一种比率荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及荧光探针技术领域，具体涉及一种比率荧光探针及其制备方法和应用

【技术实现步骤摘要】
一种比率荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及荧光探针
，具体涉及一种比率荧光探针及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]生物胺的生物活性影响着人类健康，是维持人体正常生理活动所不可缺少的物质，它可调节体温
、
血压
、
消化
、
影响细胞等组织生理结构的形成
。
在生物胺中，酪胺的生理毒性仅次于组胺
。
人体中的酪胺通过单胺氧化酶途径代谢，而单胺氧化酶抑制剂常被用于治疗抑郁症
、
帕金森症
。
而当在接受单胺氧化酶抑制剂治疗的人群在摄入含酪胺食品时，由于酪胺代谢能力下降，而面临更高的酪胺中毒风险
。
酪胺中毒又被称为“奶酪反应”，表现为偏头痛
、
心率加快
、
恶心
、
呕吐
、
呼吸紊乱和血糖升高
。
酪胺对人体健康和食品品质造成负面影响，严格控制食物生产和流通过程中酪胺的含量具有很高的社会价值和经济价值
。
[0003]因此，迫切需要能够建立定量和直观检测酪胺的荧光检测方法，这对保证食品安全和饮食健康至关重要
。

技术实现思路

[0004]针对以上技术问题，本专利技术提供一种比率荧光探针及其制备方法和应用
。
该比率荧光探针可实时
/
现场目视定量检测酪胺，灵敏度高，检测限为
1.023/>μ
M
，检测过程便携
、
快速且成本低廉
。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术采用了如下技术方案：
[0006]第一方面，本专利技术提供一种比率荧光探针，该比率荧光探针由异硫氰酸盐染料修饰半导体聚合物量子点
(Pdots)
制备得到纳米颗粒，其在
530nm
处和
581nm
处分别具有较强的荧光发射峰；其中，异硫氰酸盐染料为异硫氰酸罗丹明
B
；半导体聚合物量子点由聚苯乙烯马来酸酐共聚物和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]构成
。
[0007]本专利技术中异硫氰酸罗丹明
B(RBI)
作为异硫氰酸盐修饰由聚苯乙烯马来酸酐共聚物
(PSMA)
和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)](PF8BT)
构成的半导体聚合物量子点得到
PF8BT
‑
RBI
比率荧光探针
。
异硫氰酸罗丹明
B
和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]的荧光作为酪胺的荧光检测信号，
RBI
作为能量受体，
PF8BT
作为能量供体，基于荧光共振能量转移
(FRET)
机理构建
PF8BT
‑
RBI
比率荧光探针，
PF8BT
能量供体吸收能量后转移到
RBI
能量受体，
RBI
能量受体发射荧光
。
根据待检测物酪胺的浓度变化，使得
PF8BT
能量供体荧光和
RBI
能量受体荧光强度发生变化，再通过
PF8BT、RBI
这两者的荧光强度比率与被检测物的浓度呈现线性关系，从而实现待测物质中酪胺的浓度的定量检测
。
同时，
PF8BT
和
RBI
荧光强度的增减导致荧光探针荧光颜色的变化，含酪胺的物质加入
PF8BT
‑
RBI
比率荧光探针后，溶液在
350nm
紫外灯激发下会由橙黄色变为黄绿色，实现了可视化检测酪胺
。
本专利技术的比率荧光探针对酪胺的
检测限为
1.023
μ
M
，低于酪胺残留允许限，可以准确检测浓度范围在0‑
250
μ
M
的酪胺；可实时
/
现场目视定量检测酪胺，使检测过程便携
、
快速且成本低廉，满足水产品新鲜度和安全性的检测需求
。
[0008]第二方面，本专利技术还提供上述比率荧光探针的制备方法，包括：
[0009]步骤1：将异硫氰酸罗丹明
B
的二甲基亚砜溶液，聚苯乙烯马来酸酐共聚物的四氢呋喃溶液和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]的四氢呋喃溶液混合，并用四氢呋喃定容，得到溶液
A
；
[0010]步骤2：在
0℃
冰水浴和超声的条件下，将所述溶液
A
一次性注入超纯水中，持续超声1‑
2min
，再向其中通入气体吹扫同时加热升温去除四氢呋喃后，收集剩余液体用超纯水定容，过滤，所得滤液即为比率荧光探针；
[0011]步骤1中所述溶液
A
中异硫氰酸罗丹明
B、
聚苯乙烯马来酸酐共聚物和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]的质量比为
0.005
‑
0.05
：
0.1
‑1：1；
[0012]所述步骤2中溶液
A
与超纯水体积比为2‑5：
10
；
[0013]所述步骤2中在通入气体吹扫同时加热升温去除四氢呋喃时的温度为
95...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种比率荧光探针，其特征在于，所述比率荧光探针由异硫氰酸盐染料修饰半导体聚合物量子点制备得到纳米颗粒，其在
530nm
处和
581nm
处分别具有较强的荧光发射峰；其中，所述异硫氰酸盐染料为异硫氰酸罗丹明
B
；所述半导体聚合物量子点由聚苯乙烯马来酸酐共聚物和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]
噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]
构成
。2.
一种权利要求1所述的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将异硫氰酸罗丹明
B
的二甲基亚砜溶液，聚苯乙烯马来酸酐共聚物的四氢呋喃溶液和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]
噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]
的四氢呋喃溶液混合，并用四氢呋喃定容，得到溶液
A
；步骤2：在
0℃
冰水浴和超声的条件下，将所述溶液
A
一次性注入超纯水中，持续超声1‑
2min
，再向其中通入气体吹扫同时加热升温去除四氢呋喃后，收集剩余液体用超纯水定容，过滤，所得滤液即为比率荧光探针；步骤1中所述溶液
A
中异硫氰酸罗丹明
B、
聚苯乙烯马来酸酐共聚物和聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
2,7
‑
二基
)
‑
alt
‑
(
苯并
[2,1,3]
噻二唑
‑
4,8
‑
二基
)]
的质量比为
0.005
‑
0.05
：
0.1
‑1：1；所述步骤2中溶液
A
与超纯水体积比为2‑5：
10
；所述步骤2中在通入气体吹扫同时加热升温去除四氢呋喃时的温度为
95
‑
110℃
，保温时间为
25
‑
30min
；所述比率荧光探针的制备方法所制的比率荧光探针的粒径为
10
‑
200nm。3.
根据权利要求2所述的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，所述异硫氰酸罗丹明
B
的二甲基亚砜溶液浓度为1‑
2mg/mL
；和
/
或所述聚苯乙烯马来酸酐共聚物的四氢呋喃溶液浓度为1‑
2mg/mL
；和
/
或所述聚
[(9,9
‑
二辛基芴基
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁兆阳，吴赣，谢晶，程琪，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：