一种橡树的组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种橡树的组织培养方法，包括以下步骤：丛生芽分化培养

【技术实现步骤摘要】
一种橡树的组织培养方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，具体涉及一种橡树的组织培养方法
。

技术介绍

[0002]橡树
(Quercus palustris M
ü
nchh.)
又名又称栎树或柞树，是壳斗科
(Fagaceae)
栎属
(Quercus L.)
大型落叶乔木，通常指栎属植物，非特指某一树种
。
原生于欧洲
、
安那托利亚至高加索地区，具有树体高大
、
枝叶繁茂
、
树形优美
、
抗寒耐旱
、
适应性强等特点
。
橡树木材坚实，纹理美观，可用于建筑行业，以及制造橡木桶和名贵家具，具有良好的经济价值；其叶片形态优美，秋季变为金色且宿存时间较长，是优良的观赏树种和园林绿化树种；其种子淀粉含量高，可供食用和酿酒，具有十分广阔的发展前景
。
[0003]组织培养技术已广泛应用于
1500
多种植物的无性繁殖
。
壳斗科植物组织培养的研究起源于
20 世纪 50 年代，在
80
年代开始盛行，到目前栎属
、
栲属
、
栗属和石栎属的研究均有报道，组织培养已成为壳斗科植物快速繁育的重要手段之一
。
橡树在我国具有重要的应用前景，但其结实量大小年现象明显
、
开花结实迟
、r/>营养繁殖困难
、
难以建立种子园及不能连续回交获得纯系
、
种子萌发困难且生长缓慢
、
种子在自然条件下出苗整齐性差，导致橡树大规模生产种苗困难，培育经选择的优良种苗更困难，严重制约着我国橡树产业的发展
。
因此，亟需一种育种周期短
、
操作简单
、
繁殖系数高
、
生根率高的橡树组织培养方法
。

技术实现思路

[0004]基于上述问题，本专利技术提供一种橡树的组织培养方法，该方法繁殖系数高
、
生根率高
。
[0005]本专利技术是采用以下技术方案来实现的：一种橡树的组织培养方法，包括如下步骤：
⑴
丛生芽分化培养
: 以橡树无菌苗为材料，剪除无菌苗的多余新生叶片，保留单株
1.5
‑
2 cm
的无菌芽接入到丛生芽分化培养基上，进行分化培养，获得无菌苗幼嫩芽；
⑵
生根培养：通过步骤
⑴
获得无菌苗幼嫩芽，剪除多余的新生叶片，保留单株
1.5
‑
2 cm
，接入到生根培养基上，进行生根培养
。
[0006]进一步地，步骤（1）所述丛生芽分化培养基为
WPM
基本培养基中添加
0.2
‑
0.3 mg/L 6
‑
BA
和
50
‑
100 mg/L Cef。
[0007]进一步地，所述丛生芽分化培养基添加有
29
‑
31 g/L
的蔗糖
、5.8
‑
6.2 g/L
的琼脂，
pH
为
5.7
‑
5.9。
[0008]步骤（2）所述生根培养基为
1/2MS
基础培养基中添加
0.1
‑
0.5 mg/L 萘乙酸（
NAA
）和
100 mg/L 噻孢霉素钠（
Cef
）
。
[0009]所述生根培养基添加有
29
‑
31 g/L
的蔗糖
、5.8
‑
6.2 g/L
的琼脂，
pH
为
5.7
‑
5.9。
[0010]步骤
⑴
所述丛生芽分化培养和步骤
⑵
所述生根培养的条件均为：培养温度
(25
±
2)℃
，光照时间
16
‑
17 h/d。
[0011]所述橡树无菌苗的培养包括如下步骤：（1）种子预处理：剥去美国白栎种子的种皮，获得带子叶的合子胚；（2）种子的消毒灭菌：将合子胚流水冲洗
、
酒精漂洗
、
无菌水冲洗
、
次氯酸钠溶液浸泡
、
无菌水再次冲洗
、
植物组培抗菌剂溶液浸泡；（3）种子萌发培养：将灭菌后的合子胚接种到种子萌发培养基中，促进根芽茎的萌发，得到美国白栎无菌苗
。
[0012]优选地，步骤
⑵
所述种子的消毒灭菌步骤为：将合子胚流水冲洗
4 h
，用体积分数为
75%
酒精漂洗
90 s
，无菌水冲洗一次，质量分数为
10%
次氯酸钠溶液浸泡
15 min
，无菌水冲洗三次，植物组培抗菌剂（
PPM
）溶液浸泡
24 h。
[0013]优选地，步骤
⑶
所述种子萌发培养基为
WPM
基本培养基中添加
0.002 mg/L TDZ
和
100 mg/L Cef。
[0014]进一步地，步骤
⑴
中所述橡树种子选自生长良好
、
无病虫害
、
抗逆性强的优良单株的美国白栎植株
。
[0015]本专利技术所具有的优点和有益效果是：本专利技术丛生芽分化培养基中是在
WPM
基本培养基中添加了适宜浓度的6‑
苄氨基嘌呤（6‑
BA
）和噻孢霉素钠，
WPM
基本培养基
、6
‑
BA
和噻孢霉素钠共同作用，具有更好的促进细胞分化的效果，能提高芽的分化，抑制内生菌的繁殖，降低内生菌对芽分化的负面影响，在共同作用下，丛生芽分化培养基能够快速繁育出大量丛生小苗，增值系数可达
7.13。
生根培养基是在
1/2MS
基础培养基中添加萘乙酸（
NAA
）和噻孢霉素钠，
1/2MS
培养基中含有少量的营养，
1/2MS
培养基
、
萘乙酸（
NAA
）和噻孢霉素钠共同作用，既能能降低内生菌对生根的负面影响，又能加快植物根系的生长以适应环境，三者共同作用下可快速诱导生根，生根率达
93%
，且生根快，生根条数多
。
种子萌发培养基为
WPM
基本培本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种橡树的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：丛生芽分化培养
: 以橡树无菌苗为材料，剪除多余新生叶片，保留单株
1.5
‑
2 cm
的无菌芽接入到丛生芽分化培养基上，进行分化培养，获得无菌苗幼嫩芽；生根培养：通过步骤获得无菌苗幼嫩芽，剪除多余的新生叶片，保留单株
1.5
‑
2 cm
，接入到生根培养基上，进行生根培养
。2. 根据权利要求1所述的一种橡树的组织培养方法，其特征在于，步骤（1）所述丛生芽分化培养基为
WPM
基本培养基中添加
0.2
‑
0.3 mg/L 6
‑
苄氨基嘌呤和
50
‑
100 mg/L
噻孢霉素钠
。3. 根据权利要求2所述的一种橡树的组织培养方法，其特征在于，所述丛生芽分化培养基添加有
29
‑
31 g/L
的蔗糖
、5.8
‑
6.2 g/L
的琼脂，
pH
为
5.7
‑
5.9。4. 根据权利要求1所述的一种橡树的组织培养方法，其特征在于，步骤（2）所述生根培养基为
1/2MS
基础培养基中添加
0.1
‑
0.5 mg/L 萘乙酸和
100 mg/L 噻孢霉素钠
。5. 根据权利要求4所述的一种橡树的组织培养方法，其特征在于，所述生根培养基添加有
29
‑
31 g/L
的蔗糖
、5.8
‑
6.2 g/L
的琼脂，
pH
为
5.7
‑
5.9。6.
根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：何方，李豪，王婷，黄雄，钟宇，陈小红，徐振锋，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：