一种基于目标物与制造技术

一种基于目标物与

【技术实现步骤摘要】
一种基于目标物与DNA染料相互作用调控AuNPs聚集的CH3Hg
+
检测方法


[0001]本专利技术涉及一种基于
CH3Hg
+
与
DNA
染料相互作用调控
AuNPs
聚集的方法，建立了基于
AuNPs
的无标记传感检测平台对
CH3Hg
+
进行实时监测，属于环境分析

。

技术介绍

[0002]CH3Hg
+
是受普遍关注的环境污染物，其对生物体存在肺毒性
、
肾毒性
、
高血压和严重的神经毒性，且水环境中的
Hg
2+
可转化为
CH3Hg
+
，导致其更容易被生物富集，从而产生生物放大效应，严重影响人类健康和生态系统
(Environ.Toxicol.,2019,38:489
‑
502.)。
目前，用于
CH3Hg
+
分析的主要方法是通过分离或选择性萃取的技术
、
原子光谱
、
色谱等与质谱联用
(J.Chromatogr.A,2021,1654:462465.)
，然而，这些方法不利于样品的快速现场即时分析，且使用这些分析方法均需复杂的技术
、
昂贵的仪器
、
冗长的预处理步骤，操作繁琐
、
经济成本高
、
空间效率低
。
[0003]相比于上述分析方法，基于
AuNPs
的传感检测更适用于现场检测，但现有的
AuNPs
传感方法大多需要将可特异性识别
CH3Hg
+
的的物质偶联在金纳米颗粒
AuNPs
上
(ChemistrySelect,2018,3(7):2088
‑
2091.)
，或是将
CH3Hg
+
的适配体与
CH3Hg
+
在较为苛刻的条件
(0℃)
结合，然后通过
NaBH4还原体系中的
AuNPs
，使体系的颜色发生变化
(Anal.Chem,2018,90(8):5489
‑
5495.)
，这些方法存在检测耗费时间较长
、
检出限较高等缺点，不利于低浓度
CH3Hg
+
的检测
。
[0004]基于此，本专利技术采用
DNA
染料与
CH3Hg
+
产生相互作用来调控
AuNPs
聚集，并结合智能手机的数据采集及处理系统，建立了一种灵敏度高
、
选择性好的
CH3Hg
+
无标记传感检测技术，无需复杂的仪器和程序就可对
CH3Hg
+
定量检测，检出限低至
1.67nM。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于利用表面带正电荷的
DNA
染料中和
AuNPs
表面的负电荷，从而快速诱导
AuNPs
聚集
。
由于
CH3Hg
+
会同含
N
的
DNA
染料相互作用中并进一步与
Cl
‑
结合而呈电中性，故可用于
CH3Hg
+
的高灵敏检测
。
本专利技术的技术方案如下：
[0006](1)
在
96
微孔板中加入浓度为
10mM
的
46
μ
L
的
Tris
‑
HCl(pH
＝
7.4)
缓冲溶液中，再加入1μ
L
浓度为
(600/n)
μ
M
的含
N
的
DNA
染料溶液
(n
为染料含
N
原子个数
)
，随即加入3μ
L
待测溶液，所得溶液总体积为
50
μ
L。
[0007](2)
在
96
微孔板中加入
250
μ
L
的
AuNPs
溶液进行显色，
AuNPs
最后的浓度保持为
4nM
，约1分钟后显色完成
。
[0008](3)
通过对比有无目标物存在时
AuNPs
的颜色变化，实现对
CH3Hg
+
的可视化半定量分析；通过智能手机的应用程序对溶液的颜色进行分析，得到红色
(Red)、
绿色
(Green)
和蓝色
(Blue)
的
RGB
值，实现对金属离子的快速
、
准确定量检测
。
[0009]专利技术效果
[0010]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：
[0011](1)
与传统盐诱导的聚集无法用于
CH3Hg
+
的检测
。
[0012](2)
灵敏度高，
CH3Hg
+
检出限可达
1.67nM。
[0013](3)
选择性好
,
对水体中可能存在的
12
种干扰离子的抗干扰能力强
。
[0014](4)
实用性强，无需大型精密仪器，仅需智能手机便能实现样品的实时监测，具有操作简便
、
成本低廉的优点
。
具体实施方式
[0015]实施例1[0016]在
96
微孔板中加入浓度为
10mM
的
46
μ
L
的
Tris
‑
HCl(pH
＝
7.0)
缓冲溶液中，再加入1μ
L
浓度为
300
μ
M
的硫磺素
T(ThT)
溶液，随即加入3μ
L
待测溶液，然后充分搅拌混合均匀，最后加入
250
μ
L
的
AuNPs
溶液进行显色，
AuNPs
最后的浓度保持为
4nM
，静置
1min
后，先用智能手机拍照记录比色结果，再使用“色采”应用程序分析颜色的
RGB
值；在相同条件下，加入3μ
L...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于目标物与
DNA
染料相互作用调控
AuNPs
聚集的
CH3Hg
+
检测方法，其特征在于包括以下几个方面：（1）带正电的含
N
的
DNA
染料在
Tris
缓冲溶液中能够中和金纳米颗粒（
AuNPs
）表面的负电荷，从而引起
AuNPs
的快速聚集，呈现出蓝色；（2）
CH3Hg
+
与含
N
的
DNA
染料会发生相互作用，然后进一步与
Cl
‑
配位，生成不带电的复合物；（3）加入含
N
的
DNA
染料后，若存在
CH3Hg
+
，则
CH3Hg
+
会与含
N
的
DNA
染料及缓冲溶液中的
Cl
‑
形成不带电的复合物，从而使含
N
的
DNA
染料失去中和
AuNPs
表面负电荷的能力，
AuNPs
不发生聚集，溶液呈现原来的橙红色；（4）通过对比...

【专利技术属性】
技术研发人员：张信凤，李晟，杨娇娇，
申请(专利权)人：成都理工大学，
类型：发明
国别省市：