一种肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用，该肺炎链球菌工程菌包括肺炎链球菌菌株，该肺炎链球菌菌株的基因组整体缺失或部分缺失

【技术实现步骤摘要】
一种肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]肺炎链球菌
(Streptococcus pneumoniae
，
S.pn)
是寄居在人类鼻咽的粘膜表面的一种条件致病菌，可引起肺炎
、
败血症
、
脑膜炎或中耳炎等疾病
。
肺炎链球菌是导致社区获得性感染的常见病原菌，也是5岁以下儿童感染致死的首要致病菌
。
全球每年因肺炎链球菌感染死亡的总人数高达
300
至
500
万人，特别是儿童和老年人，其中5岁以下儿童每年发病率高达
100
万，死亡率高达
11
％
。
[0003]疫苗是控制细菌感染的重要手段，但目前市场上现有的针对肺炎链球菌的疫苗存在覆盖血清型有限，可能发生荚膜血清型转换等缺陷，难以有效控制其感染
。
而在肺炎链球菌感染的治疗方面，近年来由于抗生素的广泛应用，肺炎链球菌的耐药率呈迅速上升趋势甚至还出现了耐万古霉素的肺炎链球菌，这些都使得
S.pn
引起的疾病在治疗上面临巨大问题
。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用，以有效防治肺炎链球菌感染所致疾病
。
[0005]第一个方面，本专利技术提供以
spd1587
基因
、
其同源基因
、
其等位基因或
spd1587
基因
、
其同源基因
、
其等位基因编码的蛋白质作为靶点在制备用于预防
、
治疗或诊断肺炎链球菌所致疾病的药物或试剂盒中的应用
。
[0006]应理解的是，本申请中，
spd1587
基因的同源基因及等位基因与
spd1587
基因的全长或功能结构域同源性
≥30
％
。
[0007]进一步地，所述药物或试剂盒是降低或检测
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达水平的药物或试剂盒
。
[0008]进一步地，所述以
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因为靶点包括采用基因敲除
、
基因敲减
、
基因替换或药物降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达
。
[0009]第二个方面，本专利技术提供一种检测
spd1587
基因
、spd1587
基因的同源基因或
spd1587
基因的等位基因编码的蛋白质的试剂在制备用于检测肺炎链球菌所致疾病的试剂盒或设备中的应用
。
[0010]第三个方面，本专利技术提供降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达或活性的物质在制备用于预防或治疗肺炎链球菌所致疾病的药物中的应用
。
[0011]第四个方面，本专利技术提供一种肺炎链球菌工程菌，所述肺炎链球菌工程菌包括肺炎链球菌菌株，所述肺炎链球菌菌株的基因组包含有整体缺失或部分缺失的
spd1587
基因
、spd1587
基因的同源基因或
spd1587
基因的等位基因
。
[0012]进一步地，所述肺炎链球菌为肺炎链球菌血清型型菌株
。
[0013]第五个方面，本专利技术提供如上所述肺炎链球菌工程菌的制备方法，所述制备方法包括：
[0014]采用基因敲除
、
基因敲减
、
基因替换或药物降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达
。
[0015]进一步地，采用
Janus cassette
基因序列整体或部分替换
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因，再用无痕缺陷片段替换
Janus cassette
基因序列
。
[0016]第六个方面，本专利技术提供一种肺炎链球菌疫苗，所述肺炎链球菌疫苗包括肺炎链球菌工程菌，所述肺炎链球菌工程菌的基因组整体缺失或部分缺失
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因
。
[0017]第七个方面，本专利技术提供生物模型在筛选药物中的应用，所述生物模型包括：
[0018]采用基因敲除
、
基因敲减
、
基因替换或药物降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达的肺炎链球菌工程菌
。
[0019]第八个方面，本专利技术提供肺炎链球菌工程菌在制备用于预防或治疗肺炎链球菌所致疾病的药物中的应用，所述肺炎链球菌工程菌为采用基因敲除
、
基因敲减
、
基因替换或药物降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达得到的肺炎链球菌菌株
。
[0020]如上所述，本专利技术的肺炎链球菌工程菌及其制备方法与应用，具有以下有益效果：
[0021]本申请通过使肺炎链球菌整体或部分缺失
SPD_1587
基因
、
其同源基因或等位基因整体缺陷，以抑制
SPD_1587
基因及其编码产物的表达量，从而使
SPD_1965
基因的活性增加，使得
PcpA
功能增强，进而增强细菌的黏附能力及定植能力，从而为治疗肺炎链球菌所致疾病提供新的治疗靶点
。
附图说明
[0022]图1为
SPD_1587
基因的
DNA
序列图和
SPD_1965
基因的
DNA
序列图；
[0023]图2为肺炎链球菌
D39
Δ
SPD_1587
缺陷菌及
D39
Δ
SPD_1587
Δ
SPD_1965
缺陷菌的无痕片段连接
PCR(
聚合酶链式反应
)
结果图；
[0024]图3为肺炎链球菌
D39
野生菌
、D39
Δ
SPD_1587
缺陷菌和
D39
Δ
SPD_1587
异位回补菌的血平板生长菌落形态图；
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
以
spd1587
基因
、
其同源基因
、
其等位基因或
spd1587
基因
、
其同源基因
、
其等位基因编码的蛋白质作为靶点在制备用于预防
、
治疗或诊断肺炎链球菌所致疾病的药物或试剂盒中的应用
。2.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物或试剂盒是指抑制或检测
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达水平的药物或试剂盒
。3.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述以
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因为靶点包括采用基因敲除
、
基因敲减
、
基因替换或药物降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达
。4.
降低
spd1587
基因
、
其同源基因或其等位基因的表达或活性的物质在制备用于预防或治疗肺炎链球菌所致疾病的药物中的应用
。5.
一种肺炎链球菌工程菌，其特征在于，所述肺炎链球菌工程菌的基因组整体缺失或部分缺失
spd1587
基因
、
其同源...

【专利技术属性】
技术研发人员：王舒慧，郑玉强，陶野，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：