无色涡鞭毛藻抗氧化提取物的生产和用途制造技术

本发明专利技术涉及无色涡鞭毛藻（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ　　ｓｐ）的抗氧化提取物。本发明专利技术还涉及含有一种或多种多不饱和脂肪酸和／或一种或多种多不饱和脂肪酸酯和根据本发明专利技术的至少一种提取物和不同于无色涡鞭毛藻生物量的组分的脂肪酸组合物，和涉及生产该脂肪酸组合物的方法和其用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】无色涡鞭毛藻抗氧化提取物的生产和用途本专利技术涉及无色涡鞭毛藻(Crypthecodinium sp)的提取物，其生产 方法和用途，特别是针对含有一或多种长链多不饱和脂肪酸和/或一或 多种长链多不饱和脂肪酸酯的脂肪酸组合物的抗氧化稳定性。长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)是人体新陈代谢的必需脂肪酸。 PUFAs可以细分为两大家族，除了其起始于亚油酸的w-6 PUFAs家族， 还有其起源于a -亚麻酸的"-3 PUFAs家族。PUFAs是细胞膜、视网膜、脑膜的重要组成元件和诸如前列腺素、 血栓素和白细胞三烯这些重要激素的前体。除了作为组成元件的功能外，近年来不断发现PUFAs直接对人体 器官和疾病具有多重有益效果。大量的临床研究发现PUFAs对治愈和减缓病情作出了重要贡献， 例如癌症、类风湿性关节炎、高血压、神经性皮炎和许多其他疾病。 在这些情况下二十二碳六烯酸(DHA;全-顺-4，7，10,13，16，19-二十二碳 六烯酸)及其衍生物，特别是DHA酯，就常常特别具有优势，因为这 种酯(特别是乙酯和甘油三酯)倾向于具有宜人的口感，容易被消化 系统吸收。这些发现原先造成了国际机构和权威推荐控制每日需摄入 PUFAs的事实。PUFAs不能由人体从头合成，因为缺少将双键在〉C9位置导入碳 链中的酶系统(缺少厶12-去饱和酶)。人们只能通过饮食中的脂肪酸 前体(如a-亚麻酸)的供应合成多不饱和脂肪酸。然而，这个量是否 能够满足多不饱和脂肪酸的需求有待讨论。绝大多数的必需脂肪酸通过饮食摄取。特别是植物油富含o-6脂 肪酸(例如月见草油含有Y-亚油酸(GLA))但链长只达到C18，鱼 油和微生物来源的油含"-3脂肪酸(例如鲑鱼油含有二十碳五烯酸 (EPA)和二十二碳六烯酸(DHA;全-顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六 烯酸))。大体上，鱼油和微生物来源的油是多不饱和脂肪酸的唯一 商业来源。然而通常所需的PUFAs的含量过低，并且存在于混合物中， 这样也可能存在显示拮抗作用的PUFAs。为了摄取每日推荐剂量的 PUFAs，因此必须要摄入大量的油。特别地，这适用于必须消耗高剂量 PUFAs的病人(例如囊性纤维化病)。为了尽可能以耙向方式达到单 独PUFAs的效果，必须使用富集的或高纯度的PUFAs。因此在现有技 术中迫切需要高纯度PUFAs。很多方法被单独或组合起来使用以从大量天然存在的来源中分离 (或至少浓縮)和回收脂肪酸及其衍生物。这些方法包括低温分步结 晶、分子蒸馏、尿素加合物结晶、金属盐溶液提取、反相柱分离超临 界流体分部和HPLC方法。考虑到PUFAs对氧化作用的敏感，通常必须加入合适的抗氧化剂 来稳定。为了这个目的，商业上特别使用天然生育酚，又特别是提取 自大豆油的a-、 P-、 Y-和S-生育酚和/或生育三烯酚类的混合物。此 外已知一些化合物，例如棕榈酸抗坏血酸酯酯，能协同作用。因此除 了生育酚，它们也能被使用。然而天然抗氧化剂的效果并不能随着浓度的增加而无限增加。例 如，a-生育酚早至100ppm其活性就逆转，并且发生促氧化作用。这 意味着过量可能引起不利后果。可替代地，公布的WO03092628提出了一种在温和条件下作用逐 步加强的油的用途。这种情况下必须以该方式进行制备，即首先将含200680002978.5说明书第3/17页多不饱和脂肪酸的生物量与酶反应然后分离脂质。尽管该方法获得的 油起初氧化程度不高，然而它还是显示出多不饱和脂肪酸氧化性质的 敏感性。根据现有技术，因此本专利技术的目的是显示脂肪酸组合物增强的抗 氧化稳定性的可能。在这种情况下要尽可能增加抗氧化活性，但不能 加入对健康有害的物质，从而使脂肪酸组合物能无保留地应用在食品 领域。本专利技术的另一个目的是详细说明生产本专利技术脂肪酸组合物的方 法，它使得可以尽可能以简单的方式大规模廉价生产。此外还应指出本专利技术的脂肪酸组合物应用于特别有优势的领域。 尽管没有明确指出，但可以从申请文本中明确推出或不可避免地导出 的这些或其他目的能通过无色涡鞭毛藻的提取物达到。权利要求1的从属权利要求描述了本专利技术提取物的有利修饰。权 利要求11-19要求保护的范围是对抗氧化剂稳定的脂肪酸组合物。方法 权利要求保护特别适用于生产本专利技术脂肪酸组合物的模式，用途权利 要求描述了特别适用于本专利技术脂肪酸组合物应用的优势领域。通过提供无色涡鞭毛藻的抗氧化提取物，以不容易预见的方式成 功获得了具有特别高抗氧化活性的提取物，这种提取物特别适用于使 脂肪酸组合物抗氧化稳定，特别是含有至少一种不饱和脂肪酸和/或至 少一种不饱和脂肪酸酯的脂肪酸组合物。这样根据本专利技术无需添加对 健康有害的物质就能增加抗氧化活性，即可以放心将本专利技术的脂肪酸组合物应用到食品领域。例如隐甲藻(Crythecodinium cohnii)油已用 于婴儿食品中，在美国归于GRAS (通常认为是安全的) 一类。本专利技术的脂肪酸组合物能以简单的方式大规模廉价地生产。 本专利技术的脂肪酸组合物含有至少一种来自于无色涡鞭毛藻，优选 隐甲藻的抗氧化提取物。申请文件中"脂肪酸组合物"的表达不仅包 括含有游离脂肪酸的组合物，也包括含有脂肪酸衍生物优选脂肪酸酯， 特别是脂肪酸甘油三酯的组合物，这样脂肪酸根大体上一致或不同。本专利技术的脂肪酸表示脂肪羧酸，它可以是饱和的，或单不饱和，或多不饱和，优选含6-30个碳原子。无色涡鞭毛藻中获得的提取物本身己知。根据本专利技术，不仅可使 用无色涡鞭毛藻野生菌株提取物，还可以使用无色涡鞭毛藻菌株的突 变体或重组体。申请文件中"无色涡鞭毛藻提取物"的表达包括所有用溶剂从无 色涡鞭毛藻生物量，优选为油中提取获得的组合物，溶剂优选有机溶 剂和/或超临界溶剂，特别是有机溶剂。同样可以使用溶剂混合物。本专利技术的提取物具有优选比其来源的生物量具有更大的抗氧化活 性。因此优选它的过氧化物值小于最初使用的优选为新鲜分离的其来 源的生物量的过氧化物值，并且优选为提取物来源的生物量过氧化物值的最多50.0%，更优选最多25.0%，有利地最多10.0%，特别是最 多1.0%。这种情况下，过氧化物值优选用AOCS(美国油类化学家协会) 官方方法Cd-3d63的说明测定，有利地在2周的敞开贮存之后。本专利技术提取物的抗氧化能力大于15000 Trolox等价物，更优选为 大于20000 Trolox等价物，有利地大于25000 Trolox等价物，特别优 选大于30000 Trolox等价物，又特别大于35000 Trolox等价物(ug/ml)。 Trolox⑧是6-羟基-2，5，7,8-四甲基色烷-2-羧酸惯常使用的商品名。根据本专利技术"生物体的生物量"的表达不仅包括生物体的全部细胞，还包括生物体的个体细胞组分。无色涡鞭毛藻提取物通过培养微生物、从培养物收获生物量、分 解生物量和分离提取物有利地获得。为了分离提取物，优选使用有机溶剂提取的方法，特别是用己烷 或超临界液体。本专利技术特别优选用有机溶剂提取的方法。有利地，用 己垸浸透干的生物量从而提取生物量中的提取物。这种用有机溶剂提取在WO 9737032、 WO 9743362和EP 515460和其他内容一起得到描 述。 还 可 以 在 Journal of Dis本文档来自技高网...

【技术保护点】
来自无色涡鞭毛藻（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ　　ｓｐ）的抗氧化提取物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：德克法布里蒂乌斯，多琳诺伊曼，
申请(专利权)人：努特诺瓦营养产品及食品成分有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]