本发明专利技术提供了一种用于糖尿病肾病早期诊断的尿液组合标志物,所示标志物组合物包括补体因子
【技术实现步骤摘要】
一种诊断糖尿病肾病早期的尿液组合标志物及应用
[0001]本专利技术属于生物医学检测
,具体涉及种诊断糖尿病肾病早期的尿液组合标志物及应用
。
技术介绍
[0002]糖尿病肾病
(DN)
是世界范围内的公共卫生问题,高达
50
%的糖尿病患者发生此病,已成为需要透析或肾移植治疗的终末期肾病的主要病因
。
糖尿病肾病患者的全因死亡率大约是无肾病的糖尿病患者的
30
倍,其高发病率
、
高死亡率带来了巨大的个人和社会经济负担
。
目前临床上糖尿病肾病的诊断标准为尿白蛋白
/
肌酐比值
(UACR)≥30mg/g
和
/
或肾小球滤过率
(eGFR)<60ml/((min
·
1.73m2)
,且持续超过3个月
。
然而由于个体差异性,一些糖尿病患者表现出正常范围的蛋白尿,但表现出肾功能不全,说明微量白蛋白尿对糖尿病肾脏损伤的早期诊断灵敏度低
。
此外,该指标不能早期诊断糖尿病肾病,部分患者诊断为糖尿病肾病时已为中晚期,大大增加了治疗成本和死亡风险
。
因此,寻找一种早期
、
可靠
、
重复性好
、
经济的肾损伤标志物用于糖尿病肾病的早期诊断具有重要意义
。
[0003]近年来,许多血清和蛋白质作为可能的早期糖尿病肾病标志物被广泛研究,但往往敏感性和特异性很差,并不能对糖尿病早期肾损伤进行有效的筛查及诊断
。
随着蛋白质分离技术和质谱的发展,蛋白质组学技术发现新的诊断标志物已成为研究的热点
。
有研究发现
CKD273
分类器与正常白蛋白尿进展为微量白蛋白尿有关,具有早期识别
DN
的潜能
。
然而,
CKD273
分类器可识别的多肽数量多,可操作性较低,经济成本高,在普通人群中的可行性有限,目前还未研究出简便
、
经济成本低
、
诊断价值大的一种或多种标志物组合
。
因此,明确糖尿病肾病患者尿液中主要异常多肽生物标志物用于早期诊断及预警具有巨大潜力
。
技术实现思路
[0004]针对现有技术的缺点,本专利技术的目的在于提供一种用于糖尿病肾病早期诊断的尿液组合标志物能在糖尿病患者肾损伤的早期诊断中具有较高的灵敏度
、
特异度和正确率
。
[0005]为了实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:
[0006]一种用于糖尿病肾病早期诊断的尿液组合标志物,所示标志物组合物包括补体因子
H
和衰变加速因子
。
[0007]优选的,所述尿液组合标志物还包括尿
C3、
尿
C9、
尿
C5
和
CD59。
[0008]本专利技术另外一个目的在于提供一种用于糖尿病肾病早期诊断的诊断产品,所述诊断产品包含上述尿液组合标志物
。
所述诊断产品包括用于糖尿病肾病早期诊断的试剂盒
。
[0009]本专利技术还有一个目的在于提供补体因子
H
和衰变加速因子组合标志物在制备用于糖尿病肾病早期诊断的诊断产品的应用,以及提供补体因子
H、
衰变加速因子尿
C3、
尿
C9、
尿
C5
和
CD59
组合标志物在制备用于糖尿病肾病早期诊断的诊断产品的应用
。
所述诊断产品包括试剂盒
。
[0010]本专利技术的有益效果:
[0011]本专利技术在研究的过程中发现,差异表达的尿蛋白主要与补体和凝血级联有关,尿
C3、C9
和补体因子
H(CFAH)
的丰度与肾小球滤过率
(eGFR)
下降呈负相关,而尿
C5、
衰变加速因子
(DAF)
和
CD59
的丰度与
eGFR
下降呈正相关
。
同时,通过验证发现
CFAH
和
DAF
的尿丰度曲线下面积
(AUC)
大于
eGFR、
尿蛋白或任何病理参数的尿丰度,说明该指标在糖尿病患者肾损伤的早期诊断中具有较高的灵敏度
、
特异度和正确率
。
本专利技术所得尿液组合标志物可用于糖尿病肾脏损伤的早期诊断,该组合标志物的诊断灵敏度和特异度均良好
。
本专利技术的尿液组合标志物,可以用于制备用于糖尿病早期诊断的试剂盒,从而可实现糖尿病肾病的早诊断
、
早治疗,降低糖尿病肾病带来的疾病负担
。
具体实施方式
[0012]下面通过实施例对本专利技术进行具体描述,有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本专利技术进行进一步的说明,不能理解为对本专利技术保护范围的限制,该领域的技术熟练人员根据上述
技术实现思路
所做出的一些非本质的改进和调整,仍属于本专利技术的保护范围
。
[0013]实施例1[0014]步骤一
、
尿液蛋白质提取
[0015]在肾活检时随机收集尿样
。
将尿样以
3500rpm
离心
30
分钟以去除碎片
。
将上清液收集在
5mL
管中,然后储存在
‑
80℃。
在蛋白质组学分析之前,将每个尿样的
300
μ
L
上清液解冻
。
以
13,000rpm
离心
10
分钟后,使用带冷阱的高速真空干燥器
(CentriVap Cold Traps
,
Labconco
,堪萨斯城,密苏里州,美国
)
干燥上清液
。
使用
Bradford
蛋白质测定法
(
目录号
500
‑
0006
,
Bio
‑
Rad
,美国
)
测量每种尿液的蛋白质浓度
。
将含有
50
μ
g
蛋白质的尿液置于
10kDa
含
8M
尿素
(Sigma
‑
Aldrich Corp.,St.Louis,MO,USA)
的聚醚砜过滤器
(PALL Life Science,USA)。
蛋白质用
20mM
二硫苏糖醇
(Sigma...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种用于糖尿病肾病早期诊断的尿液组合标志物,其特征在于,所示标志物组合物包括补体因子
H
和衰变加速因子
。2.
根据权利要求1所述的尿液组合标志物,其特征在于,所述尿液组合标志物还包括尿
C3、
尿
C9、
尿
C5
和
CD59。3.
一种用于糖尿病肾病早期诊断的诊断产品,其特征在于,所述诊断产品包含权利要求1或2所述的尿液组合标志物
。4.
根据权利要求3所述的诊断产品,其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员:马玉芳,赵黎君,刘芳,张勇,
申请(专利权)人:四川大学华西医院,
类型:发明
国别省市:
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