使用球形核酸疫苗架构靶向多种制造技术

本公开总体上涉及球形核酸

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用球形核酸疫苗架构靶向多种T细胞类型
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据
35 U.S.C.
§
119(e)
要求于
2021
年3月
30
日提交的美国临时专利申请第
63/167,977
号以及于
2021
年7月
16
日提交的美国临时专利申请第
63/222,869
号的优先权权益，所述美国临时专利申请通过引用以其整体并入本文
。
[0003]政府支持声明
[0004]本专利技术是根据美国国立卫生研究院
(National Institutes of Health)
授予的授权号
CA208783
和
CA199091
‑
03
在政府支持下进行的
。
政府拥有本专利技术中的某些权利
。
[0005]通过引用并入以电子方式提交的材料
[0006]作为本公开的一部分的序列表与说明书作为文本文件同时提交
。
含有序列表的文本文件的名称为“2021
‑
087R_Seqlisting.txt”，所述文件创建于
2022
年3月
30
日，并且大小为
9,503
字节
。
序列表的主题通过引用以其整体并入本文
。


[0007]本公开总体上涉及球形核酸
(SNA)
，即具有被寡核苷酸的径向呈递包围的核的纳米结构，所述球形核酸可以靶向多种类别的免疫细胞
。
本文还提供了制备和使用纳米颗粒的方法
。

技术实现思路

[0008]球形核酸
(SNA)
是针对特定靶标的有效的免疫治疗剂，其能够激活免疫系统
。
包括与纳米颗粒核径向缀合的致密寡核苷酸壳的
SNA
已经证明，疫苗结构直接影响疗法的功能和最终成功
。
这是一个被称为理性疫苗学的强大概念，并且允许利用相同的临床上使用的靶标来提高免疫应答，但其架构影响效力
。
免疫系统是复杂的，并且因此疫苗需要激活多种不同类型的细胞，以实现强有力的应答和最终的肿瘤排斥
。
本公开描述了通过限定激活多种不同免疫细胞类型的多个不同靶标的放置进行的
SNA
的合成，并且显示出应答可以被增强，并且
SNA
内的靶标的结构和放置很大程度上决定疫苗功效
。
[0009]本文所述的技术的应用包含但不限于：
[0010]●
疫苗设计
[0011]●
癌症免疫疗法
[0012]●
纳米医学
[0013]●
免疫相关病症
(
例如，自身免疫性病症
)
的治疗
。
[0014]本文所述的技术的优势包含但不限于：
[0015]●
对疫苗进行结构控制，从而使组分向细胞的呈递受到控制；
[0016]●
将免疫靶标的放置限定在纳米颗粒内并且对免疫细胞摄取后的胞内运输和释放动力学进行控制；
[0017]●
呈递会增强血清稳定性
、
细胞摄取以及免疫激活组分和靶向性组分的共递送；
[0018]●
平台技术使用模块化以改变靶标
(
例如，癌症靶标
)
；
[0019]●
增强免疫应答
[0020]因此，在一些方面，本公开提供了一种球形核酸
(SNA)
，其包括：
(a)
纳米颗粒核；
(b)
与所述纳米颗粒核的外表面连接的寡核苷酸壳，所述寡核苷酸壳包括一种或多种免疫刺激性寡核苷酸；以及
(c)
第一抗原和第二抗原，所述第一抗原为主要组织相容性复合物
I
型
(MHC
‑
I)
抗原，所述第二抗原为主要组织相容性复合物
II
型
(MHC
‑
II)
抗原
。
在一些实施例中，所述第一抗原包封在所述纳米颗粒核中
。
在一些实施例中，所述第二抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。
在另外的实施例中，所述第二抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。
在仍另外的实施例中，所述第二抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。
在一些实施例中，所述第二抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。
在一些实施例中，所述第二抗原包封在所述纳米颗粒核中
。
在另外的实施例中，所述第一抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。
在一些实施例中，所述第一抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。
在另外的实施例中，所述第一抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。
在又另外的实施例中，所述第一抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。
在一些实施例中，本公开的
SNA
包括第三抗原，所述第三抗原为主要组织相容性复合物
I
型
(MHC
‑
I)
抗原
。
在另外的实施例中，本公开的
SNA
包括第四抗原，所述第四抗原为主要组织相容性复合物
II
型
(MHC
‑
II)
抗原
。
在一些实施例中，所述第三抗原包封在所述纳米颗粒核中
。
在另外的实施例中，所述第四抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。
在仍另外的实施例中，所述第四抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。
在又另外的实施例中，所述第四抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。
在一些实施例中，所述第四抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。
在一些实施例中，所述第三抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。
在一些实施例中，所述第三抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。
在另外的实施例中，所述第三抗原通过所述接头与寡核苷酸连本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种球形核酸
(SNA)
，其包括：
(a)
纳米颗粒核；
(b)
与所述纳米颗粒核的外表面连接的寡核苷酸壳，所述寡核苷酸壳包括一种或多种免疫刺激性寡核苷酸；以及
(c)
第一抗原和第二抗原，所述第一抗原为主要组织相容性复合物
I
型
(MHC
‑
I)
抗原，所述第二抗原为主要组织相容性复合物
II
型
(MHC
‑
II)
抗原
。2.
根据权利要求1所述的
SNA
，其中所述第一抗原包封在所述纳米颗粒核中
。3.
根据权利要求1或权利要求2所述的
SNA
，其中所述第二抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。4.
根据权利要求3所述的
SNA
，其中所述第二抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。5.
根据权利要求3所述的
SNA
，其中所述第二抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。6.
根据权利要求1或权利要求2所述的
SNA
，其中所述第二抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。7.
根据权利要求1或权利要求2所述的
SNA
，其中所述第二抗原包封在所述纳米颗粒核中
。8.
根据权利要求1或3至7中任一项所述的
SNA
，其中所述第一抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。9.
根据权利要求8所述的
SNA
，其中所述第一抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。10.
根据权利要求8所述的
SNA
，其中所述第一抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。11.
根据权利要求1或3至7中任一项所述的
SNA
，其中所述第一抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。12.
根据权利要求1至
11
中任一项所述的
SNA
，其包括第三抗原，所述第三抗原为主要组织相容性复合物
I
型
(MHC
‑
I)
抗原
。13.
根据权利要求1至
12
中任一项所述的
SNA
，其包括第四抗原，所述第四抗原为主要组织相容性复合物
II
型
(MHC
‑
II)
抗原
。14.
根据权利要求
12
或权利要求
13
所述的
SNA
，其中所述第三抗原包封在所述纳米颗粒核中
。15.
根据权利要求
13
或权利要求
14
所述的
SNA
，其中所述第四抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。16.
根据权利要求
15
所述的
SNA
，其中所述第四抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。17.
根据权利要求
15
所述的
SNA
，其中所述第四抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。18.
根据权利要求
13
或权利要求
14
所述的
SNA
，其中所述第四抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。
19.
根据权利要求
12、13
或
15
至
18
中任一项所述的
SNA
，其中所述第三抗原通过接头与所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸连接
。20.
根据权利要求
19
所述的
SNA
，其中所述第三抗原通过所述接头与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸连接
。21.
根据权利要求
19
所述的
SNA
，其中所述第三抗原通过所述接头与寡核苷酸连接，所述寡核苷酸与所述寡核苷酸壳中的与所述纳米颗粒核连接的寡核苷酸杂交
。22.
根据权利要求
12、13
或
15
至
18
中任一项所述的
SNA
，其中所述第三抗原通过接头与所述纳米颗粒核的外表面连接
。23.
根据权利要求
13、14
或
19
至
22
中任一项所述的
SNA
，其中所述第四抗原包封在所述纳米颗粒核中
。24.
根据权利要求
12
至
23
中任一项所述的
SNA
，其中所述第一抗原和所述第三抗原是相同的
。25.
根据权利要求
12
至
23
中任一项所述的
SNA
，其中所述第一抗原和所述第三抗原是不同的
。26.
根据权利要求
13
至
25
中任一项所述的
SNA
，其中所述第二抗原和所述第四抗原是相同的
。27.
根据权利要求
13
至
25
中任一项所述的
SNA
，其中所述第二抗原和所述第四抗原是不同的
。28.
根据权利要求1至
27
中任一项所述的
SNA
，其中所述
MHC
‑
I
抗原为
OVA
257
‑
264
(OVA1)(SEQ ID NO:7)、GP100(25
‑
33)(SEQ ID NO:11)、TC
‑
1E6(49
‑
58)(SEQ ID NO:12)、TC
‑
1E7(49
‑
57)(SEQ ID NO:13)、PSMA(634
‑
642)(SEQ ID NO:14)、SPAS
‑
1(SNC9
‑
H8)(SEQ ID NO:15)、SIMS2(237
‑
245)(SEQ ID NO:16)、PAP(115
‑
123)(SEQ ID NO:17)、B16 MART
‑
1(M27)(SEQ ID NO:9)、TRP
‑
1(252
‑
260)(SEQ ID NO:18)、TRP
‑
1(252V260M)(SEQ ID NO:19)、TRP
‑
1(455
‑
463)(SEQ ID NO:20)、TRP
‑
1(455A463M)(SEQ ID NO:21)、TRP
‑
2(180
‑
188)(SEQ ID NO:22)、Melan
‑
A/MART
‑
(127
‑
135)、
酪氨酸激酶
(1
‑
9)、
酪氨酸激酶
(369
‑
377D)、MC38 Adpgk(SEQ ID NO:23)、Irgq
‑
最小
(SEQ ID NO:24)、Irgq
‑
长肽
(SEQ ID NO:25)
或其组合
。29.
根据权利要求1至
28
中任一项所述的
SNA
，其中所述
MHC
‑
II
抗原为
OVA
323
‑
339
(OVA2)(SEQ ID NO:8)、GP100
：
(46
‑
58)(SEQ ID NO:26)、TC
‑
1E6(43
‑
57)(SEQ ID NO:27)、SIMS2(240
‑
254)(SEQ ID NO:28)、PAP(114
‑
128)(SEQ ID NO:29)、B16 MART
‑
1(M30)(SEQ ID NO:30)、TRP
‑
1(113
‑
127)(SEQ ID NO:31)、TRP
‑
1(106
‑
130)(SEQ ID NO:32)、Li
‑
Key(77
‑
92)(SEQ ID NO:33)、
酪氨酸激酶
(56
–
70)、GP100(44
–
59)、GP100(167
–
189)、Melan
‑
A/MART
‑
1(102
–
111)(SEQ ID NO:34)、Melan
‑
A/MART
‑
1(27
‑
40)(SEQ ID NO:35)、Melan
‑
A/MART
‑
1(51
‑
70)(SEQ ID NO:36)、Melan
‑
A/MART
‑
1(51
‑
73)(SEQ ID NO:37)、Melan
‑
A/MART
‑
1(43
‑
57)(SEQ ID NO:38)
或其组合
。30.
根据权利要求1至
29
中任一项所述的
SNA
，其中所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸中的至少一种免疫刺激性寡核苷酸为
toll
样受体
(TLR)
激动剂
。31.
根据权利要求1至
30
中任一项所述的
SNA
，其中所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸中的每一种免疫刺激性寡核苷酸为
toll
样受体
(TLR)
激动剂
。32.
根据权利要求
30
或权利要求
31
所述的
SNA
，其中
TLR
选自由以下组成的组：
toll
样受
体
1(TLR1)、toll
样受体
2(TLR2)、toll
样受体
3(TLR3)、toll
样受体
4(TLR4)、toll
样受体
5(TLR5)、toll
样受体
6(TLR6)、toll
样受体
7(TLR7)、toll
样受体
8(TLR8)、toll
样受体
9(TLR9)、toll
样受体
10(TLR10)、toll
样受体
11(TLR11)、toll
样受体
12(TLR12)
和
toll
样受体
13(TLR13)。33.
根据权利要求
30
至
32
中任一项所述的
SNA
，其中所述
TLR
为
TLR9。34.
根据权利要求1至
33
中任一项所述的
SNA
，其中所述免疫刺激性寡核苷酸包括
CpG
核苷酸序列
。35.
根据权利要求1至
34
中任一项所述的
SNA
，其中所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸包括
5'
‑
TCCATGACGTTCCTGACGTT
‑
3'
的序列
(SEQ ID NO:39)
或由其组成
。36.
根据权利要求1至
35
中任一项所述的
SNA
，其中所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸包括
5'
‑
TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT
‑
3'
的序列
(SEQ ID NO:40)
或由其组成
。37.
根据权利要求1至
36
中任一项所述的
SNA
，其中所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸包括
5'
‑
TCCATGACGTTCCTGACGTT(
间隔子
‑
18(
六乙二醇
))2胆固醇
‑
3'
的序列
(SEQ ID NO:41)
或由其组成
。38.
根据权利要求1至
37
中任一项所述的
SNA
，其中所述寡核苷酸壳中的一种或多种寡核苷酸包括
5'
‑
TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT(
间隔子
‑
18(
六乙二醇
))2胆固醇
‑
3'
的序列
(SEQ ID NO:6)
或由其组成
。39.
根据权利要求1至
38
中任一项所述的
SNA
，其中所述寡核苷酸壳中至少约
10
％
、20
％
、30
％
、40
％
、50
％
、60
％
、70
％
、80
％
、90
％
、95
％或
100
％的寡核苷酸为免疫刺激性寡核苷酸
。40.
根据权利要求1至
39
中任一项所述的
SNA
，其中所述接头为氨基甲酸亚烷基二硫化物接头
、
硫醇接头
、
二硫化物接头
、
酰胺亚烷基二硫化物接头
、
酰胺亚烷基硫代琥珀酰亚胺基接头或其组合
。41.
根据权利要求1至
40
中任一项所述的
SNA
，其中所述纳米颗粒核为胶束
、
脂质体
、
聚合物
、
脂质纳米颗粒
(LNP)
或其组合
。42.
根据权利要求
41
所述的
SNA
，其中所述聚合物为聚丙交酯
、
聚丙交酯
‑
聚乙交酯共聚物
、
聚己内酯
、
聚丙烯酸酯
、
海藻酸盐
、
白蛋白
、
二氧化硅
、
聚吡咯
、
聚噻吩
、
聚苯胺

【专利技术属性】
技术研发人员：查德，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：