
;优选地,所述激活采用的海水温度为
15
~
20℃
,优选为
17℃
;优选地,所述激活的时间为1~
5min
,优选为
3min
;优选地,所述海水激活后的孵化在孵化箱中进行,孵化的温度为
15
~
20℃
,优选为
17℃
;优选地,所述海水激活后的孵化在孵化箱中进行,孵化的时间为
55
~
65min
,优选为
60min
;
优选地,所述静水压处理的压强为
600
~
700kg/cm2,优选为
650kg/cm2;优选地,所述静水压处理后的孵化在...
【专利技术属性】
技术研发人员:张晓彦,侯吉伦,王桂兴,何忠伟,刘玉峰,任玉芹,王玉芬,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院北戴河中心实验站,
类型:发明
国别省市:
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