一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法技术

本发明专利技术提供一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法，其采用高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法


[0001]本专利技术涉及功能食品多组分检测
，具体涉及一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法
。

技术介绍

[0002]随着消费者健康意识的不断提升，人们更关注并倾向选择富含功能性成分的食品，功能性食品是食品和药品的桥梁，人们可以通过功能性食品来改善提高健康水平
。
而枳椇子和余甘子作为天然的植物源性食品原料，均为药食同源的中药
。
枳椇子中主要抗氧化成分为黄酮类成分，其中二氢杨梅素成分在药材抗氧化活性方面贡献最大，同时二氢杨梅素可增加酒精代谢并降低酒精介导的脂质失调，从而起到保肝作用，并具有明显的降血糖作用
。
余甘子含有大量的多酚
、
萜类
、
多糖
、
黄酮类等功能活性成分，其中多酚含量占余甘子干粉的百分含量比为
20
％
。
这与余甘子具备抗氧化
、
抗衰老
、
抗肿瘤
、
抑菌防腐
、
降脂减肥和提高免疫力活性等多种保健作用密切相关
。
[0003]以枳椇子和余甘子为原料复配的产品具有解酒保肝，清热生津，抗氧化性，抗糖尿病，抗肿瘤等多种保健功能
。
但枳椇子和余甘子组合提取物中化学成分复杂，包括多酚类和黄酮类物物质，传统的检测技术
HPLC
‑
DAD
由于检测器的局限性，无法同时对枳椇子和余甘子组合提取物中的多种活性成分进行定性定量测定
。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题，在于提供一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法，该分析方法专属性强
、
灵敏且准确可靠，既能通过测定目标化合物的一级
、
二级质谱信息达到成分鉴定的作用，又能对其含量进行准确测定，对枳椇子和余甘子混合物中主要活性成分的测定及产品开发提供技术支持
。
[0005]本专利技术是这样实现的：
[0006]一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法，采用高效液相色谱
、
质谱联用法同时对余甘子枳椇子混合物提取物中多种活性成分进行定性
、
定量测定，步骤如下：
[0007]步骤
1、
余甘子和枳椇子混合提取物制备：
[0008]余甘子
、
枳椇子药材用粉碎机进行粉碎，过
40
目筛网即得余甘子
、
枳椇子粉末；将余甘子粉末和枳椇子粉末按质量比
1:0、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、0:1
进行混合，制得混合提取原料；
[0009]准确称取
10g
混合提取原料，量取
150ml
浓度为
60
％的乙醇溶液于锥形瓶内，充分浸润后，超声提取
1h
，
30℃
恒温振荡过夜；对提取液进行抽滤，使用旋转蒸发仪在
70℃、
转速
120r/min
的条件下旋蒸除去乙醇和水分，得到混合提取浸膏；
[0010]往上述制备的浸膏中加入
20
倍体积的
90
％乙醇，静置醇沉
24h
，以
4000
转
/min
离心
15min
，取上清液抽滤2次得到除去多糖的混合提取液；使用旋转蒸发仪在
50℃、
转速
90r/min
的条件下旋蒸除去乙醇，将获得溶液放于
‑
80℃
冰箱冷冻
16h
，使用冷冻干燥机干燥样品，制得余甘子和枳椇子混合提取物；
[0011]步骤
2、
待测液配置：
[0012]准确称取余甘子枳椇子混合提取物
0.1g
，置于
100ml
容量瓶内；加入适量甲醇使其充分溶解，随后加甲醇至刻度，经
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，即得
1mg/ml
的余甘子枳椇子混合提取物待测液；
[0013]步骤
3、
混合对照品溶液配置：
[0014]分别精密称取没食子酸对照品
250.00mg、
二氢杨梅素
80.00mg、
柯里拉京
4.00mg、
花旗松素
10.0mg、
鞣花酸
36.00mg
分别置于
10ml
容量瓶内，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，为对照品贮备液
。
再精密吸取上诉对照品贮备液用甲醇稀释成每
1ml
含没食子酸
5.00mg、
二氢杨梅素
1.60mg、
柯里拉京
0.08mg、
花旗松素
0.20mg、
鞣花酸
0.72mg
的溶液，经
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，即得混合对照品；
[0015]步骤
4、
测定法：
[0016]采用高效液相色谱
、
质谱联用法同时对余甘子枳椇子混合物提取物待测液中没食子酸
、
二氢杨梅素
、
柯里拉京
、
花旗松素
、
鞣花酸五种活性成分进行定性
、
定量测定，其中，
[0017]色谱条件：
Thermo BDS HYPERSIL C18
色谱柱
(250mm
×
4.6mm
，
5.0
μ
m)
；流动相
A
为甲醇，流动相
B
为
0.2
％磷酸水，梯度洗脱程序：0→
30min
，1％
A
→
10
％
A
；
30
→
40min
，
10
％
A
→
20
％
A
；
40
→
50min
，
20
％
A
→
25
％
A
；
50
→
80min
，
25
％
A
→
30
％
A
；
80
→
90min
，
30
％
A
→
64
％
A<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种同时测定余甘子和枳椇子混合提取物中多种成分含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱
、
质谱联用法同时对余甘子枳椇子混合物提取物中多种活性成分进行定性
、
定量测定，步骤如下：步骤
1、
余甘子和枳椇子混合提取物制备：余甘子
、
枳椇子药材用粉碎机进行粉碎，过
40
目筛网即得余甘子
、
枳椇子粉末；将余甘子粉末和枳椇子粉末按质量比
1:0、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、0:1
进行混合，制得混合提取原料；准确称取
10g
混合提取原料，量取
150ml
浓度为
60
％的乙醇溶液于锥形瓶内，充分浸润后，超声提取
1h
，
30℃
恒温振荡过夜；对提取液进行抽滤，使用旋转蒸发仪在
70℃、
转速
120r/min
的条件下旋蒸除去乙醇和水分，得到混合提取浸膏；往上述制备的浸膏中加入
20
倍体积的
90
％乙醇，静置醇沉
24h
，以
4000
转
/min
离心
15min
，取上清液抽滤2次得到除去多糖的混合提取液；使用旋转蒸发仪在
50℃、
转速
90r/min
的条件下旋蒸除去乙醇，将获得溶液放于
‑
80℃
冰箱冷冻
16h
，使用冷冻干燥机干燥样品，制得余甘子和枳椇子混合提取物；步骤
2、
待测液配置：准确称取余甘子枳椇子混合提取物
0.1g
，置于
100ml
容量瓶内；加入适量甲醇使其充分溶解，随后加甲醇至刻度，经
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，即得
1mg/ml
的余甘子枳椇子混合提取物待测液；步骤
3、
混合对照品溶液配置：分别精密称取没食子酸对照品
250.00mg、
二氢杨梅素
80.00mg、
柯里拉京
4.00mg、
花旗松素
10.0mg、
鞣花酸
36.00mg
分别置于
10ml
容量瓶内，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，为对照品贮备液
。
再精密吸取上诉对照品贮备液用甲醇稀释成每
1ml
含没食子酸
5.00mg、
二氢杨梅素
1.60mg、
柯里拉京
0.08mg、
花旗松素
0.20mg、
鞣花酸
0.72mg
的溶液，经
0.45
μ
m
微孔滤膜滤过，即得混合对照品溶液；步骤
4、
测定法：采用高效液相色谱
、
质谱联用法同时对余甘子枳椇子混合物提取物待测液中没食子酸
、
二氢杨梅素
、
柯里拉京
、
花旗松素
、
鞣花酸五种活性成分进行定性
、
定量测定，其中，色谱条件：
ThermoBDSHYPERSILC18
色谱柱
(250mm
×
4.6mm
，
5.0
μ
m)
；流动相
A
为甲醇，流动相
B
为
0.2
％磷酸水，梯度洗脱程序：0→
30min
，1％
A
→
10
％
A
；
30
→
40min
，
10
％
A...

【专利技术属性】
技术研发人员：张梅，张宏源，娄本勇，张燕杰，陈为健，
申请(专利权)人：闽江学院，
类型：发明
国别省市：