一种体液表面增强拉曼光谱的检测方法技术

技术编号:3971520 阅读:325 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供一种体液表面增强拉曼光谱的检测方法。该方法将体液样品进行膜电泳,电泳结束后,将分离出的蛋白质、DNA或RNA样品连同膜电泳介质一起切下并与冰醋酸接触,孵育,形成透明胶体,加入拉曼光谱增强基质,继续孵育并搅匀,待固相杂质析出后停止孵育并静置分层,取上层混合液进行表面增强光谱检测,建立表面增强拉曼光谱数据库。本发明专利技术通过膜电泳技术消除体液中其他复杂成分对蛋白质、DNA和RNA分子SERS检测的干扰,从而充分发挥了SERS方法的高灵敏度特点,可获得高质量的体液表面增强拉曼光谱,从而易于对获得的表面增强拉曼光谱进行分析处理,获得有价值的信息。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测方法领域,特别涉及一种用于检测体液表面增强拉曼光谱(SERS)的检测方法。
技术介绍
组织细胞所发生的变化必然伴随着细胞内外生物分子组成和结构的变化,拉曼光 谱技术能提供样品成分的分子振动光谱,从而可检测并获得样品在分子水平的组成和结构 信息,然而常规拉曼信号太弱,因此需要采取一定技术手段使常规拉曼信号增强后再进行 检测,表面增强拉曼散射(Surface-enhancedRamanspectroscopy,简称SERS)就是通常采 用的一种增强拉曼信号的手段。SERS是指当一些分子被吸附到某些粗糙的金属(如Au、 AgXu和Pt等)表面上时,它们的拉曼散射强度会增加IO4-IO6倍。这就是SERS效应。理 论上SERS技术可以实现单分子检测,因此SERS技术检测灵敏度极高,另外,SERS效应多采 用近红外激光(785nm)激发,检测功率低于lmW,对生物样品可实现无损检测。膜电泳是一种特别适合于血液等体液样品分离和分析的电泳技术,目前已经广泛 应用于血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇及同工酶等的分离 分析中,和其他电泳技术相比较,如聚丙烯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体液表面增强拉曼光谱的检测方法,包括:  a)处理体液样品为上层水相和下层固相;b)上层水相等分为两份样品,所述两份样品同时进行膜电泳;c)膜电泳结束后,所述两份样品分离出的蛋白质、DNA或RNA样品,取其中一份进行染色,用于对比识别另一未染色样品在膜电泳介质上的所在确定位置;d)未染色样品在所述确定位置连同膜电泳介质一起切下;e)将所述切下的未染色样品在室温下与冰醋酸接触,充分搅拌直至形成透明胶体,此时加入拉曼光谱增强基质,并在25~65℃进行孵育并搅匀,待固相杂质析出后,停止搅拌继续孵育10~40分钟后静置分层,上层为体液样品与拉曼光谱增强基质混合液,取所述混合液进行表面增强拉曼光谱检...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:林居强陈荣冯尚源李永增陈冠楠黄祖芳程敏俞允曾海山
申请(专利权)人:福建师范大学加拿大BC癌研究中心
类型:发明
国别省市:35[中国|福建]

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