副干酪乳杆菌制造技术

本发明专利技术提供副干酪乳杆菌

【技术实现步骤摘要】
副干酪乳杆菌ET
‑
22源肽聚糖在口气清新方面的应用和组合物


[0001]本专利技术涉及副干酪乳杆菌
ET
‑
22
源肽聚糖在口气清新方面的应用和包括该肽聚糖的组合物，涉及口腔健康

。

技术介绍

[0002]口臭是一个普遍关注的口腔健康问题，不仅影响个人的健康水平，也影响着人的心理和社会生活
。
经研究表明，部分益生菌及其后生元具备抑制口腔致病菌生长和免疫调节的功能，例如，副干酪乳杆菌
L9
和动物双歧杆菌
A6
可有效缓解牙龈出血
、
牙周炎症浸润和牙槽骨吸收，并降低链球菌
、
梭杆菌
、
韦荣氏菌属等病原菌属的相对比例，从而预防牙周炎；还有研究证明从婴儿肠道中提取出来的副干酪乳杆菌
ET
‑
22
具有抑制变异链球菌生物膜的生长及细菌水溶性多糖和水不溶性多糖的合成的作用，能够有效预防龋齿
。
[0003]副干酪乳杆菌
ET
‑
22
活菌及其后生元能够起到改善口臭的功效也已被证实，活菌能够黏附定植在口腔中并与口臭致病菌竞争黏附位置，从而进一步抑制致病菌的生长，起到改善口臭的作用
。
但是后生元不能黏附定植，其功效成分尚未可知
。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供副干酪乳杆菌
ET
‑
22
源肽聚糖在口气清新方面的应用，其能够显著降低口腔内口气挥发性硫化物
(VSCs)
和唾液挥发性化合物
(VOCs)
的含量，降低特征性风味化合物，例如吲哚
、
丙酸
、
己酸的含量，具有清新口气和
/
或缓解抑制口臭方面的作用
。
[0005]本专利技术还提供一种包括上述肽聚糖的组合物
。
[0006]本专利技术第一方面提供肽聚糖在清新口气和
/
或缓解抑制口臭方面的应用，所述肽聚糖来源于所述副干酪乳杆菌
ET
‑
22
的热灭活菌体
。
[0007]副干酪乳酸杆菌
(Lactobacillus paracasei)ET
‑
22
已保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为
CGMCC No.15077。
[0008]肽聚糖是将副干酪乳酸杆菌
ET
‑
22
的菌体经高温加热灭活后，从热灭活菌体中分离得到的
。
[0009]在一种具体实施方式中，所述肽聚糖的提取方法包括如下步骤：
[0010]步骤
1、
将副干酪乳杆菌
ET
‑
22
进行液体培养，待生长到对数期时，停止发酵并收集菌体；
[0011]步骤
2、
将收集得到的菌体重悬于无菌水中，进行热灭活，收集得到热灭活菌体；
[0012]步骤
3、
将所述热灭活菌体重悬于
PBS
缓冲液中，超声破碎热灭活菌体后离心收集沉淀，并从所述沉淀中提取得到所述肽聚糖
。
[0013]在一种具体实施方式，可首先将副干酪乳杆菌
ET
‑
22
接种于固体培养基中培养复苏，随后将单菌落接种于液体培养基中进行发酵，待菌体生长至对数期后，将发酵液和菌体进行分离，收集固体菌体
。
[0014]随后，将过滤收集到的菌体重悬于无菌水中进行热灭活，热灭活温度在
90
‑
150℃
，灭活5‑
15min
后，取出并冷却至室温，过滤收集热灭活菌体
。
[0015]最后，从热灭活菌体中分离提取得到肽聚糖，将热灭活菌体沉淀重悬于
PBS
缓冲液，超声破碎后，离心取沉淀；将沉淀在4％的
SDS
溶液中煮沸
30
分钟，再加入
10
％
TCA
，去除热灭活菌体中的磷酸壁和蛋白质；再加入包括乙酸钠
、
氯仿和甲醇的混合溶剂进行脱脂；再使用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶液在
37℃
处理
12
小时，再用1％
SDS
溶液煮沸
10
分钟后，清洗
SDS
至痕量；然后进行透析2天，每隔8小时换一次水，收集沉淀并真空冷冻干燥，得到肽聚糖
。
[0016]本专利技术第二方面提供一种用于清新口气和
/
或缓解抑制口臭的组合物，包括肽聚糖，所述肽聚糖来源于所述副干酪乳杆菌
ET
‑
22
的热灭活菌体
。
[0017]在一种具体实施方式中，所述组合物为食品组合物
、
医药组合物
、
口腔清洁组合物中的一种或多种
。
[0018]在一种具体实施方式中，所述食品组合物包含乳制饮品
、
茶
、
咖啡
、
口香糖
、
洁牙糖
、
压片糖果
、
宠物用肉干中的一种或多种
。
[0019]在一种具体实施方式中，所述口腔清洁组合物包括牙膏
、
洁牙粉
、
漱口水
、
口气清新喷雾
、
涂氟剂
、
假牙清洁剂
、
牙刷
、
牙间刷
、
牙线
、
口腔棉棒
、
宠物用洁牙胶
、
宠物用化毛膏
、
宠物用洁牙骨中的一种或多种
。
[0020]在一种具体实施方式中，所述组合物还包括赋形剂
、
稀释剂
、
载体
、
添加剂中的一种或多种
。
[0021]本专利技术提供的副干酪乳杆菌
ET
‑
22
源肽聚糖能够显著降低口腔内口气挥发性硫化物
(VSCs)
和唾液挥发性化合物
(VOCs)
的含量，降低特征性风味化合物，例如吲哚
、
丙酸
、
己酸的含量，具有清新口气和缓解抑制口臭方面的作用
。
附图说明
[0022]图1为
ET
‑
22
热灭活菌体中分离得到的肽聚糖对
VSC
浓度的改善效果；
[0023]图2为肽聚糖干预后挥发性有机化合物的组成；
[0024]图3为肽聚糖干预后挥发性风味活性化合物的组成；
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
肽聚糖在清新口气和
/
或缓解抑制口臭方面的应用，其特征在于，所述肽聚糖来源于副干酪乳杆菌
ET
‑
22
的热灭活菌体
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肽聚糖的提取方法包括如下步骤：步骤
1、
将副干酪乳杆菌
ET
‑
22
进行液体培养，待生长到对数期时，停止发酵并收集菌体；步骤
2、
将收集得到的菌体重悬于无菌水中，进行热灭活，收集得到热灭活菌体；步骤
3、
将所述热灭活菌体重悬于
PBS
缓冲液中，超声破碎热灭活菌体后离心收集沉淀，并从所述沉淀中提取得到所述肽聚糖
。3.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2中，将收集得到的菌体重悬于无菌水中，制备得到活菌浓度为
1.0
×
109CFU/ml
的菌液
。4.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤2中，热灭活的温度为
90
‑
150℃
，时间为5‑
15min。5.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤3中，从所述沉淀中分离得到肽聚糖，具体包括：将热灭活菌体沉淀重悬于
PBS
缓冲液，超声破碎后，离心取沉淀；将沉淀在4％的
SDS
溶液中煮沸
30
分钟，再加入
10
％
TCA
，去除热灭活菌体中的磷酸壁和蛋白质；再加入包括乙酸钠
、
氯仿和甲醇的混合溶剂进行脱脂；再使用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶液在
37℃
处理
12
小时，再用1％
...

【专利技术属性】
技术研发人员：蓝航莲，洪维鍊，张颖，赵雯，曾照中，陈琳，
申请(专利权)人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：