【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】递送平台
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据
35U.S.C.
§
119
要求于
2020
年2月1日提交的第
63/144,136
号美国临时专利申请的优先权,题为“Reversible Permeabilization Platform(
可逆的渗透平台
)”,其全部内容在此明确地通过引证整体并入本文
。
[0003]本文描述的主题涉及的是利用基于溶液的细胞内递送的细胞工程平台
。
[0004]专利技术背景
[0005]不同细胞类型和细胞内递送方法之间存在细胞内递送效率的差异
。
在细胞内递送后获得足够数量的活细胞可能需要大规模的细胞工程平台,其操作成本可能很高并且需要更大量的靶细胞和试剂介质
。
使用传统系统和方法,通过可逆地渗透化少量靶细胞快速生成高质量
、
可重复的实验数据可能非常耗时且需要大量的人工
。
技术实现思路
< ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种方法,其包括:用细胞和第一培养基的混合物填充细胞工程平台的容器;以及通过过滤器将所述容器中的第一培养基排出,使所述细胞沉积在所述过滤器上,其中所述细胞工程平台包括:雾化器;以及容器支架,其配置用于接收所述容器;以及其中所述容器包括过滤器板和形成用于容纳细胞和培养基的孔的上部部分
。2.
根据权利要求1所述的方法,进一步包括将含有有效载荷的递送溶液喷射到沉积在所述过滤器上的细胞上
。3.
根据权利要求2所述的方法,进一步包括在所述腔室内施加终止溶液
。4.
根据权利要求3所述的方法,进一步包括用第二培养基填充所述容器以将所述细胞从所述过滤器再悬浮
。5.
根据权利要求4所述的方法,其中所述排出的第一培养基被重新用作第二培养基
。6.
根据权利要求4所述的方法,进一步包括搅动所述容器
。7.
根据权利要求4所述的方法,进一步包括从所述容器中提取所述再悬浮的细胞
。8.
根据权利要求4所述的方法,其中填充所述容器是使用泵和控制器自动进行的
。9.
根据前述任一权利要求所述的方法,进一步包括在所述容器内培养所述细胞
。10.
根据前述任一权利要求所述的方法,其中从所述容器中排出所述第一培养基是通过向所述容器的底部提供真空来进行的
。11.
根据前述任一权利要求所述的方法,其中从所述容器中排出所述第一培养基是通过重力执行的
。12.
根据权利要求3所述的方法,其中施加所述终止溶液是为了清洗所述细胞而进行的
。13.
根据权利要求4所述的方法,其中用所述第二培养基填充所述腔室是作为细胞清洗过程
、
细胞浓度改变过程和细胞培养基改变过程中的至少一种进行的
。14.
根据前述任一权利要求所述的方法,其中所述容器包括可释放地连接到所述过滤器板的下部部分
。15.
根据前述任一权利要求所述的方法,其中所述容器包括存储器,其存储表征至少一个工艺参数的数据
。16.
根据权利要求
15
所述的方法,进一步包括:由所述细胞工程平台的控制器从所述存储器读取所述至少一个工艺参数;以及利用所述至少一个工艺参数执行至少一个处理步骤
。17.
根据前述任一权利要求所述的方法,其中所述容器包括存储器,其存储表征实验标识符的数据
。18.
根据权利要求1‑
17
任一权利要求所述的方法,其中所述容器包括腔室
。19.
一种系统,其包括:壳体,其包括容器支架,配置用于接收容器,所述容器包括过滤器板和形成孔的上部部分;递送溶液施加器,其配置用于向所述孔递送雾化后的递送溶液;
显示器;以及控制器,其包括配置用于显示至少一个工艺参数的电路
。20.
根据权利要求
19
所述的系统,其中所述容器支架配置用于倾斜或振动所述容器
。21.
根据权利要求
19
‑
20
中任一权利要求所述的系统,其中所述递送溶液施加器包括喷头
。22.
根据权利要求
19
‑
21
中任一权利要求所述的系统,其中所述容器的尺寸设定为容纳少于
1x 107T
细胞
。23.
根据权利要求
19
‑
22
中任一权利要求所述的系统,其中所述系统被配置用于自动地:将雾化的递送溶液施加到所述容器内的过滤器上形成的细胞单层上
。24.
根据权利要求
19
‑
23
中任一权利要求所述的系统,其中所述递送溶液施加器包括雾化器
。25.
根据权利要求
24
所述的系统,其中所述递送溶液施加器进一步包括质量流量控制器或体积流量控制器,用于调节气体流量以操作所述雾化器
。26.
根据权利要求
19
‑
25
中任一权利要求所述的系统,其中所述递送溶液施加器配置为每次致动递送
10
‑
300
微升所述递送溶液
。27.
根据权利要求
19
‑
26
中任一权利要求所述的系统,进一步包括容纳所述递送溶液的储存容器,其中所述递送溶液包括水溶液,所述水溶液包括有效载荷
。28.
根据权利要求
27
所述的系统,其中所述水溶液包括浓度大于
0.2
%
(v/v)
的醇,并且所述醇包括乙醇
。29.
根据权利要求
28
所述的系统,其中所述水溶液包括大于5%的乙醇
。30.
根据权利要求
28
所述的系统,其中所述水溶液包括5‑
30
%的乙醇
。31.
根据权利要求
27
所述的系统,其中所述水溶液不含醇
。32.
根据权利要求
27
所述的系统,其中所述水溶液包括
12.5
‑
500mM KCl。33.
根据权利要求
27
所述的系统,其中所述水溶液包括
106mMKCl。34.
根据权利要求
19
‑
33
中任一权利要求所述的系统,其中所述孔配置用于包含非粘附细胞群
。35.
根据权利要求
34
所述的系统,其中所述非粘附细胞包括外周血单核细胞
。36.
根据权利要求
34
所述的系统,其中所述非粘附细胞包括免疫细胞
。37.
根据权利要求
34
所述的系统,其中所述非粘附细胞包括
T
淋巴细胞
。38.
根据权利要求
19
‑
27
中任一权利要求所述的系统,其中所述有效载荷包括信使核糖核酸
(mRNA)。39.
根据权利要求
38
所述的系统,其中所述
mRNA
编码基因编辑组合物
。40.
根据权利要求
39
所述的系统,其中所述基因编辑组合物减少
PD
‑1的表达
。41.
根据权利要求
38
所述的系统,其中所述
mRNA
编码嵌合抗原受体
。42.
根据权利要求
19
‑
41
中任一权利要求所述的系统,其中所述系统被配置用于将货物化合物或组合物递送至哺乳动物细胞
。43.
根据权利要求
19
‑
42
中任一权利要求所述的系统,其中所述非粘附细胞包括单层
。
44.
根据权利要求
19
‑
43
中任一权利要求所述的系统,其中所述容器包括存储器,其存储表征至少一个工艺参数的数据
。45.
根据权利要求
44
所述的系统,其中所述控制器进一步配置用于:通过所述电路从所述存储器读取表征所述至少一个工艺参数的数据,以及通过所述电路利用所述至少一个工艺参数执行至少一个处理步骤
。46.
根据权利要求
19
‑
45
中任一权利要求所述的系统,其中所述容器包括存储器,其存储表征实验标识符的数据
。47.
一种系统,其包括:壳体,其包括:基座,至少一个控制器,所述控制器包括配置用于控制所述系统的操作的电路,以及显示器;一个或多个流体回路,其包括至少一个阀门
、
至少一个泵
、
一个注射器和至少一个流体检测传感器;腔室组件,其容纳在从壳体的前表面延伸的铰接框架内,其中所述腔室组件在操作中与大气条件密封并包括过滤器;至少一个介质容器;至少一个细胞培养容器,其通过所述一个或多个流体回路与所述腔室组件流体连接;以及至少一个收集托盘,其配置用于接收所述介质或细胞
。48.
根据权利要求
47
所述的系统,其中所述铰接框架配置用于搅动所述腔室组件
。49.
根据权利要求
47
‑
48
中任一权利要求所述的系统,其中所述腔室组件包括存储器,其存储表征至少一个工艺参数的数据
。50.
根据权利要求
49
所述的系统,其中所述至少一个控制器配置用于:通过所述电路从所述存储器读取表征所述至少一个工艺参数的数据,以及通过所述电路利用所述至少一个工艺参数执行至少一个处理步骤
。51.
根据权利要求
47
‑
50
所述的系统,其中所述腔室组件包括存储器,其存储表征实验标识符的数据
。52.
根据权利要求
47
‑
51
中任一权利要求所述的系统,其中所述系统的操作包括细胞...
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