一种通过氢解反应生产多肽混合物的方法技术

本发明专利技术涉及一种制备由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的用于治疗多发性硬化症的多肽醋酸盐的混合物的改进方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种生产多肽混合物的方法，具体涉及一种通过氢解反应生产 多肽混合物的方法。
技术介绍
醋酸格拉替雷(Glatirainer acetate, GA)是一种被批准用于治疗多发 性硬化症(multiple sclerosis, MS)的多肽混合物。C0PAX0NE⑧是含有醋酸 格拉替雷为活性成分的药物组合物的商品名，它含有合成多肽的醋酸盐，这些 合成多肽醋酸盐含有4种天然氨基酸:L-谷氨酸、L一丙氨酸、L—酪氨酸和L 一赖氨酸，它们各自的摩尔数为0.141， 0.427， 0. 095和0.338。醋酸格拉替 雷的平均分子量范围是4700-11000道尔顿。化学上，醋酸格拉替雷是含有L 一丙氨酸、L一酪氨酸、L一赖氨酸的L-谷氨酸聚合物醋酸盐，它的结构式如下 (Glu，Ala，Lys, Tyr) x CH3C00H (C5H9N(V C3H7N02' C6H14N202 GHuNCQx'XC2H4O2CAS — 147245-92-9("Copaxone", Physician's Desk Reference, (2000 ) ， Medical Economics Co. ， Inc. ， (Montvale， NJ) ， 3115.)制备包括醋酸格拉替雷在内的这类多肽的方法已在美国专利(No . 3 ， 849 , 550， 1974. 11. 19颁予Teitelbaum等)、美国专利(No. 5， 800， 808， 1998,9.1 颁予Konfino等)和PCT申请(WO 00/05250， 2000.2.3， Aharoni等)中公 开。这些文献以引用的方式并入本申请中。例如，这类多肽酪氨酸、丙氨酸、 谷氨酸Y-苄酯和e-N-三氟乙酰赖氨酸的N-羧酸酐制成。聚合反应在室温、 含二乙胺作为引发剂的无水二氧杂环已垸溶剂中进行。谷氨酸的Y-羧基用溴化氢的冰醋酸溶液脱保护，然后用1M哌啶脱除赖氨酸残基的三氟乙酰基(美国 专利No. 3, 849， 550， 1974. 11. 19颁予Teitelba腿等)。谷氨酸的Y-羧基脱保护需要耗费大量的溴化氢/冰醋酸，从而产生了大量 酸性废物。这些酸性废物的处理困难而且成本高。为了解决酸性废物的问题， 急需开发出生产这些多肽的替代制备方法。
技术实现思路
本专利技术提供了一种制备多肽醋酸盐混合物的方法，、每种多肽均由谷氨酸、 丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成，其中，该混合物具有目的峰分子量，包含下列步骤a) 用0.01重量％—20重量％的引发剂，在合适温度下，使酪氨酸、丙氨酸、谷 氨酸Y-苄酯和三氟乙酰赖氨酸的N-羧酸酐聚合适当的时间，生成受保护的多 肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；b) 通过使受保护的多肽混合物与氢解催化剂、氢气接触，，脱去受保护多肽混 合物上的苄基保护基，生成三氟乙酰保护的多肽混合物，该多肽混合物的无保 护形式具有第一峰分子量；c )通过使三氟乙酰保护的多肽混合物与有机碱溶液反应，脱去三氟乙酰保护 的多肽混合物上的三氟乙酰保护基团，生成多肽混合物，该多肽混合物的无保 护形式具有第一峰分子量；d) 通过超滤作用，除去游离的三氟乙酰基和低分子量杂质，获得多肽混合物， 每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成；e) 将每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽混合物和醋 酸水溶液混合，生成各由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽醋酸盐 的混合物，该混合物具有目的峰分子量。本专利技术还提供了一种制备三氟乙酰基保护的多肽混合物的方法，每种多肽 均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和三氟乙酰赖氨酸组成，其多肽混合物的无保护 形式具有第一峰分子量，包含下列步骤a)用0. 01重量％—20重量％的引发剂， 在合适温度下，使酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸Y-苄酯和三氟乙酰赖氨酸的N-羧 酸酐聚合适当的时间，生成受保护的多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；b)通过使受保护的多肽混合物与氢解催化剂和氢气接触，脱去受保护多肽混合物上的苄基保护基，生成三氟乙酰保护的多肽混合物，该 混合物的每一种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成，该多肽混合 物的无保护形式具有第一峰分子量。具体实施方式本专利技术提供了一种制备多肽醋酸盐混合物的方法，每种多肽均由谷氨酸、 丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成，其中，该混合物具有目的峰分子量，本方法包含下列步骤a)用0.01重量％—20重量％的引发剂，在合适温度下，酪氨酸、 丙氨酸、谷氨酸Y-苄酯和三氟乙酰赖氨酸的N-羧酸酐聚合适当的时间，生成 受保护多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；b)通过 使多肽与氢解催化剂和氢气接触，脱去受保护多肽混合物的苄基保护基，生成 三氟乙酰基保护的多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子 量；c )通过使多肽与有机碱溶液反应，脱去三氟乙酰基保护的多肽混合物的 三氟乙酰保护基，生成多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分 子量；d)通过超滤作用，除去游离的三氟乙酰基和低分子量杂质，获得多肽 的混合物，每一种多肽各由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成；e )将每 种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽的混合物和醋酸水溶 液混合，生成每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽的醋 酸盐的混合物，该混合物具有目的峰分子量。在一个实施例中，第一峰分子量可以是2000道尔顿_ 40000道尔顿，或 2000道尔顿_ 20000道尔顿或4000道尔顿-8600道尔顿或4000道尔 顿-8000道尔顿或6250道尔顿-8400道尔顿或2000道尔顿-13000道 尔顿或4700道尔顿_ 13000道尔顿或10000道尔顿-25000道尔顿或 15000道尔顿_ 25000道尔顿或18000道尔顿-25000道尔顿或20000道 尔顿-25000道尔顿，或4700道尔顿-11000道尔顿或7000道尔顿或13 000道尔顿-18000道尔顿或15000道尔顿或12500道尔顿。在一个实施例中，目的峰分子量可以是2000道尔顿-40000道尔顿或 2000道尔顿_ 20000道尔顿或4000道尔顿-8600道尔顿或4000道尔顿-8000道尔顿或6250道尔顿_ 8400道尔顿或2000道尔顿-13000道 尔顿或4700道尔顿_ 13000道尔顿或10000道尔顿_ 25000道尔顿或 15000道尔顿-25000道尔顿或18000道尔顿-25000道尔顿或20000道 尔顿-25000道尔顿或4700道尔顿-11000道尔顿，或7000道尔顿或 13000道尔顿-18000道尔顿或15000道尔顿或12500道尔顿。在一个实施例中，氢解催化剂选自钯/碳、兰尼镍、铂、铂/碳、氧化铂、 氢氧化铂、铑/炭或RhCl (PPh3) 3。在另一个实施例中，氢解催化剂为钯/碳。在另一个实施例中，受保护的多肽与催化剂钯/碳的重量比为10: 1。 在一个实施例中，多肽和氢解催化剂间反应步骤中所采用的溶剂选自甲 醇、乙醇或异丙醇。在另一个实施例中，上述溶剂为甲醇。在一个实施例中，引发剂选自伯胺、二烷基胺或甲醇钠。 在另一个实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备多肽醋酸盐混合物的方法，每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成，其中，该混合物具有目的峰分子量，包含下列步骤：ａ）用０．０１重量％－２０重量％的引发剂、在合适温度条件下，酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸γ－苄酯和三氟乙酰赖氨酸的Ｎ－羧酸酐聚合适当的时间，生成受保护的多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；ｂ）通过使多肽与氢解催化剂和氢气接触，脱去受保护的多肽混合物的苄基保护基，生成三氟乙酰基保护的多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；ｃ）通过使多肽与有机碱溶液反应，脱去三氟乙酰保护的多肽混合物的的三氟乙酰保护基，生成多肽混合物，该多肽混合物的无保护形式具有第一峰分子量；ｄ）通过超滤作用，除去游离的三氟乙酰基和低分子量杂质，获得每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽的混合物；ｅ）将每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽混合物和醋酸水溶液混合，生成具有目的峰分子量的、每种多肽均由谷氨酸、丙氨酸、酪氨酸和赖氨酸组成的多肽醋酸盐的混合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：本泽恩道里兹凯，
申请(专利权)人：泰华制药工业有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]