【技术实现步骤摘要】
基于纳米酶水凝胶比色检测抗生素的方法
[0001]本专利技术属于生物传感
，具体涉及一种基于纳米酶水凝胶比色检测抗生素的方法
。
技术介绍
[0002]抗生素是一类由微生物和高等植物产生的具有多种抗病原体活性的次级代谢产物，用于治疗畜牧业和水产养殖业的细菌感染
。
作为一种常用的氨基糖苷类抗生素，卡那霉素可有效治疗革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌
。
然而，卡那霉素的过度使用导致其在动物源性食品中的残留，并且食用后可能对人体健康造成巨大威胁，例如氨基糖苷类肾毒性
、
过敏反应和耐药性
。
目前，卡那霉素的检测方法主要有高效液相色谱
(HPLC)、
液相色谱
‑
质谱
(LC
‑
MS)
和免疫分析等，但这些方法检测程序复杂，精密仪器昂贵，无法快速检测
。
而比色法，因其操作简单
、
灵敏度高和结果直观受到广泛的关注
。
[0003]然而，本申请专利技术人在前期研究中发现，在当前的快速比色检测方法中，大多数检测方法属于液相检测，虽然具有一定的检测效率，并能够满足当前现场检测的需求，但仍然存在以下缺点和不足：
(1)
由于便捷性不足和稳定性差，液相检测方法在现场即时检测中容易受到影响；
(2)
这些检测方法复杂，需要多步操作才能达到最终的检测目的；
(3)
有些检测方法对环境要求苛刻，对试剂的...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种基于纳米酶水凝胶比色检测抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)
多孔
Fe/CeO
2 HB
纳米酶的制备：将乙酸铈和聚乙烯吡咯烷酮加入到乙醇和水的混合溶液中，得到
A
溶液；将铁氰化钾溶于水中，得到
B
溶液；将上述的
A
溶液和
B
溶液混合，静置，得到
Fe
‑
Ce
前驱体；将上述的
Fe
‑
Ce
前驱体在
400℃
～
600℃
进行高温碳化，得到
Fe/CeO
2 HB
；
(2)
纳米酶水凝胶的制备：
(2.1)
将步骤
(1)
得到的
Fe/CeO
2 HB
与核酸适配体混合，进行孵育，得到
Fe/CeO2HB@Apt
；
(2.2)
将琼脂糖水凝胶和
90℃
～
100℃
的水混合，待温度冷却至
45℃
～
50℃
后，加入步骤
(2.1)
得到的
Fe/CeO
2 HB@Apt
，搅拌，得到纳米酶水凝胶；
(3)
已知抗生素浓度的检测体系的制备：将步骤
(2.2)
得到的纳米酶水凝胶分别与不同浓度的含抗生素溶液混合，然后加入醋酸钠缓冲溶液，进行孵育，再加入过氧化氢溶液和
3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液进行显色反应，得到标准溶液；
(4)
空白对照体系的制备：将步骤
(2.2)
得到的纳米酶水凝胶与醋酸钠缓冲溶液混合，进行孵育，然后加入过氧化氢溶液和
3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液进行显色反应，得到空白对照体系溶液；
(5)
测定步骤
(3)
得到的标准溶液和步骤
(4)
得到的空白对照体系溶液在
652nm
波长下的吸光度值，得到抗生素浓度与吸光度值的检测线性关系，根据含抗生素的待测样品的吸光度值，得到含抗生素的待测样品对应的抗生素浓度
。2.
根据权利要求1所述的基于纳米酶水凝胶比色检测抗生素的方法，其特征在于，步骤
(4)
中，所述空白对照体系溶液呈深蓝色，当加入含抗生素的待测样品时，体系溶液蓝色变浅，可以实现定性检测待测样品中是否含有抗生素
。3.
根据权利要求1所述的基于纳米酶水凝胶比色检测抗生素的方法，其特征在于，步骤
(5)
中，当抗生素为卡那霉素时，所述核酸适配体为卡那霉素核酸适配体，所述卡那霉素核酸适配体具有
SEQ ID No.1
所示的核苷酸序列，所述卡那霉素浓度与吸光度值的的检测回归方程为：
△
A
＝
‑
0.16 lgC
KAN
(nM)+1.05
ꢀꢀꢀꢀꢀ
(1)
式
(1)
中，
△
A
表示吸光度值；
...
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