鱿鱼环齿蛋白重组力学功能蛋白的制备方法及应用技术

技术编号:39744914 阅读:49 留言:0更新日期:2023-12-17 23:44
本发明专利技术提供了一种鱿鱼环齿蛋白重组力学功能蛋白的制备方法及应用

【技术实现步骤摘要】
鱿鱼环齿蛋白重组力学功能蛋白的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于生物工程和发酵工程领域,更具体地,本专利技术涉及鱿鱼环齿蛋白重组力学功能蛋白的制备方法及应用


技术介绍

[0002]鱿鱼环齿
(squid ring teeth

SRT)
蛋白拥有优良的物理化学性质,如弹性

高机械强度

柔韧性

导电导热性等,这种蛋白质可用来制造植入式传感器

生物降解塑料

自我修复织物等

但一只成年鱿鱼可提取的鱿鱼环齿蛋白质仅有
100mg
左右

[0003]鱿鱼环齿蛋白可从鱿鱼触手吸盘中提取得到,具有高度重复的模块化结构,每个重复模块均包含晶体结构域和非晶体的无定型结构域

晶体结构域含有较多丙氨酸,最终堆叠形成
β

sheets
结构;无定形部分富含甘氨酸和酪氨酸,最终形成不规则的柔性结构
。本文档来自技高网
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种提高鱿鱼环齿蛋白

力学功能蛋白在生物合成中的产量的方法,其特征在于,所述方法包括:利用重组大肠杆菌,以
IPTG
诱导重组表达鱿鱼环齿蛋白

力学功能蛋白;所述重组大肠杆菌的胞内包含所述鱿鱼环齿蛋白

力学功能蛋白的表达盒;发酵过程中,首先进行基础培养,待碳源耗尽后起始补糖:在起始补糖至以
IPTG
诱导前的阶段中,调控重组大肠杆菌的比生长速率在
0.35

0.85h
‑1;在
IPTG
诱导之后的阶段,调控比生长速率在
0.15

0.36h
‑1。2.
如权利要求1所述的方法,其特征在于,以在线活细胞电容值为指标,反馈调控供氧和补糖速率,进而调控比生长速率;较佳地,应用活细胞传感仪测得电容值,以之表征活细胞的浓度,基于此计算比生长速率
。3.
如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述比生长速率
μ
our
如下计算:其中,
X

a
·
Cap
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
公式1;
Cap
为电容值;较佳地,该电容值由活细胞传感仪测定获得
。4.
如权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵起始后
6.5
±
1.5
小时,较佳地发酵起始后
6.5
±1小时,更佳地发酵起始后
6.5
±
0.5
小时,进行
IPTG
诱导
。5.
如权利要求1所述的方法,其特征在于,在
IPTG
诱导之后的
1.5

2.5
小时,维持比氧消耗速率
Q
O2
水平调节
30

50mmol/L/h/Cap
;较佳地
35

45mmol/L/h/Cap。6.
如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述比氧消耗速率
Q
O2
如下计算:
Q
O2

OUR/X
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
公式4;其中,
X

a
·
Cap
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
公式1;
Cap
为电容值;较...

【专利技术属性】
技术研发人员:钱江潮殷仁凯杭海峰王泽建庄英萍
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

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