【技术实现步骤摘要】
一种用于抑制根结线虫病的RNAi靶标基因及其应用
[0001]本专利技术属于生物技术及农业应用领域，具体涉及一种用于抑制根结线虫病的
RNAi
靶标基因及其应用
。
技术介绍
[0002]根结线虫
(Meloidogyne spp.)
是世界性分布的植物根系专性内寄生物，是威胁农业生产的主要病原物，也是世界各国的对外检疫对象
。
目前生产上以化学药剂为主防治根结线虫病害，然而化学杀线剂不仅对环境污染严重，对人
、
畜也不安全
。
在溴甲烷
、
涕灭威
、
除线磷等一系列化学杀线剂被禁止使用后，能够有效防治病害且对环境友好的生物防治技术逐渐成为研究热点
。
[0003]南方根结线虫食道腺外泌蛋白
(M.incognita putative esophageal gland cellsecretory protein 30
，
MSP30)
通过调节植物细胞壁与免疫相关基因的转录水平以减弱植物对根结线虫的防御，促进根结线虫的侵染与发育进程，从而正向调控根结线虫的致病水平，是根结线虫致病的关键蛋白之一，其编码基因可作为根结线虫病防治的新靶标
。
[0004]RNA
干扰
(RNA interference
，
RNAi)
是存在于真核生物中的保守性过程，当真核细胞内存在外源或内源的双链
RNA(...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种用于抑制根结线虫病的
dsRNA
，其特征在于，所述
dsRNA
的制备方法包括以下步骤：以
SEQ ID No.3
所示的核苷酸为模板，以
SEQ ID No.4
与
SEQ ID No.5
所示序列
、
或
SEQ ID No.6
与
SEQ ID No.7
所示序列分别作为引物，分别进行
PCR
扩增获得正
、
反向产物；以前述回收得到的
PCR
扩增产物作为模板，转录合成
dsRNA
的正链与反链，而后退火使正
、
反链杂交形成
dsRNA。2.
根据权利要求1所述的一种用于抑制根结线虫病的
dsRNA
，其特征在于，所述
dsRNA
的制备方法包括以下步骤：
(1)
提取南方根结线虫的总
RNA
，通过反转录操作获得
cDNA
；
(2)
以步骤
(1)
中得到的
cDNA
作为模板，以
SEQ ID No.1
与
SEQ ID No.2
所示序列作为引物，通过
PCR
扩增得到
MiMSP30
全长序列；
(3)
以
MiMSP30
的全长序列作为模板，以
SEQ ID No.4
与
SEQ ID No.5
所示序列
、
或
SEQ ID No.6
与
SEQ ID No.7
所示序列分别作为引物，通过
PCR
反应扩增得到可作为
dsRNA
正
、
反链合成模板的
DNA
序列；
(4)
以步骤
(3)
中回收得到的
PCR
扩增产物作为模板，分别转录...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋春号，范志航，许配玲，杨纪潇，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。