一株平沙绿僵菌及其在防治茶丽纹象甲中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株平沙绿僵菌及其在防治茶丽纹象甲中的应用

【技术实现步骤摘要】
一株平沙绿僵菌及其在防治茶丽纹象甲中的应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株平沙绿僵菌及其在防治茶丽纹象甲中的应用
。

技术介绍

[0002]茶丽纹象甲
(Myllocerinus aurolineatus Voss)
属鞘翅目
(Coleoptera)
象甲科
(Curculionidae)
，主要寄生于茶树，对我国乌龙茶区的春茶和绿茶区的夏茶危害严重
。
[0003]当前茶丽纹象甲的田间防治以化学农药防治为主，主要针对成虫期进行防治
。
但化学防治方式易引发农药残留等问题，不利于茶产业的健康可持续发展
。
此外，采用化学防治方式还存在非靶标生物安全隐患和影响生态环境的风险
。
[0004]茶丽纹象甲主要以成虫嚼食叶片危害茶树，幼虫和蛹生活在土壤中，化蛹及羽化前，幼虫需迁移到表层土壤
。
当土壤表层温度达到
20℃
左右时，幼虫集中化蛹羽化
。
若能利用其这一特性，将茶丽纹象甲在幼虫或蛹期防治住，不仅可以从源头减轻茶丽纹象甲成虫的危害，还可以避免化学农药防治的诸多弊端
。
生防真菌具有致病周期短
、
专一性强
、
环境友好等优点，开发有效防控茶丽纹象甲的生防真菌将具有重要的应用价值
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一株平沙绿僵菌及其在防治茶丽纹象甲中的应用
。
[0006]本专利技术从浙江省绍兴市柯桥区平水镇平阳村有机茶园采集获得自然罹病的茶丽纹象甲幼虫僵虫，通过从僵虫虫体分离并在马铃薯葡萄糖
PDA
培养基上培养，将菌丝转接到新的培养基上进行纯化，获得本专利技术的平沙绿僵菌
(Metarhizium pingshaense)Ma0628。
[0007]平沙绿僵菌
Ma0628
的形态学鉴定：
[0008]在
PDA
培养基上，菌株菌落初期为乳白色，中心为白色，气生菌丝纤细
、
毛绒状，由中心向四周扩散
。
随着培养时间的延长，菌落中心开始出现浅绿色孢子，菌落逐渐由乳白色变为浅灰色，菌丝逐渐由光滑的毛绒状转为颗粒感明显的毛絮状
。
菌落背面呈浅灰色，中心淡黄色
。
菌丝无色细长，具分枝，有隔，表面光滑，粗约为
1.6
‑
2.8
μ
m
；分生孢子梗短直，着生于营养菌丝上，多单生，其上端长有单个或多个紧密排列的产孢小梗；分生孢子着生在产孢小梗顶端，无色，两端钝圆，呈短棒形，单生，大小为
(2.39
‑
3.66)
×
(5.73
‑
7.67)
μ
m
，孢子以粘液粘连在一起，呈长链状
。
[0009]平沙绿僵菌
Ma0628
的分子生物学鉴定：
[0010]PCR
扩增菌株平沙绿僵菌
Ma0628
的
EF
‑1α
的5’
和3’
端以及
β
‑
tubulin
序列并测序，结果显示，其片段大小分别为
1228bp、1154bp
和
1316bp。EF
‑1α
序列经序列拼接后所得序列片段大小为
1734bp。
平沙绿僵菌
Ma0628
的
EF
‑1α
序列在
NCBI
的核酸数据库中的比对结果表明，菌株
Ma0628
与模式平沙绿僵菌菌株
CBS257.90
和
ARSEF7929
的
EF
‑1α
序列相似度最高，均为
99.94
％，其次，该菌株与其他
11
个平沙绿僵菌菌株的
EF
‑1α
序列相似度也在
99.85
％以上
。
类似地，菌株
Ma0628
的
β
‑
tubulin
序列在
NCBI
的核酸数据库中的比对结果表明，菌株
Ma0628
与模式平沙绿僵菌菌株
ARSEF 7929
和
ARSEF 3210
的
β
‑
tubulin
序列相似度均为
100
％
。
系统进化树分析显示，菌株
Ma0628
的
EF
‑1α
和
β
‑
tubulin
序列分别以
99
％和
98
％的置信度与已知的平沙绿僵菌菌株聚为一支
。
[0011]因此，本专利技术的第一个目的是提供一株平沙绿僵菌
(Metarhizium pingshaense)Ma0628
，其保藏编号为
GDMCC No.63616。
[0012]本专利技术还提供所述的平沙绿僵菌
Ma0628
在防治茶丽纹象甲中的应用
。
[0013]优选，所述的茶丽纹象甲为茶丽纹象甲幼虫
、
蛹和成虫
。
[0014]优选，所述的应用，包括将所述的平沙绿僵菌
Ma0628
的活菌体或含有所述的平沙绿僵菌
Ma0628
活菌体的培养物接触茶丽纹象甲虫体的施用步骤
。
[0015]优选，所述的含有平沙绿僵菌
Ma0628
活菌体的培养物为平沙绿僵菌
Ma0628
的孢子悬浮液
。
如
1.0
×
105个孢子
/mL、1.0
×
106个孢子
/mL、1.0
×
107个孢子
/mL、1.0
×
108个孢子
/mL
浓度的孢子悬浮液对茶丽纹象甲均能起到较好的防治效果
。
[0016]优选，所述的平沙绿僵菌
Ma0628
的孢子悬浮液的浓度为
1.0
×
107个孢子
/mL
及以上
。
[0017]优选，所述的施用的方式为拌土法
、
浸渍法或喷雾法等
。
[0018]本专利技术还提供一种防治茶丽纹象甲的生物防治制剂，其含有所述的平沙绿僵菌
Ma0628
的活菌体和
/
或含有所述的平沙绿僵菌
Ma0628...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一株平沙绿僵菌
(Metarhizium pingshaense)Ma0628
，其特征在于，保藏编号为
GDMCC No.63616。2.
权利要求1所述的平沙绿僵菌
Ma0628
在防治茶丽纹象甲中的应用
。3.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的茶丽纹象甲为茶丽纹象甲幼虫
、
蛹和成虫
。4.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括将所述的平沙绿僵菌
Ma0628
的活菌体或含有所述的平沙绿僵菌
Ma0628
活菌体的培养物接触茶丽纹象甲虫体的施用步骤
。5.
根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的含有平沙绿僵菌
Ma0628
活菌体的培养物为平沙绿僵菌
Ma0628
的孢子悬浮液
。6.

【专利技术属性】
技术研发人员：付楠霞，蔡晓明，罗宗秀，李兆群，边磊，修春丽，陈宗懋，周利，
申请(专利权)人：中国农业科学院茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：