一种筛选糖尿病视网膜病变的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种筛选糖尿病视网膜病变的试剂盒，试剂盒包括提取血清外泌体的装置和试剂

【技术实现步骤摘要】
一种筛选糖尿病视网膜病变的试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体是一种筛选糖尿病视网膜病变的试剂盒
。

技术介绍

[0002]糖尿病视网膜病变
(DR)
简称
"
糖网
"。
糖尿病会引起视网膜血管失调
。
病症的发生率随着患糖尿病时间增加而提高
。
患有糖尿病十五年以上的病人中大约
60
％的病人眼部血管会受损，进而导致视力不可逆性下降甚至丧失，严重影响糖尿病患者的生活方式，严重威胁了家庭以及社会的健康
。DR
分为非增殖性糖尿病性视网膜病变
(non
‑
proliferative diabetic retinopathy
，
NPDR)
和增殖性糖尿病性视网膜病变
(proliferative diabetic retinopathy
，
PDR)。
前者眼底表现为毛细血管微动脉瘤和视网膜点状出血
、
水肿和视网膜内硬性渗出液
、
棉絮斑
、
静脉扩张和串珠和视网膜内微血管异常等，后者晚期易发生玻璃体腔出血和牵拉性视网膜脱离，以及虹膜前段或者前房角新血管形成导致新生血管性青光眼，从而导致视力不可逆性下降或者丧失
。
糖尿病性黄斑水肿
(diabetic macular edema,DME)
在
DR
中可在任何阶段出现，并且已经超越
PDR
成为2型糖尿病患者视力损害的重大威胁，这意味这
DR
带来的视力损害并不是仅仅单纯地出现在
DR
的终末阶段，任何阶段的
DR
都应该引起重视
。PDR
和
DME
已经成为糖尿病造成视力障碍的两个主要因素，前者以异常的新生血管作为主要标志，后者因血管通透性增高而导致血浆内成分渗漏
。
在发展至
DME
或者
PDR
之前，大部分
DR
患者无明显的视力障碍，因此
DR
的早期筛查对这种可预防的失明意义重大
。
目前，寻找糖尿病视网膜病变
(DR)
生物标志物的样本主要来自于眼部局部如视网膜
、
玻璃体
、
房水
、
泪液和循环的细胞因子或者炎性因子水平
。
局部生物标志物虽然能准确地体现视网膜的病理状态，但其获取途径大多是侵入性的，样本量少且获得样本同时可能伴随并发症发生；循环生物标志物可获得较大的样本量且损害性较小，但是精确度不及眼部局部生物标志物，且血液成分复杂，容易掩盖疾病相关因子
。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供一种准确性高
、
创伤性小的，以血清外泌体中的蛋白质作为糖尿病视网膜病变的生物标志物的新方法及应用
。
[0004]为达此目的，本专利技术提供如下的技术方案：
[0005]本专利技术的第一个方面，提供了一种用于糖尿病视网膜病变的对象的致死或疾病后果进行诊断
、
预测或风险分级的标志物，其特征在于，所述标志物为血清外泌体蛋白
。
[0006]优选的，所述血清外泌体蛋白包括
ANG、PPIA
和
APOE。
[0007]本专利技术的第二个方面，提供了一种采用本专利技术所述的标志物制备的用于糖尿病视网膜病变的对象的致死或疾病后果进行诊断
、
预测或风险分级的试剂盒，所述试剂盒包括提取血清外泌体的装置和试剂
、
血清外泌体蛋白标志物的提取和
/
或检测试剂
。
[0008]优选的，所述样品为血液样品
。
[0009]优选的，所述蛋白标志物包括
ANG、PPIA
和
APOE。
[0010]优选的，所述试剂盒的诊断
、
预测或风险分级的依据为：蛋白标志物的含量
。
[0011]本专利技术的第三个方面，提取血清外泌体的试剂和血清外泌体蛋白标志物的检测试剂在制备用于检测糖尿病视网膜病变的试剂盒中的应用，其中所述蛋白标志物包括
ANG、PPIA
和
APOE
，所述试剂盒检测的是受试者血清外泌体中所述蛋白标志物的浓度，其中与正常对照相比，所述受试者血清外泌体中
ANG、PPIA
和
APOE
上升指示糖尿病视网膜病变的概率上升，其中所述检测试剂包括所述蛋白标志物的特异性抗体
。
[0012]与现有技术相比，本专利技术有益效果及显著进步在于：
[0013]1.
本专利技术证明了血清外泌体较血清更具备丰富的差异蛋白信息，且与玻璃体的差异蛋白具有更高的重复性；
[0014]2.
本专利技术证明了
DR
患者的血清外泌体，当去除血清中与疾病无关信息后可较准确反应
DR
的疾病状态；
[0015]3.
血清外泌体差异蛋白
ANG
和
PPIA
在
M
ü
ller
细胞间通讯作用
(
通讯因子
)
及其在
DR
发生发展过程中具有潜在作用
。
附图说明
[0016]为更清楚地说明本专利技术的技术方案，下面将对本专利技术的实施例所需使用的附图作一简单介绍
。
[0017]显而易见地，下面描述中的附图仅是本专利技术中的部分实施例的附图，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，但这些其他的附图同样属于本专利技术实施例所需使用的附图之内
。
[0018]图1为本专利技术实施例1中血清外泌体和血清中的蛋白数量；
[0019]图2为本专利技术实施例1中血清外泌体
、
玻璃体和血清中差异蛋白的重叠情况；
[0020]图3为本专利技术实施例2中：
ANG、PPIA
和
APOE
三种蛋白在外泌体
、
玻璃体和血清三种样本中的含量；
[0021]图4为本专利技术实施例3中细胞及数值曲线；
[0022]图5为本专利技术实施例3中细胞与第一天相比增殖倍数；
[0023]图6为本专利技术实施例3中
shCtrl、shPC、shANG、shPPIA、shAPOE
组第1～5天细胞扫描图像
。
具体实施方式
[0024]为使本专利技术实施例的目的
、
技术方案
、
有益效果及显著进步更加清楚，下面，将结合本专利技术实施例，对本专利技术实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于糖尿病视网膜病变的对象的致死或疾病后果进行诊断
、
预测或风险分级的标志物，其特征在于，所述标志物为血清外泌体蛋白
。2.
如权利要求1所述的用于糖尿病视网膜病变的对象的致死或疾病后果进行诊断
、
预测或风险分级的标志物，其特征在于，所述血清外泌体蛋白包括
ANG、PPIA
和
APOE。3.
一种采用权利要求1‑2任意一项所述的标志物制备的用于糖尿病视网膜病变的对象的致死或疾病后果进行诊断
、
预测或风险分级的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括提取血清外泌体的装置和试剂
、
血清外泌体蛋白标志物的提取和
/
或检测试剂
。4.
如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述样品为血液样品

【专利技术属性】
技术研发人员：冯乐，陈婷婷，任君红，刘国栋，王方，
申请(专利权)人：上海市第十人民医院，
类型：发明
国别省市：