用于治疗与血管生成相关的眼部疾病的组合物和方法技术

本公开提供了用于治疗与血管生成相关的眼部疾病，特别是湿性年龄相关性黄斑变性的组合物和方法

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗与血管生成相关的眼部疾病的组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用本申请要求
2021
年4月
27
日提交的美国临时专利申请序列号
63/180,247
的权益，其全部公开内容通过引用并入本文
。
[0002]经由
EFS
‑
WEB
提交序列表在
2022
年4月
22
日左右创建的题为“090400
‑
5018
‑
WO
‑
Sequence
‑
Listing”的计算机可读文本文件
(
文件大小为大约
83KB)
含有本申请的序列表并通过引用全文并入本文
。
[0003]专利技术背景血管内皮生长因子
(VEGF)
蛋白及其受体
(VEGFR)
在血管发生
、
胚胎脉管系统从早期分化内皮细胞的发育
、
血管生成
、
从预先存在的血管形成新血管的过程
、
以及淋巴管生成
、
形成新淋巴管的过程中起重要作用
。
[0004]眼血管疾病，诸如年龄相关性黄斑变性和糖尿病性视网膜病变分别由异常的脉络膜或视网膜新生血管形成引起
。
由于视网膜由神经元
、
神经胶质和血管元件的明确限定的层组成，因此相对较小的干扰
(
诸如在血管增生或水肿中可见的那些
)
可导致视觉功能的显著丧失
。
遗传性视网膜变性，诸如视网膜色素变性，也与血管异常
(
诸如小动脉狭窄和血管性萎缩
)
有关
。
[0005]已采用策略来阻断
VEGF
的功能
。
目前的标准护理治疗包括玻璃体内
(IVT)
注射蛋白疗法，诸如阿柏西普
(aflibercept)、
雷珠单抗
(ranibizumab)
和布洛赛珠单抗
(brolucizumab)
，其与血管内皮生长因子
A(VEGF
‑
A
，
VEGF)
结合以防止与其受体的结合
。
显示为安全和有效的抗
VEGF
疗法的方案需要重复的每月至每两个月
IVT
施用以维持视力，并且许多患者因治疗不足而无法维持初始视觉锐度益处
。
对患者和护理人员而言，重复注射的需求可能成为沉重的负担，尽管治疗了十年，但一些患者仍需要定期的抗
VEGF
注射
。
最近的研究表明，在实际使用中，许多患者接受的注射少于推荐的注射，并且没有收到或维持与临床试验环境中显示的相同益处，其中前2年期间的视力增益并未维持5年
。
[0006]由此，仍然需要用于治疗血管生成性眼部疾病
(
诸如湿性
AMD)
的新的或改善的化合物和疗法
。

技术实现思路

公开了用于治疗与眼部血管生成相关的眼部疾病的组合物和方法，所述眼部疾病包括但不限于湿性
(
新生血管性
、
渗出性
)
年龄相关性黄斑变性；视网膜静脉阻塞后的黄斑水肿；视网膜静脉阻塞引起的视网膜新生血管形成；糖尿病性黄斑水肿
、
糖尿病性视网膜病变
(
包括非增生性糖尿病性视网膜病变和增生性糖尿病性视网膜病变的所有阶段
)
；近视性黄斑变性；视网膜分支静脉阻塞
、
半侧视网膜静脉阻塞和视网膜中央静脉阻塞；早产儿视网膜病变；特发性脉络膜新生血管形成；近视黄斑变性和继发性视网膜和脉络膜新生血管形成；视网膜毛细血管扩张；新生血管性青光眼；玻璃体出血；继发于视网膜疾病的视网膜和脉络膜新生血管形成，所述视网膜疾病包括但不限于葡萄膜炎
、
创伤
、
视网膜退行性疾病
、
遗传性视网膜和
/
或脉络膜疾病
、
眼肿瘤
、
角膜和虹膜新生血管形成
。
在一些实施方案中，血
管生成性眼部疾病选自湿性
(
新生血管性
、
渗出性
)
年龄相关性黄斑变性；糖尿病性黄斑水肿；视网膜静脉阻塞后的黄斑水肿；糖尿病性视网膜病变；和近视性脉络膜新生血管形成
。
[0008]在一些实施方案中，提供了一种核酸，其包含
(i)
编码第一抗血管生成多肽
(
例如阿柏西普
)
的核苷酸序列和
(ii)
编码一种或多种降低一种或多种促血管生成靶基因的表达的干扰
RNA
分子的核苷酸序列
。
在一些方面，
RNA
分子是短发夹
RNA(shRNA)。
在另一些方面，
RNA
分子是初级
miRNA
分子
。
在一些方面，核酸包含表达盒，所述表达盒包含
(i)
可操作地连接至表达控制序列的编码第一抗血管生成多肽的核苷酸序列，和
(ii)
可操作地连接至表达控制序列的编码降低一种或多种促血管生成靶基因的表达的干扰
RNA
分子的核苷酸序列
。
在一些实施方案中，编码抗血管生成多肽的核苷酸序列和编码干扰
RNA
分子的核苷酸序列可操作地连接至不同的表达控制序列
。
在优选实施方案中，抗血管生成多肽和干扰
RNA
分子的表达由共同的
(
即相同的
)
表达控制序列驱动
。
在一些方面，表达控制序列包含组成型启动子，诸如
CAG
或
CBA
启动子
。
在另一些方面，表达控制序列包含细胞特异性启动子
。
[0009]在一些实施方案中，核酸包含编码靶向血管生成素
‑
2(
亦称
Ang2
或
Ang
‑
2)
的干扰
RNA
分子的核苷酸序列
。
代表性人
Ang2
序列可见于例如
NCBI
检索号
015123
和美国专利号
8,987,420(
其内容通过引用并入本文
)
的
SEQ ID No:517
和
518。
在优选实施方案中，干扰
RNA
分子靶向
Ang
‑2并包含有义本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
合成核糖核酸
(RNA)
分子，其包含：含有与选自
SEQ ID NO:19、16、22、25、28、1、4、7、10、13、31、34、37、40
和
43
的序列的至少
90
％的序列同一性的有义链和含有与选自
SEQ ID NO:20、17、23、26、29、2、5、8、11、14、32、35、38、41
和
44
的序列的至少
90
％的同一性的反义链，优选其中所述合成
RNA
分子包含：含有与
SEQ ID NO:19
的至少
90
％的序列同一性的有义链和含有与
SEQ ID NO:20
的至少
90
％的序列同一性的反义链
。2.
根据权利要求1所述的合成
RNA
分子，其中所述
RNA
是小干扰
RNA(siRNA)、
小发夹
RNA(shRNA)
或人工微
RNA(miRNA)。3.
根据权利要求1所述的合成
RNA
分子，其中所述
RNA
是包含含有序列
CTCGAG
或与其具有至少
90
％的同一性的序列的环的
shRNA。4.
根据权利要求1所述的合成
RNA
分子，其中所述
RNA
是人工
miRNA
，所述人工
miRNA
包含含有与
SEQ ID NO:46
或
47
所示的序列的至少
90
％的序列同一性的
RNA
，其中
(X)
n
包含含有与选自
SEQ ID NO:19、16、22、25、28、1、4、7、10、13、31、34、37、40
和
43
的序列的至少
90
％的序列同一性的有义序列，和
(Y)
n
包含含有与选自
SEQ ID NO:20、17、23、26、29、2、5、8、11、14、32、35、38、41
和
44
的序列的至少
90
％的序列同一性的反义序列
。5.
根据权利要求1‑4任一项所述的合成
RNA
，其进一步包含在
5'
末端和
/
或
3'
末端的未配对突出序列，所述突出序列任选包含重复碱基的序列，所述重复碱基任选地包含重复尿嘧啶
(U)
碱基
。6.
核酸，其包含
(i)
编码至少一种根据权利要求1‑4任一项所述的合成
RNA
分子的核苷酸序列
。7.
权利要求6所述的核酸，其进一步包含
(ii)
编码抑制
VEGF
‑
A
活性的第一抗血管生成多肽的核苷酸序列，优选其中所述
(i)
和
(ii)
的核苷酸序列可操作地连接至表达控制序列
。8.
根据权利要求7所述的核酸，其中所述第一抗血管生成多肽是阿柏西普
(aflibercept)
，优选其中编码阿柏西普的核苷酸序列包含
SEQ ID NO:50
的核苷酸序列或与其具有至少
90
％的同一性的序列
。9.
根据权利要求7或8所述的核酸，其中所述
(i)
和
(ii)
的核苷酸序列可操作地连接至表达控制序列
。10.
根据权利要求9所述的核酸，其中所述编码第一抗血管生成多肽的核苷酸序列和编码一种或多种合成
RNA
分子的核苷酸序列在相同的表达控制序列的控制下
。11.
根据权利要求
10
所述的核酸，其中所述表达控制序列包含遍在启动子
。12.
根据权利要求
11
所述的核酸，其中所述启动子是
CAG
或
CBA
启动子
。13.
根据权利要求8所述的核酸，其中所述核酸包含
SEQ ID NO:69、68
和
70
中任一项所示的核苷酸序列或与其具有至少
95
％的同一性的序列
。14.
组合物，其包含根据权利要求1‑4任一项所述的合成
RNA
和
/
或根据权利要求6至
13
任一项所述的核酸
。15.
根据权利要求
14
所述的组合物，其是进一步包含药学上可接受的载体的药物组合物
。16.
载体，其包含根据权利要求1‑4任一项所述的合成
RNA
分子和
/
或根据权利要求6至
13
任一项所述的核酸
。17.
根据权利要求
16
所述的载体，其中所述载体是表达质粒
。
18.
根据权利要求
16
或
17
所述的载体，其中所述载体是病毒载体
。19.
根据权利要求
18
所述的载体，其中所述病毒载体是重组腺相关病毒
(rAAV)
载体，优选其中所述
rAAV
载体包含血清型
2、5
或8的
AAV
衣壳或其变体
。20.
根据权利要求
19
所述的载体，其中所述
rAAV
具有包含衣壳蛋白的衣壳，所述衣壳蛋白包含相对于相应的亲本
AAV
衣壳蛋白，在所述衣壳蛋白的
GH
环中共价插入的长度为
7、8、9、10
或
11
个氨基酸的异源肽插入，其中所述肽插入包含氨基酸序列
ISDQTKH(SEQ ID NO:74)。21.
根据权利要求
20
所述的载体，其中所述插入肽在氨基酸序列
ISDQTKH(SEQ ID NO:74)
的氨基端和
/
或羧基端具有1至3个间隔氨基酸
(Y1‑
Y3)。22.
根据权利要求
20
或
21
所述的载体，其中所述插入肽是
LAISDQTKHA(SEQ ID NO:49)。23.
根据权利要求
20
‑
22
任一项所述的载体，其中所述插入位点位于
AAV2
的
VP1
的氨基酸
570
和
611
之间的位置，或另一
AAV
血清型的衣壳蛋白中的相应位置处的两个相邻氨基酸之间
。24.
根据权利要求
20
‑
23
任一项所述的载体，其中插入位点位于对应于
AAV2
的
VP1
的氨基酸
587
和
588
的氨基酸之间，或对应于
AAV2
的
VP1
的氨基酸
588
和
589
的氨基酸之间...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：四D，
类型：发明
国别省市：