猪曼那角病毒制造技术

本发明专利技术公开了一种猪曼那角病毒

【技术实现步骤摘要】
猪曼那角病毒TaqMan荧光定量RT
‑
PCR检测方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物分子学
，具体为一种猪曼那角病毒
TaqMan
荧光定量
RT
‑
PCR
检测方法与应用
。

技术介绍

[0002]PCR
技术，又称为体外基因扩增技术，
PCR
产物的生成量以指数方式增加，能将皮克（
pg=10
‑
12
）量级的起始待测模板扩增到微克（
μ
g=10
‑6）水平
。PCR
技术具有高度的特异性和敏感性，能从
100
万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，
PCR
的灵敏度可达3个
PFU
（空斑形成单位）
。PCR
技术主要用于检测传染病病原体的核酸
。
每类病原体都具有特有的核酸序列，检测出特异性核酸就能确定病原体，进而确诊属于哪一种传染病
。<br/>[0003]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种猪曼那角病毒
TaqMan
荧光定量
RT
‑
PCR
检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：
S1
：引物和探针的设计与合成，在
NCBI
上检索猪曼那角病毒的基因序列，将不同毒株的序列在
DNAMAN
软件上进行序列比对，选择同源性高，且是基因组保守区域的
V
‑
P
段作为目标基因片段；
S2
：病毒阳性质粒标准品合成；
S3
：
RT
‑
qPCR
反应体系优化；
S4
：
RT
‑
qPCR
标准曲线建立；
S5
：
RT
‑
qPCR
方法评价；
S6
：对临床样品进行检测
。2.
根据权利要求1所述的猪曼那角病毒
TaqMan
荧光定量
RT
‑
PCR
检测方法，其特征在于：所述
S1
进一步的包括：利用
Beacon Designer、Oligo 7、NCBI BLAST
，依据探针设计原则设计探针，并对探针进行验证，筛选最佳探针；确定目的探针序列的位置后，在探针位置前后，利用
Primer Premier 5、Oligo 7、Primer
‑
BLAST
软件，依据引物设计原则设计引物，并对其进行验证，筛选最佳引物对
。3.
根据权利要求1所述的猪曼那角病毒
TaqMan
荧光定量
RT
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘传敏，陈鋆，傅金萍，邴雯佳，赵莎，张晓曦，巢钰阳，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：