一种制造技术

本发明专利技术提供了一种

【技术实现步骤摘要】
一种Qa
‑
1b纳米抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
，特别是涉及一种
Qa
‑
1b
纳米抗体及其应用
。

技术介绍

[0002]骆驼科动物
(
羊驼
、
骆驼
)
和软骨鱼体内的一种天然缺失重链但仍然具有生物活性的特异性抗体称单域抗体，单域抗体的抗原结合位点
(VHH)
具有独立的抗原识别能力，独立表达的
VHH
又被称为纳米抗体
。
与传统的四联体抗体相比，纳米抗体的主要特点有：分子量小，结构简单，理化性质稳定等
。
纳米抗体的优良特性使其在多种方面具有优势：在抗体进入机体方面，纳米抗体能够穿过动物机体内的一些保护性屏障进入发病部位发挥作用，如血脑屏障
、
血睾屏障等；在抗原抗体结合方面，能够结合一些隐蔽的抗原表位，特别适用于比较难得到抗体的靶点，如
GPCR、
离子通道和酶活中心等；在降低生产成本方面，纳米抗体结构简单易于体外表达，同时体外表达不易产生包涵体，生产工艺简单
。
[0003]人类白细胞抗原
‑
E(human leukocyte antigenE,HLA
‑
E)
基因位于第6号染色体短臂
(6p21.3)。
约
99
％的人类个体中，有两个等位基因编码
HLA
‑
>E
，即
HLA
‑
E*01:01
和
HLA
‑
E*01:03。Qa
‑
1b
是
HLA
‑
E
在小鼠中的同源蛋白
。Qa
‑
1b(HLA
‑
E)
在内皮细胞
、T
细胞
、B
细胞
、
单核细胞和巨噬细胞等表达水平较高
。Qa
‑
1b(HLA
‑
E)
的
α
链胞外区与
β2微球蛋白以非共价键结合，形成完整的
Qa
‑
1b(HLA
‑
E)
复合物
。Qa
‑
1b(HLA
‑
E)
主要的配体是
NKG2A/CD94
或
NKG2C/CD94
复合体
。NKG2A
和
NKG2C
是
NKG2
家族中的成员，表达于
NK
细胞
、NKT
细胞和
CD8
+
T
细胞
。Qa
‑
1b
与
NKG2A/CD94
或
NKG2C/CD94
复合体结合可以抑制或激活
NK
细胞和
T
细胞
。
由于
Qa
‑
1b
的功能特点，
Qa
‑
1b
及其受体逐渐成为肿瘤免疫治疗的热门靶点
。
目前，还没有特异性结合
Qa
‑
1b
蛋白的纳米抗体的报道
。

技术实现思路

[0004]纳米抗体固有的分子量小
、
理化特征稳定
、
亲和力高和结构简单易于重组表达制备，能够穿过血脑屏障，在疾病的诊断与治疗中有较大的应用前景
。
鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种
Qa
‑
1b
纳米抗体及其应用，采用本专利技术提供的
Qa
‑
1b
纳米抗体能够特异性结合
Qa
‑
1b
蛋白，可用于免疫组织化学和
Western Blotting
法检测组织中
Qa
‑
1b
的表达
。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种
Qa
‑
1b
纳米抗体，所述
Qa
‑
1b
纳米抗体的氨基酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。
[0007]优选的，所述
Qa
‑
1b
纳米抗体的核苷酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。
[0008]本专利技术还提供了上述技术方案所述的
Qa
‑
1b
纳米抗体在制备结合
Qa
‑
1b
蛋白的药物中的应用
。
[0009]本专利技术还提供了上述技术方案所述
Qa
‑
1b
纳米抗体在制备结合
Qa
‑
1b
蛋白的免疫组化试剂中的应用
。
[0010]本专利技术还提供了上述技术方案所述
Qa
‑
1b
纳米抗体在抑制
B16
细胞增殖中的应用
。
[0011]本专利技术的有益效果为：
[0012]本专利技术利用噬菌体展示技术进行淘筛，噬菌体展示技术能将表达的外源多肽或蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面，进而通过亲和富集法筛选表达有特异性蛋白质的噬菌体
。
本专利技术采用噬菌体展示实验技术研发的
Qa
‑
1b
纳米抗体能够特异性结合
Qa
‑
1b
蛋白
。
附图说明
[0013]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍
。
[0014]图1为考马斯亮蓝检测，将纯化的纳米抗体作为待检蛋白进行考马斯亮蓝鉴定，检测制备的纳米抗体的纯度；
[0015]图2为
Qa
‑
1b
‑
VHH
‑
His
检测，将纯化的纳米抗体作为待检蛋白进行
Western
‑
blotting
鉴定，使用
HRPAnti His
‑
Tag Mouse
抗体检测鉴定纯化的纳米抗体，通过分子量大小和特异性结合判断为
Qa
‑
1b
纳米抗体；
[0016]图3为
Qa
‑
1b
‑
VHH
‑
纳米抗体用于犬黑色素瘤组织切片免疫组化检测，选取组织制作石本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
Qa
‑
1b
纳米抗体，其特征在于，所述
Qa
‑
1b
纳米抗体的氨基酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。2.
根据权利要求1所述的
Qa
‑
1b
纳米抗体，其特征在于，所述
Qa
‑
1b
纳米抗体的核苷酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。3.
权利要求1或2所述的

【专利技术属性】
技术研发人员：范瑞文，金聪俐，贾琼，牛胜，田文霞，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：