【技术实现步骤摘要】
一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法
[0001]本专利技术涉及食用菌
,尤其涉及一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法
。
技术介绍
[0002]以往培育马尾松菌根苗都是用红汁乳菇的子实体组织分离培养发酵物感染培育,如谭著明在红汁乳菇生物学特性与半人工栽培技术研究中即采用此种方法
。
或如赵洪等在红汁乳菇菌丝体液体发酵条件的优化研究中采用将采集的新鲜子实体带回实验室,采用组织分离法获得母种,经转接获得一级种
。
以往组织分离法发酵时间如红汁乳菇菌丝体液体发酵条件的较优组合为碳源为马铃薯粉,浓度为3%;氮源为酵母膏,浓度为
0.3
%;起始
pH
值为
6.0
;发酵时间
5d。
又如张疏雨在红汁乳菇发酵液抑菌活性初步研究中红汁乳菇发酵环境条件优化结果为:发酵
4d。200
株
/
箱3个月的马尾松苗,接种菌剂量超过
1000mL
箱-1,感染菌根
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法,其特征在于,包括有以下步骤:
(1)
取红汁乳菇的孢子;
(2)
将步骤
(1)
中的红汁乳菇的孢子进行纯化;
(3)
将步骤
(2)
中纯化的红汁乳菇孢子进行增菌培养,制成菌种液;
(4)
对马尾松种子进行催芽育苗;
(5)
将步骤
(3)
中制好的菌种液接入步骤
(4)
中已出苗的马尾松,进而培育成菌根苗
。2.
根据权利要求1所述的一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法,其特点在于,所述步骤
(1)
中取红汁乳菇的孢子还包括有以下步骤:首先在红汁乳菇出菇季节,取成熟的,无病虫害的7‑8分熟肥壮红汁乳菇子实体在超净工作台上或接种箱上用经火焰消毒的手术刀或小刀切除菌柄带土基部,再用
75
%的酒精棉球擦拭菌盖表面及切除剩下的菌柄;其次,将菌盖轻放于直径
9cm
一次性培养皿中已消毒的直径为
7cm
的滤纸片上,置
20
‑
23℃
洁净环境下
24h
‑
48h
;最后,收集落有孢子的滤纸片,收集时要去掉与菌盖边缘接触的滤纸部分
。3.
根据权利要求1所述的一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法,其特点在于,所述步骤
(2)
中孢子纯化还包括有以下步骤:在超净工作台上或已消毒接种箱内将粘附孢子的滤纸片剪成
25mm2左右大小接于已倾注消好毒的
15mlPDA
培养基直径
9cm
培养皿中;然后将接种好的培养皿放入
30℃
培养箱中闭光培养
2d
‑
3d
,当滤纸周围呈现乳状菌落再转接一次就可以进行增菌培养
。4.
根据权利要求3所述的一种红汁乳菇孢子培养物接种培育马尾松菌根苗的方法,其特点在于,所述步骤
(3)
中增菌培养还包括有以下步骤:于超净工作台上或已消毒接种箱内用接种环刮取3‑4环红色菌落或者乳白色带绿色荧光菌落并在显微镜下确认有两种菌株即可接种,接入,装有
100mlNB
培养液或
GVC
培养液中,
135rpm30℃
震荡闭光培养
24h
‑
48h
后接入
900mlNB
或
GVC
培养液
135rpm30℃
震荡闭光培养
24h
‑
48h
,制成菌种液
。5.
根据权利要求4所述的一种红汁乳菇孢子培养物接种培...
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