经修饰的链球菌多糖及其用途制造技术

此处提供了经修饰的链球菌多糖和使用所述经修饰的多糖的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及包含细菌多糖和经修饰的多糖的组合物，和更特别地 涉及使用所述多糖在哺乳动物中诱导免疫应答的用途。背景B组链球菌是美国和世界其他地方新生儿敗血症和脑膜炎的主要 病因 (Anthony和Okada，爿層^#<5(1， 28: 355-69， 1977; Baker， 胁/"固ifetf.， 25: 475-501, 1980; DUlion等人，/iW/a"" 110(1): 31-6, 1987)。在1990年代以前，实质上所有的攻击性B组链 球菌(GBS)感染都是由血清型Ia、 Ib、 II和III引起的。在1990年代 的儿科学文献中出现新血清型V型感染新生要儿的报导(Greenberg 等 ， J.Pediatr. 123 (3): 494-5， 1993; Hervas 和 Benedi，J Pediatr. ， 123 (5): 839, 1993: Rench and Baker,JPediatr.， 122 (4): 638-40，1993 )。由V型GBS引起的感染在1990年 代中期前明显地变得更加普遍，且该血清型现在被认为是新生婴儿和 孕妇中感染的共同病因 (Zaleznik等人，Zo尸eW , 30 (2): 276-81， 2000)。 V型GBS的荚膜多糖及其他GBS的荚膜多糖 (CPS)具有共同的结构特征但其抗原性不同(Wessels等人，/chem., 266 (11): 6714-9， 1991)。概述本专利技术部分地基于这样的观察，即可通过改变多糖的结构例如显 露多糖上的优势免疫表位来增强细菌多糖的免疫原性。我们已发现经 化学修饰从而除去多糖的一个或多个侧链残基的GBS V型荚膜多糖 (GBS V CPS或GBS V PS)在灵长类动物中引发有效的IgG反应。在一个方面，本专利技术表征了包含经修饰的细菌多糖的抗原组合物。 所迷经修饰的细菌多糖可以是结构经修饰以显露免疫原表位辆如优势 免疫表位的多糖形式。多糖的修饰可增强多糖在宿主生物中的免疫原 性和/或刺激免疫应答，该免疫应答在保护宿主生物方面比通过未修饰 的(例如，天然的)多糖形式诱导的保护作用更有效。可增强免疫原 性的修饰包括从多糖的主链残基除去一个或多个侧链糖残基的修饰。在一个实施方案中，经修饰的多糖诱导抗体反应，例如，与该多 糖的天然形式相比，增强的抗体反应，例如哺乳动物(例如，灵长类 动物)中的保护性抗体反应。在一个实施方案中，多糖诱导IgG反应。 多糖可与载体部分例如多肽(例如，细菌多肽)物理结合。经修饰的 多糖可包含此处描述的特征(例如，修饰的多糖可以是例如经修饰的 B組链球菌(GBS) V型多糖，例如，该多糖经修饰以除去一个或多个 側链糖，例如，经修饰的多糖是脱氨GBSV型多糖或去唾液酸化GBSV 型多糖)。在另一个方面，本专利技术表征了抗原组合物，其包括(a)经修饰的 GBSV型多糖；和(b)与该多糖物理(例如，共价地)结合的部分。可 通过从多糖除去一个或多个侧链糖残基的处理来修饰该多糖。例如，-末端唾液酸残基的条件下处理该多糖。在一个实施方案中，多糖是去 唾液酸GBS V型多糖。在一个实施方案中，通过在从多糖的主链除去 三糖侧链的条件下进行处理来修饰多糖。可通过顺序地去唾液酸化、 去乙酰化和脱氨作用修饰多糖。在一个实施方案中，所述多糖是脱氨 GBS V型多糖。在一些实施方案中，在细菌(例如，GBS V细菌)中产生经修饰 的多糖，所述细菌经基因改造以合成以经修饰的形式存在的多糖(例 如，细菌对于将侧链加至多糖的酶的表达是有缺陷的，或细菌表达或 过量表达从多糖除去侧链的酶)。与经修饰的GBS多糖结合的部分是，例如，增强经修饰的多糖对 抗原呈递细胞的结合的化合物，例如多肽，例如细菌多肽，例如细胞 表面多肽或分泌的细菌多肽。可直接或通过结合剂将多肽连接至多糖。 在各种实施方象中，所述多肽是GBS多肽，例如细胞表面或分泌的GBS 多肽。在各种实施方案中，多肽是GBS多肽，例如细胞表面或分泌的 GBS多肽。在各种实施方案中，GBS多肽选自GBSC蛋白(x多肽、GBS C 蛋白P多肽、s多肽、R蛋白、oc样蛋白、b组链球菌1的表面蛋白 (spbl)、spb2、层粘连蛋白结合蛋白(Lmb)、C5a肽酶、基质粘附(Ema) 多肽及其抗原片段和变体。GBS多肽可以是GBS Ia、 Ib、 II、 III、 IV、 V、 VI、 VII或VIII型的多肽。在一个实施方案中，所述多肽是由 Tettelin等人，尸ro"""ca"c/ " "， 99 (19): 12391-6， 2002 中的GBS V基因组的序列中筌定的基因产物编码的多肽，所述文献的 内容在此以其全文引用作为参考。在一个实施方案中，所述多肽是细谅毒素或类毒素，例如破伤风 类毒素、白喉类毒素、白喉突变蛋白可交叉反应性物质(CRM197)或其 抗原片段。组合物可包含超过一种类型的载体部分。例如，经修饰的多糖可 连接至2、 3、 4或5个不同的多肽，例如，2种或更多种细菌多肽， 例如细菌类毒素和GBS C蛋白a 。组合物的多糖组分可以是至少1千道尔顿(kD)、 5kD、 10kD、 15 kD、 20 kD、 25 kD或50 kD。组合物可具有0， 1 ~ SOOjig,例如0. 5 ~ 100ng、 1 50ng或5~25^g的量的多糖。在一个实施方案中，组合物还包含可药用载体。在一个实施方案 中，组合物还包含佐剂，例如明矾。组合物还可包含第二多糖，例如另一种GBS血清型或非GBS细菌的多糖，例如，除了经修饰的GBS V型多糖外的GBS Ia、 Ib、 II、 III、 IV、 VI、 VII或VIII型多糖中的一种或多种多糖。在另一个方案，本专利技术描述了在哺乳动物中引发免疫应答的方法。 该方法包括，例如，给哺乳动物施用组合物，该组合物包含(a)经 修饰的细菌多糖，例如，经修饰的B组链球菌(GBS) V型多糖；和， 任选地，(b)与该多糖物理结合的(例如，共价结合的)部分；从而 在哺乳动物中引发免疫应答。可通过在从多糖去除側链-末端唾液酸残基的条餘下进行处理来 修饰多糖，例如去唾液酸化的GBS V型多糖。可通过在从多糖的主链 除去三糖侧链的条件下进行处理来修饰多糖。可通过顺序地去唾液酸 化、去乙酰化和脱氨作用来修饰多糖。在一个实施方案中，所述多糖 是脱氨GBS V型多糖。与经修饰的GBS多糖结合的部分可以是多肽，例如，细菌多肽， 例如细胞表面或分泌的细菌多肽。在各种实施方案中，所述多肽是GBS 多肽，例如，细胞表面或分泌的GBS多肽。在各种实施方案中，GBS 多肽选自GBSC蛋白a多肽、GBSC蛋白P多肽、s多肽、R蛋白、oc 样蛋白、b组链球菌l的表面蛋白l (spbl)、 spb2、层粘连蛋白结合 蛋白(Lmb)、 C5a肽酶、基质粘附(Ema)多肽及其抗原片段和变体。GBS 多肽可以是GBS Ia、 Ib、 II、 III、 IV、 VI、 VII或VIII型的多肽。在一个实施方案中，所述多肽是细菌毒素或类毒素，例如破伤风 类毒素、白喉类毒素、白喉突变蛋白交叉反应性物质(CRM1")或其抗 原片段，所述组合物可包含超过一种类型本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗原组合物，其包含：　　　　（ａ）经修饰的Ｂ组链球菌（ＧＢＳ）Ｖ型多糖；和　　　　（ｂ）共价地和所述多糖结合的部分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：DL卡斯珀，HK格特姆森，
申请(专利权)人：布里格海姆妇女医院公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]