一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法技术

一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，包括：制备发射波长为

【技术实现步骤摘要】
一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法


[0001]本专利技术涉及化学检测试剂盒
，具体涉及一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法
。

技术介绍

[0002]阿维巴坦
(AVI)
和头孢他啶
(CFZ)
是一种新型
β
‑
内酰胺类抗生素
‑
β
‑
内酰胺类酶抑制剂合剂，阿维巴坦
(AVI)
和头孢他啶
(CFZ)
组合具有广谱抗菌活性，对包括耐药革兰氏阴性菌在内的多重耐药革兰阴性杆菌具有强有力的杀菌活性可以安全有效地对抗大多数革兰阴性菌
‑
多重耐药引起的感染
。
同时为了减少药物毒副作用，有必要研究其药代动力学并优化给药方案
。
因此，建立同时测定
CFZ
和
AVI
方法至关重要
。
然而，治疗性药物监测很容易受到周转时间缓慢的阻碍，导致常规临床实践中的给药延迟
。
因此有必要建立一种快速
、
准确的治疗性药物监测方法来测定血液中
CFZ
和
AVI
的浓度
。
[0003]荧光分析法具有操作简单
、
灵敏度高
、
检测速度快等优点，是分析检测领域中一种常用的分析检测方法，可以很好的实现对
AVI
和
CFZ
的分析检测
。
荧光分析法的核心由荧光信号分子和特异性识别元件组成
。
量子点材料具有荧光量子产率高
、
导热性好
、
化学稳定性优异
、
生物相容性好等突出的物理化学性能，而且具有制备工艺简便
、
易于修饰和光学特性可调等优点，非常适合作为荧光分析法的荧光信号分子
。
荧光分析法除了需要灵敏度高的荧光信号分子外，还需要能够对目标物进行特异性识别捕获的特异性识别元件
。
[0004]目前常用的特异性识别材料主要有抗原
‑
抗体和酶等，它们特异性识别能力强，专一性好
。
但是存在制备耗时，成本较高，不易长期存储等缺点，因此限制了其应用
。
表面印迹技术相对于传统分子印迹技术，其所获得的材料更加均匀
、
结合速度更快且结合位点更多
。
但是，分子印迹聚合物在水介质中的分散性不好，容易聚沉，从而影响荧光信号的稳定检测
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，克服了现有技术的不足，通过将双模板表面印迹技术
、
水凝胶技术和荧光化学传感器技术相结合，将分子印迹聚合物与量子点的核壳复合物作为检测试剂固定在水凝胶里面，提高了荧光化学传感器对模板分子的特异性识别能力和预防传感器污染的自清洁能力
。
在一个试剂盒中，一次性实现了多个样本溶液中
AVI
和
CFZ
的同时测量
。
[0006]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：
[0007]一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
[0008]步骤
S1
：制备发射波长为
600nm
的
CdTe
‑
QDs
材料；
[0009]步骤
S2
：通过化学键将头孢他啶和阿维巴坦键合在步骤
S1
所得到的
CdTe
‑
QDs
材料表面，制备双模板表面分子印迹聚合物；
[0010]步骤
S3
：将海藻酸钠粉末溶解在去离子水中，然后搅拌2‑4小时；之后将步骤
S2
中
所制备的双模板表面分子印迹聚合物添加到溶液中并不断搅拌，直到材料均匀分散；
[0011]步骤
S4
：将步骤
S3
所得到的溶液添加到含有
CaCl2溶液的
96
微孔板中；4‑6分钟后，得出同时检测头孢他啶和阿维巴坦的高通量荧光检测试剂盒
。
[0012]优选地，所述步骤
S1
的具体步骤包括：
[0013]步骤
S11
：将
0.3mL
巯基乙酸添加到
110mL
水中，搅拌5分钟；
[0014]步骤
S12
：再将步骤
S11
的溶液中加入
0.508g
的
CdCl2，并在室温下连续搅拌
30
分钟；
[0015]步骤
S13
：在步骤
S12
的溶液中加入
1.25g
的
NaBH4，并加热至
95℃
，再缓慢加入
10mL
的
0.1mol/L
的
Na2TeO3溶液，再使混合溶液在
95℃
下回流
13
小时；
[0016]步骤
S14
：使用离心过滤得到
CdTe
‑
QDs
分散液，并将其保存在
4℃
的深色玻璃容器中
。
[0017]优选地，所述步骤
S2
的具体步骤包括：
[0018]步骤
S21
：在磁力搅拌下，在
1mL
的
CdTe
‑
QDs
分散液中加入
50
μ
L
的1‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基
)
碳酰二亚胺和
N
‑
羟基丁二酰亚胺混合溶液，并反应
30
分钟；
[0019]步骤
S22
：再在步骤
S21
的溶液中加入
1mL
的头孢他啶和阿维巴坦的混合溶液，反应2小时，使得将头孢他啶和阿维巴坦同时固定在
CdTe
‑
QDs
表面，并将固定的头孢他啶和阿维巴坦作为模板分子，即得头孢他啶
、
阿维巴坦功能化的
CdTe
‑
QDs
分散液；
[0020]步骤
S23
：将
1.8mL
曲拉通添加到
7.5mL
环己烷中，磁力搅拌
15min
，得到混合溶液；再将
400
μ
L
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤
S1
：制备发射波长为
600nm
的
CdTe
‑
QDs
材料；步骤
S2
：通过化学键将头孢他啶和阿维巴坦键合在步骤
S1
所得到的
CdTe
‑
QDs
材料表面，以制备双模板表面分子印迹聚合物；步骤
S3
：将海藻酸钠粉末溶解在去离子水中，然后搅拌2‑4小时；之后将步骤
S2
中所制备的双模板表面分子印迹聚合物添加到溶液中并不断搅拌，直到材料均匀分散；步骤
S4
：将步骤
S3
所得到的溶液添加到含有
Ca
2+
溶液的
96
微孔板中；4‑6分钟后，得出同时检测头孢他啶和阿维巴坦的高通量荧光检测试剂盒
。2.
根据权利要求1所述的一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤
S1
的具体步骤包括：步骤
S11
：将巯基乙酸添加到水中，搅拌4‑6分钟；步骤
S12
：再在步骤
S11
的溶液中加入
CdCl2，并在室温下连续搅拌
20
‑
40
分钟；步骤
S13
：在步骤
S12
的溶液中加入
NaBH4，并加热至
95℃
，再缓慢加入
Na2TeO3溶液，再使混合溶液在
95℃
下回流
10
‑
15
小时；步骤
S14
：使用离心过滤得到
CdTe
‑
QDs
分散液，并将其保存在深色玻璃容器中
。3.
根据权利要求1所述的一种高通量荧光检测头孢他啶和阿维巴坦试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤
S2
的具体步骤包括：步骤
S21
：在磁力搅拌下，在
CdTe
‑
QDs
分散液中加入1‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基
)
碳酰二亚胺和
N
‑
羟基丁二酰亚胺混合溶液，并反应
20
‑
40
分钟；步骤
S22
：再在步骤
S21
的溶液中加入头孢他啶和阿维巴坦的混合溶液，反应2小时，使得将头孢他啶和阿维巴坦同时固定在
CdTe
‑
QDs
表面，并将固定的头孢他啶和阿维巴坦作为模板分子，即得头孢他啶
、
阿维巴坦功能化的
CdTe
‑
QDs
分散液；步骤
S23
：将曲拉通添加到环己烷中，磁力搅拌
10
‑
20
分...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘嘉琳，李迎春，瞿洪平，杨娇，王晓丽，刘育坚，杨之涛，黄菁菁，张博顺，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属瑞金医院，
类型：发明
国别省市：