一种识别信阳制造技术

本发明专利技术提供了一种识别信阳

【技术实现步骤摘要】
一种识别信阳10号茶树良种的分子标记、引物及其应用


[0001]本专利技术涉及分子标记
，尤其涉及一种识别信阳
10
号茶树良种的分子标记
、
引物及其应用
。

技术介绍

[0002]茶树表型和理化性状多为数量性状，易受环境影响，基于茶树表型和理化性状难于识别茶树种质
。DNA
分子标记以
DNA
序列变异为基础，具有标记多
、
不受发育影响
、
检测手段简单和迅速等优点，可克服依据表型和理化成分鉴定误差大
、
茶树表型性状差异小和依据表型鉴定周期长的缺点
。
简单序列重复
(Simple sequence repeat
，
SSR)
分子标记技术已广泛应用于茶树种质资源鉴定
、
遗传多样性分析
、
遗传图谱构建
、
数量性状基因位点
(QTLs)
定位和
DNA
指纹图谱等方面研究
。
[0003]信阳
10
号
(XY10)
是信阳地区茶叶试验场
1976
年从信阳茶树群体种中通过单株选择系统选育而成的茶树良种
。
该品种属灌木型
、
中叶类
、
中生种
、
树姿半开展，品质好
、
产量高
、
抗性强，适合在河南栽培，是河南茶叶生产和茶树种质遗传改良的核心种质资源
。
对
XY10
良种进行有效识别，有助于茶树种质创新和对“XY10”良种进行有效保护
。
因此，本领域亟需一种可以准确识别信阳
10
号茶树良种的方法
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种可以准确识别信阳
10
号茶树良种的分子标记
、
引物及其应用
。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种识别信阳
10
号茶树良种的分子标记，所述分子标记的位置为舒茶早基因组的
Chr3
：
10960343
‑
10960380
，所述分子标记的序列如
SEQ ID NO.2
所示
。
[0007]本专利技术提供了一种扩增所述分子标记的引物，正向引物序列如
SEQ ID NO.3
所示，反向引物序列如
SEQ ID NO.4
所示
。
[0008]本专利技术提供了一种识别信阳
10
号茶树良种的试剂盒，包含所述的引物
。
[0009]本专利技术提供了一种所述的分子标记或所述的引物或所述的试剂盒在识别信阳
10
号茶树良种中的应用
。
[0010]本专利技术还提供了一种识别信阳
10
号茶树良种的方法，包括如下步骤：
[0011](1)
提取茶树基因组
DNA
，作为模板；
[0012](2)
用所述的引物对所述模板进行
PCR
扩增，得到扩增产物；
[0013](3)
对所述扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，得到电泳条带，若所述电泳条带的带型同信阳
10
号的带型一致，则该种质鉴定为信阳
10
号
。
[0014]优选的，步骤
(1)
所述提取茶树基因组
DNA
的方法为改良
CTAB
法
。
[0015]优选的，所述
PCR
扩增体系为：
ddH2O 4.41
～
5.39
μ
L
，
10
×
Buffer 0.90
～
1.10
μ
L
，
10mM dNTP 0.18
～
0.22
μ
L
，
10
μ
M
正向引物
0.36
～
0.44
μ
L
，
10
μ
M
反向引物
0.36
～
0.44
μ
L
，
30ng/
μ
L
模板
2.70
～
3.30
μ
L
，
5U/
μ
LTaq
酶
0.09
～
0.11
μ
L
，反应总体积为
10
μ
L
；
[0016]所述
PCR
扩增反应程序为：
94℃
预变性
5min
；然后进入循环，每个循环
94℃
变性
30s
，
55
～
65℃
退火
45s
，
72℃
延伸
1min
，共
29
个循环，最后
72℃
延伸
5min。
[0017]优选的，所述聚丙烯酰胺凝胶电泳的电压为
155
～
160V
，时间为
2.5
～
3.5h。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0019]本专利技术使用一个
SSR
分子标记
、
引物对茶树种质
DNA
样品进行检测即可判断该种质是否是信阳
10
号，具有方便
、
快捷和高效的特点
。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图
。
[0021]图1为实施例1中的电泳检测结果；
[0022]图2为实施例1中的电泳检测结果；
[0023]图3为实施例1中的电泳检测结果；
[0024]图4为实施例1中的电泳检测结果，其中，条带
YLC\XMTC\ZYQC\YLTC
为
YLC、XMTC、ZYQC、YLTC
四个茶树种质样品
DNA
混合后
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种识别信阳
10
号茶树良种的分子标记，其特征在于，所述分子标记的位置为舒茶早基因组的
Chr3
：
10960343
‑
10960380
，所述分子标记的序列如
SEQ ID NO.2
所示
。2.
一种扩增权利要求1所述分子标记的引物，其特征在于，正向引物序列如
SEQ ID NO.3
所示，反向引物序列如
SEQ ID NO.4
所示
。3.
一种识别信阳
10
号茶树良种的试剂盒，其特征在于，包含权利要求2所述的引物
。4.
一种权利要求1所述的分子标记或权利要求2所述的引物或权利要求3所述的试剂盒在识别信阳
10
号茶树良种中的应用
。5.
一种识别信阳
10
号茶树良种的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)
提取茶树基因组
DNA
，作为模板；
(2)
用权利要求2所述的引物对所述模板进行
PCR
扩增，得到扩增产物；
(3)
对所述扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，得到电泳条带，若所述电泳条带的带型同信阳
10
号的带型一致，则该种质鉴定为信阳
10
号
。6.
如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤
(1)
所述提取茶树基因组
DNA
的方法为改良
CTAB
法
。7.
如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述
PCR
扩增体系为：
ddH2O4.41
～
5.39
μ
L

【专利技术属性】
技术研发人员：毛光志，邢锋，陈震，李梦笛，朱国金，周棋赢，张伟，袁红雨，江昌俊，高厚阳，
申请(专利权)人：信阳师范学院，
类型：发明
国别省市：