一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑制造技术

本发明专利技术涉及一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑

【技术实现步骤摘要】
一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑DNA试剂盒


[0001]本专利技术涉及一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，属于分子生物学

。

技术介绍

[0002]干血斑中提取基因组核酸是一种极为常见的需求，提取干血斑中淋巴细胞的基因组，通过对于基因组的分析，可应用于临床医学疾病诊断及辅助治疗
。
目前，干血斑基因组
DNA
提取主要有柱膜法和磁珠法两种方法，相较于饱和酚
‑
氯仿法，盐析沉淀法等，磁珠法在提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，保证了操作人员的安全；此外，柱膜法提取不能用于机器，也不适用于自动法高通量操作，而且提取效力一般
。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术提供一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其基于纳米磁珠吸附核酸技术，从干血斑样本中纯化高质量核酸，试剂盒不含酚氯仿等有毒组分，也无需进行耗时的醇类沉淀，整合磁棒法或移液法自动核酸提取仪可进行高通量提取实验，在提高提取效率的同时能保护实验人员的安全，另外，搭配磁力分离架也可进行手工操作，同时兼容自动法和手工法提取
。
[0004]本专利技术提供一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其包括裂解液
AL
，蛋白酶
K
，裂解结合液
BLN
，磁珠
MBVB
，洗涤液
DW1
，洗涤液
DW2
，洗脱液
DE
；
[0005]所述裂解液
AL
包括三羟甲基氨基甲烷，乙二胺四乙酸，氯化钠，十二烷基硫酸钠；
[0006]所述裂解结合液
BLN
包括三羟甲基氨基甲烷，硫氰酸胍，柠檬酸钠，曲拉通
X
‑
100
；
[0007]所述磁珠
MBVB
为聚苯乙烯包被硅羟基磁珠；
[0008]所述洗涤液
DW1
包括硫氰酸胍，乙二胺四乙酸，柠檬酸钠，氯化钠，无水乙醇；
[0009]所述洗涤液
DW2
包括三羟甲基氨基甲烷
、
氯化钠
、
无水乙醇；
[0010]所述洗脱液
DE
包括三羟甲基氨基甲烷，乙二胺四乙酸
。
[0011]优选的，所述裂解液
AL
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，乙二胺四乙酸的浓度为5‑
30mmol/L
，氯化钠的浓度为
50
‑
300mmol/L
，十二烷基硫酸钠的浓度为
0.1
％
‑2％
。
[0012]优选的，所述裂解结合液
BLN
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，硫氰酸胍的浓度为
2.5
‑
5mol/L,
柠檬酸钠的浓度为
0.1
％
‑2％，曲拉通
X
‑
100
的浓度为5％
‑
15
％，使用
HCL,NaOH
调整
PH
为5‑
10。
[0013]优选的，所述洗涤液
DW1
中乙二胺四乙酸的浓度为1‑
10mmol/L
，柠檬酸钠的浓度为
0.1
％
‑2％，氯化钠的浓度为
10
‑
200mmol/L,
无水乙醇
30
％
‑
80
％
。
[0014]优选的，所述洗涤液
DW2
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，氯化钠的浓度为
10
‑
200mmol/L,
无水乙醇
30
％
‑
80
％
。
[0015]优选的，所述洗脱液
DE
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
10
‑
50mmol/L
，乙二胺四乙酸
的浓度为1‑
10mmol/L
，使用
HCL,NaOH
调整
PH
为5‑
10。
[0016]优选的，还包括血片
、
离心管
。
[0017]本专利技术的有益效果：
[0018]本专利技术提供一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其基于纳米磁珠吸附核酸技术，从干血斑样本中纯化高质量核酸，试剂盒不含酚氯仿等有毒组分，也无需进行耗时的醇类沉淀，整合磁棒法或移液法自动核酸提取仪可进行高通量提取实验，能够实现自动化
、
高通量操作，配合
96/192/384
孔的核酸自动提取仪，在以往做一个样品的提取时间内可同时实现对多个个样品的处理，满足了当前生物学高通量操作的要求，在提高提取效率的同时能保护实验人员的安全，另外，搭配磁力分离架也可进行手工操作，同时兼容自动法和手工法提取
。
附图说明
[0019]图1为本专利技术一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒的琼脂糖凝胶图
。
具体实施方式
[0020]下面将对本专利技术的优选实施例进行详细的描述
。
[0021]本专利技术提供一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其包括裂解液
AL
，蛋白酶
K
，裂解结合液
BLN
，磁珠
MBVB
，洗涤液
DW1
，洗涤液
DW2
，洗脱液
DE
；
[0022]裂解液
AL
包括三羟甲基氨基甲烷，乙二胺四乙酸，氯化钠，十二烷基硫酸钠，所述裂解液
AL
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，乙二胺四乙酸的浓度为5‑
30mmol/L
，氯化钠的浓度为
50
‑
300mmol/L
，十二烷基硫酸钠的浓度为
0.1
％
‑2％；
[0023]裂解结合液
BLN
包括三羟甲基氨基甲烷，硫氰酸胍，柠檬酸钠，曲拉通
X
‑
100
，所述裂解结合液
BLN
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其特征在于：包括裂解液
AL
，蛋白酶
K
，裂解结合液
BLN
，磁珠
MBVB
，洗涤液
DW1
，洗涤液
DW2
，洗脱液
DE
；所述裂解液
AL
包括三羟甲基氨基甲烷，乙二胺四乙酸，氯化钠，十二烷基硫酸钠；所述裂解结合液
BLN
包括三羟甲基氨基甲烷，硫氰酸胍，柠檬酸钠，曲拉通
X
‑
100
；所述磁珠
MBVB
为聚苯乙烯包被硅羟基磁珠；所述洗涤液
DW1
包括硫氰酸胍，乙二胺四乙酸，柠檬酸钠，氯化钠，无水乙醇；所述洗涤液
DW2
包括三羟甲基氨基甲烷
、
氯化钠
、
无水乙醇；所述洗脱液
DE
包括三羟甲基氨基甲烷，乙二胺四乙酸
。2.
根据权利要求1所述的一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其特征在于：所述裂解液
AL
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，乙二胺四乙酸的浓度为5‑
30mmol/L
，氯化钠的浓度为
50
‑
300mmol/L
，十二烷基硫酸钠的浓度为
0.1
％
‑2％
。3.
根据权利要求1所述的一种基于纳米磁珠自动化提取干血斑
DNA
试剂盒，其特征在于：所述裂解结合液
BLN
中三羟甲基氨基甲烷的浓度为
20
‑
80mmol/L
，硫氰酸胍的浓度为
2.5
‑
5mol/L,
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈荷萍，蚁珩鑫，李娇，黄嘉琪，林程忠，黄亮，陈凯婷，刘晓倩，
申请(专利权)人：广州湾区生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：