【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】ATP合酶抑制剂
‑
化妆品和治疗用途
[0001]相关申请
[0002]PCT/EP2018/051127(
公布为
WO2018/134265A1)
，
PCT/EP2018/069175(
公布为
WO2019/012149A1)
，以及它们对应的
371
个进入美国的国家申请
(
美国申请号
16/478,497[
公布为
US2020/0247758A1]和美国申请号
16/629,390[
分别公布为
US2020/0306253A1])
，加拿大申请号
3,050,553
和澳大利亚申请号
AU2019208238
均由与本申请相同的专利技术人提出，并且全部通过引用并入本文
(
以及整个其中的参考文献
[
引用的论文
、
专利及其申请
]的内容
)。
申请人对
PCT/EP2018/069175
的“国际检索单位的书面意见”的答复也通过引用整体并入，
[
作为
EP3652156
出版
]。
[0003]本披露的领域
[0004]本申请公开了优先减缓
ATP
合酶的
ATP
水解模式的化合物
、
这些化合物的药物组合物以及用于减缓
/
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
包含
(
或由其组成
)
至少一种
[
任何
]IF1
蛋白
/
片段的化妆品组合物
(
或其序列变体，包括其部分
/
完全逆向序列
)
，和
/
或其融合蛋白
(
任选地包含至少一个细胞穿透肽
[CPP]
序列，任选地
Tat
和
/
或聚精氨酸序列，任选地其部分
/
完全逆向序列
)
，可选地脂质化
(
即具有至少一个共价结合的脂质
/
脂质部分，可选地至少一种脂肪酸
[
可选地酰化至其
N
‑
末端
]
例如
[
非限制性
]a
肉豆蔻酰基
/
棕榈酰基
/
硬脂酰基
)
，任选地在其
N
‑
(
非限制性例如酰化
[
非限制性例如乙酰化
])
和
/
或
C
‑
末端
(
非限制性例如酰胺化
)
末端被修饰，任选地其中序列中的一个或多个氨基酸是对应的
D
‑
氨基酸，任选其中其一个或多个羧基被酯化，和
/
或其至少一种化妆品可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其本领域的其他载体；任选地包含
(
或由其组成
)
至少一种肽
/
蛋白质的化妆品组合物
(
任选其一个或多个羧基被酯化
)
包括
(
或由
)
组成
[
优选地，其中下列顺序为
N
‑
至
C
‑
末端
]
至少一个细胞穿透肽序列
(CPP
，例如聚精氨酸
CPP
，任选地具有脂肪酸
[
例如2至
25
个碳
]
酰化至其
N
‑
末端
)
与至少一个线粒体导入序列
(MIS
；赋予线粒体基质定位，任选地
/
优选地，其中
MIS
是被施用的物种用于其天然
IF1
蛋白的
MIS
；例如，人的
MIS
用于其天然
IF1
蛋白
)
与至少一个“成熟”(
无
MIS)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
结合
(
例如肽键合
)
，任选
/
优选在其
C
端充分截短的
IF1
蛋白结束
(
例如截断到
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
}
其第
60
或第
47
个残基
)
，和
/
或任选地在其
N
‑
末端被截断
(
例如被任意数量的残基截断，最多
9[
或
13]
个残基
)
，和
/
或在其“磷酸化控制开关”和
/
或“pH”中具有一个或多个氨基酸取代依赖基序”(
例如一个或多个
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
}S14A[
或
T14A]、E26A[
或
Q26A
或
E26Q]、H48A[
或
Y48A]、H49K[
或
H49A
或
H49R]
，
H55A[
或
Y55A
或
V55A]、H56A[
或
T56A
或
S56A]
取代
)
，这样它仍然可以抑制
F1F0 ATP
水解，但它不能
(
或不能那么容易地
)
在碱性
pH
下形成
IF1
蛋白四聚体
(
和更高的寡聚体
)
，优选使得它可以在线粒体基质的正常碱性
pH(
～
pH 8)
下更有效地抑制
F1F0 ATP
水解
(
比天然
/
未修饰的
IF1
蛋白
)
，任选地
/
优选地，其中该
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
具有衍生自
/
修饰自待施用于
[
例如人
]
的物种或具有较长最大寿命的物种的
IF1
蛋白质序列的序列，任选地具有非常长的最大寿命，例如鲸鱼，例如弓头鲸或蓝鲸，和
/
或其至少一种化妆品可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其本领域的其他载体；任选地，化妆品组合物包含
(
或由其组成
)
至少一种肽
/
蛋白质，其包含
(
或由其组成
)
至少一个序列，其是人体内天然存在的序列的设计串联，例如其中
CPP
组分是
SEQ ID NO:455(
或
SEQ ID NO:461
，或
SEQ ID NO:4
‑
11
的残基
)453)
，
MIS
组分是
SEQ ID NO:162
，
IF1
蛋白
/
片段序列组分来自人
IF1
蛋白
(
非限制性的，例如使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号：残基：1‑
60、10
‑
60、14
‑
60、13
‑
47、14
‑
47、42
‑
58
，分别为
DNA
序列
SEQ ID NO
：
1473
，
SEQ ID NO
：
1476
，
SEQ ID NO
：
1479
，
SEQ ID NO
编码的氨基酸序列：
1482
，分别为
SEQ ID NO
：
1485
，
SEQ ID NO
：
1488)
，和
/
或至少一种美容上可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其所属领域的其他载体；任选地，化妆品组合物包含
(
或由其组成
)
至少一种肽
/
蛋白质，其包含
(
或由其组成
)
至少一种选自
SEQ ID NO:166
至
SEQ ID NO:438
的序列，和
/
或其至少一种片段
(
非限制性实例，其中表位
/
亲和标签成分
[
如果存在
]
不存在，和
/
或细胞穿透肽组分
[
如果存在
]
不存在
)
和
/
或其串联片段，和
/
或功能性
(
可以抑制
/
减少细胞和
/
或亚线粒体颗粒
[SMP]
测定中的
F1F0 ATP
水解
F1F0 ATP
水解
)
其序列变体
(
可选地由保守替代
[s]),
和
/
或至少一种美容上可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其所属领域的其他载体；优选以适合施用于受试者
(
优选人
)
的皮肤
/
头皮，任选其面部的形式；优选地，其中组合物含有至少一种化妆品
/
皮肤病学可接受的载体；任选地，其中所述组合物包含至少一种另外的活性剂，其可以执行皮肤
/
头皮护理
/
保护
/
治疗
/
修复
/
美化
/
清洁
/
芳香
/
美容目的
/
外观改变中的一种或多种，任选地用于人皮肤
/
头皮，其中许多这样的试剂是本领域已知的
(
非限制性的，例如视黄醇和其他类视黄醇
)。2.
权利要求1的化妆品组合物至少一种形式
/
制剂选自
(
或由以下组成
)
：凝胶
、
乳剂
、
油
/
水乳剂
、
水
/
油乳剂
、
乳剂
、
洗剂
、
软膏剂
、
棒剂
、
笔剂
、
喷雾剂
、
霜剂
、
膏霜凝胶剂
、
多剂乳液，无水组合物，水性分散体，油，香脂，泡沫，水醇溶液，水乙醇溶液，水凝胶，搽剂，血清，血清，摩丝，润发油，粉末，条状物，气雾剂，颗粒剂，溶液，悬浮液，乳液，糖浆，多糖膜
,
果冻
,
明胶
,
润肤乳液
,
润肤乳
,
润肤霜
,
水包油和
/
或硅酮乳液
,
水包油和
/
或硅酮乳液
,
香膏
,
液体
,
糊状物
,
气溶胶
,
黄油
,
和
/
或掺入用于施用
/
施用至人皮肤
/
头皮的产品中，任选选自包括
(
或由以下组成
)
的组：用于皮肤
/
头皮的化妆品
、
用于面部的化妆品
、
日常使用护肤产品，去角质产品，皮肤平滑产品，改善
/
平滑皮肤纹理产品，抗衰老
/
抗皱皮肤产品
/
面霜
/
精华素，防脱发产品，生发产品，防白发产品，头发染料
、
护肤霜
、
面霜
、
眼霜
、
祛痘
/
祛斑霜
、
保湿霜
、
洁面乳
、
洗发水
、
护发素
、
去屑产品
、
肥皂
、
沐浴露
、
头皮乳液
、
身体油
、
皮肤
/
身体
/
面部磨砂膏
、
牛奶
/
用于护理皮肤和
/
或头发的霜
、
清洁霜
、
粉底
、
防晒霜
/
防晒霜
/
防晒霜
(
例如提供对
UVA
和
/
或
UVB
辐射的保护
)
，假晒黑产品
、
美白产品
、
美白产品
/
面霜
、
剃须膏
/
泡沫
/
润唇膏
、
香水
、
须后水
、
除臭剂
、
止汗剂
、
彩妆产品
、
唇膏
、
口红
、
唇彩
、
护唇膏
、
睫毛膏
、
指甲油
、
遮瑕膏
、
眼部遮瑕膏
、
腮红
、
睫毛膏
、
粉底
、
粉底
、BB
霜或
CC
霜或
DD
霜或类似产品
、
卸妆产品
/
乳液
/
乳液
/
面霜
、
眼影
、
药膏
、
眼霜
‑
消脂产品
、
抗妊娠纹产品
、
抗静脉曲张产品
、
日用去角质
、
面膜
、
眼膜
、
夜膜
、
睡眠面膜
、
牙膏
、
漱口水
、
睫毛膏
、
彩妆粉底
、
粉底
、BB
霜或
CC
霜或
DD
霜或类似产品
、
卸妆产品
/
乳液
/
乳液
/
面霜
、
眼影
、
软膏
、
抗脂肪产品
、
抗妊娠纹产品
、
抗
‑
静脉曲张产品，日常去角质，面膜，眼膜，夜膜，睡眠面膜，牙膏，漱口水，睫毛膏
、
彩妆粉底
、
粉底
、BB
霜或
CC
霜或
DD
霜或类似产品
、
卸妆产品
/
乳液
/
乳液
/
面霜
、
眼影
、
软膏
、
抗脂肪产品
、
抗妊娠纹产品
、
抗
‑
静脉曲张产品，日常去角质，面膜，眼膜，夜膜，睡眠面膜，牙膏，漱口水，和
/
或掺入
/
吸收
/
吸附到一种或多种织物
、
无纺布
、
纺织品
、
用于服装的材料
、
服装
、
天然或合成纤维
、
羊毛
、
面罩
、
睡眠面罩
、
眼罩
、
膏药
、
医疗装置
、
绷带
、
纱布
、
擦拭布
、
贴剂
、
粘性皮肤贴剂
、
非粘性皮肤贴剂
、
微电贴剂
、
小毛巾
、
水凝胶
、
和
/
或吸附在至少一种美容
/
药学上可接受的固体有机聚合物或固体矿物载体上，该载体选自
(
或由以下组成的
)
滑石粉
、
膨润土
、
二氧化硅
、
淀粉
、
麦芽糖糊精或无机载体，吸附在粉状有机和
/
或无机载体上聚合物
。3.
至少一种根据权利要求1‑2中一项或多项的化妆品组合物用作化妆品，其中将一定量
(
优选有效量例如美容有效量
)
施用给受试者，任选地其中受试者自我施用，优选施用于受试者的皮肤
/
头皮，任选地施用于他们的面部，优选地其中受试者是人
。4.
至少一种根据权利要求1‑2中一项或多项所述的化妆品组合物的用途在减少
/
减缓
/
延迟
/
预防
/
消除一种或多种可见的衰老迹象，其中将其施用于人体皮肤的一个或多个区域
(
任选已经显示出一种或多种衰老迹象
)
，优选地，其中所述组合物每次至少施用一次一天持续足以消除
/
减少
/
减缓
/
延迟
/
预防人类皮肤该部分的可见老化迹象的时间段，其中所述时间段为至少2周
。5.
一个“我成熟”(
具有线粒体导入序列，
MIS)
或“成熟”(
无
MIS)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
或其融合蛋白，其中以下一项或多项适用于
(
适用于
)
部分或全部
(
其中考虑了所有可能的组合
{
包括元素
/
描述符在不同要点内和跨不同要点的所有可能组合
}
，但相互排斥的组合除外
)
：
(i)
生产
/
分离
/
纯化
/
基本上纯化
/
部分纯化；
(ii)
有关联药学
/
化妆品可接受的盐
[s]
；
(iii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组成部分
/
整体包括
(
或由
)
弓头鲸
(Balaena mysticetus)IF1
蛋白；
(iv)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成蓝鲸
(
鲸鱼
)IF1
蛋白；
(v)
以下一项或多项
(
或两项
/
三项
/
四项
/
五项
/
六项
/
七项
/
八项
/
九项
/
十项
/
十一项
/
十二项
/
十三项
/
十四项
/
十五项
/
十六项
/
十七项或更多项
)
适用于
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组分
/
整体：
(
使用“成熟”[
无线粒体导入序列，
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：第
49
个残基不是组氨酸，第
14
个残基不是可以磷酸化的残基
(
即不是丝氨酸或苏氨酸
)
，第
26
个残基是不是谷氨酸，第
48
个残基不是组氨酸，第
55
个残基不是组氨酸，第
56
个残基不是组氨酸，第
49
个残基是赖氨酸或丙氨酸或精氨酸，第
14
个残基是丙氨酸，第
26
个残基是丙氨酸或谷氨酰胺，第
48
个残基是丙氨酸，第
55
个残基是丙氨酸，第
56
个残基是丙氨酸，第
79
个残基是甘氨酸或天冬酰胺，第
76
个残基是赖氨酸，第
73
个残基是丝氨酸，第
62
个残基是组氨酸，第
82
个残基是天冬氨酸，第
83
个残基是天冬氨酸，第
84
个残基是天冬氨酸，第
85
个残基是天冬氨酸，第
57
个残基是缬氨酸，第
54
个残基是丝氨酸或天冬氨酸，第
61
个残基是谷氨酰胺，第
51
个残基是天冬酰胺，第
47
个残基是谷氨酸，第
46
个残基是精氨酸，第
44
个残基是丝氨酸，第
39
个残基是赖氨酸，第
38
个残基是丙氨酸或谷氨酸，第
37
个残基残基为精氨酸或半胱氨酸或赖氨酸，第
36
残基为天冬氨酸或谷氨酸，第
29
残基为组氨酸，第
27
残基为丙氨酸，第
25
残基为赖氨酸，第
17
残基为天冬氨酸，第
12
残基为甘氨酸，第
11
残基为丝氨酸或苏氨酸，第
10
个残基是丝氨酸或甘氨酸，第9个残基是甘氨酸，第8个残基为亮氨酸或甘氨酸，第6个残基为天冬氨酸或甘氨酸，第5个残基为丙氨酸，第4个残基为丝氨酸或甘氨酸，第3个残基为谷氨酸或丝氨酸或赖氨酸，第2个残基为甘氨酸，第1个残基为亮氨酸，其中特别子实施方案
(
其中考虑了所有可能的组合，除非相互排斥
)
：
(a)
列表中的三
(3)
项或更多项是真实的；
(b)
五
(5)
项或更多项为真；
(c)
七
(7)
个或更多列表是真实的；
(d)
列表中的九
(9)
项或更多项是真实的；
(e)
列表中的十一
(11)
项或更多项是真实的；
(f)
列表中的十三
(12)
项或更多项是真实的；
(g)
列表中的十四
(14)
项或更多项是真实的；
(h)
十五
(15)
或更多的列表是真实的；
(i)
列表中的十六
(16)
项或更多项是真实的；
(j)
列表中的十七
(17)
或更多是真实的；
(k)
至少一个
IF1
蛋白
/
片段序列变体包含
(
或由以下组成
)
具有一个或多个替换的人类
(
或具有较长最大寿命的其他物种，任选地具有比人类更长的最大寿命的物种
)
的
IF1
蛋白质
/
片段序列
(
和
/
或在其
C
末端添加一个或多个天冬氨酸残基
)
以使列表中的一个或多个为真；
(l)
至少一种
IF1
蛋白
/
片段序列变体包含
(
或由
)
弓头鲸
/
蓝鲸的
IF1
蛋白
/
片段序列和一个或多个替换
(
和
/
或在其
C
末端添加一个或多个天冬氨酸残基
)
使清单中的一项或多项为真；
(vi)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组分
/
整体包含
(
或由以下组成
)
在长寿物种中发现的
IF1
蛋白序列变体
(
优选其中适用于上面要点
(v)
中的一个
/
两个
/
三个
/
四个
/
五个或更多个描述符
)(
高最大寿命
)
，优选其最大寿命等于或大于
Bos taurus
，更优选其最大寿命等于或大于人类，更优选其最大寿命大于人类，例如弓头鲸或蓝鲸；
(vii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白
/
片段
(
可选来自哺乳动物
、Bos taurus
或人类，或蓝鲸或弓头鲸
)
，具有一个或多个
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
}S14A(
或
T14A)、H49K(
或
H49A
或
H49R),E26A(
或
E26Q
或
Q26A)、H48A(
或
Y48A)、H55A(
或
Y55A)、H56A(
或
T56A
或
S56A)
取代，任选地还
/
代替添加1‑
3(
或1‑
5)
个天冬氨酸
(D)
残基到它的
C
端；
(viii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成具有一个或多个
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
}S14A、H49K(
或
H49A
或
H49R)
的人
IF1
蛋白
/
片段，
E26A(
或
E26Q)、H48A、H55A、H56A
取代，可选地也
/
代替1‑
3(
或1‑
5)
天冬氨酸
(D)
残基添加到其
C
末端；
(ix)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成蓝鲸
IF1
蛋白
/
片段，具有一个或多个
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
}T14A、H49K(
或
H49A
或
H49R)
，
E26A(
或
E26Q)、H48A、H55A、H56A
取代，可选地也
/
代替1‑
3(
或1‑
5)
天冬氨酸
(D)
残基添加到其
C
末端；
(x)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成弓头鲸
IF1
蛋白
/
片段，具有一个或多个
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
}H49K(
或
H49A
或
H49R)
，
E26A(
或
E26Q)、H48A、H55A、H56A
取代，可选地也
/
代替1‑
3(
或1‑
5)
天冬氨酸
(D)
残基添加到其
C
末端；
(xi)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白片段
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
)
长度小于
z
个氨基酸，其中
z
是选自
85、84、83、82、81、80、79、78、77
的整数
,76,75,74,73,72,71,70,69,68,67,66,65,64,63,62,61,60,59,58,57,56,55,54,53,52,51,50,49,48,47,46,45,44,43,42,41,40,39,38,37,36,35,34,33,32,31,30,29,28,27,26,25,24,23,22,21,20,19,18,17,16,15,14,13,12,11,10,9,8,7,6,5,4,3,2[
不同的
z
值是不同的体现
]
；
(xii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白片段
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
)xy
，其中
x
是1到
20
之间的整数
(
或1到
44
之间，或1到
84
之间
)
，
y
是
40
到
85
之间的整数
(
或介于
40
与
85
之间，或介于2与
85
之间
)[x
和
/
或
y
的不同值是不同的实施例；在上述范围限制内，考虑了
x
和
y
整数值的所有可能组合
]
；
(xiii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白质片段选自
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：1‑
84、2
‑
84、3
‑
84、4
‑
84、5
‑
84、6
‑
84、7
‑
84、8
‑
84、9
‑
84、10
‑
84、11
‑
84、12
‑
84、13
‑
84、14
‑
84、15
‑
84、16
‑
84、17
‑
84、18
‑
84、19
‑
84、20
‑
84、21
‑
84、22
‑
84、23
‑
84、24
‑
84、25
‑
84、26
‑
84、27
‑
84、28
‑
84、29
‑
84、30
‑
84、31
‑
84、32
‑
84、33
‑
84、34
‑
84、35
‑
84、36
‑
84、37
‑
84、38
‑
84、39
‑
84、40
‑
84、41
‑
84、42
‑
84、43
‑
84、44
‑
84、45
‑
84、46
‑
84、47
‑
84、48
‑
84、49
‑
84、50
‑
84、51
‑
84、52
‑
84、53
‑
84、54
‑
84、55
‑
84、56
‑
84、57
‑
84、58
‑
84、59
‑
84、60
‑
84、61
‑
84、62
‑
84、63
‑
84、64
‑
84、65
‑
84、66
‑
84、67
‑
84、68
‑
84、69
‑
84、70
‑
84、71
‑
84、72
‑
84、73
‑
84、74
‑
84、75
‑
84、76
‑
84、77
‑
84、78
‑
84、79
‑
84、80
‑
84、81
‑
84、82
‑
84、83
‑
84
，或这些上述片段之一的子序列
/
片段；
(xiv)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白质片段选自：
IF1
蛋白质残基
{
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
}
：
14
‑
47、13
‑
47、12
‑
47、11
‑
47、10
‑
47、9
‑
47、8
‑
47、7
‑
47、6
‑
47、5
‑
47、4
‑
47、3
‑
47、2
‑
47、1
‑
47、14
‑
48、14
‑
46、14
‑
45、14
‑
44、14
‑
43、14
‑
42、13
‑
48、13
‑
46、13
‑
45、13
‑
44、13
‑
43、13
‑
42、12
‑
48、12
‑
46、12
‑
45、12
‑
44、12
‑
43、12
‑
42、11
‑
48、11
‑
46、11
‑
45、11
‑
44、11
‑
43、11
‑
42、10
‑
48、10
‑
46、10
‑
45、10
‑
44、10
‑
43、10
‑
42,42
‑
58、42
‑
59、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60、10
‑
56、10
‑
57、10
‑
58、10
‑
59、10
‑
60、14
‑
60、10
‑
84、14
‑
84、18
‑
84、10
‑
50、1
‑
45、42
‑
56、42
‑
47、48
‑
56、49
‑
55
；
(xv)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白残基
[
最好来自最长寿命至少与
Bos taurus
一样长的物种，更优选来自寿命非常长的哺乳动物，例如人类，或
(
更优选
)
蓝鲸或弓头鲸
](
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60、10
‑
56、10
‑
57、10
‑
58、10
‑
59、10
‑
60
，优选地，其中，如果第
14
个残基不是丙氨酸，则其被取代为丙氨酸；
(xvi)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
人组成
IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60,
最好用
S14A
替换；
(xvii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组成部分
/
整体包括
(
或由
)
鲸鱼
(
非限制性的，例如选自弓头鲸
、
鳍鲸
、
蓝鲸
、
座头鲸
、
杀手鲸
、
精子鲸
、
灰鲸
、
居维叶喙鲸
、
长鳍领航鲸
)IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60
，优选地，其中，如果第
14
个残基不是丙氨酸，则将其取代为丙氨酸；
(xviii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包含
(
或由
)
蓝鲸组成
IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60,
最好用
T14A
替换；
(xix)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
弓头鲸组成
IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60
；
(xx)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组成部分
/
整体包含
(
或由
)
哺乳动物
/Bos Taurus
组成
/rodent/mouse/rat/rabbit IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：一种或多种
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60,42
‑
58、42
‑
59
；
(xxi)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：
42
‑
58
或
42
‑
59(
或其序列变体
)
；
(xxii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
人组成
IF1
蛋白残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
：
42
‑
58
或
42
‑
59(
或其序列变体
)
，任选地与
E51N、V54S、K57V
中的一种或多种换人；
(xxiii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白短于
40
个
(
或
35
个
、
或
30
个
、
或
25
个
、
或
20
个
、
或
15
个
、
或
10
个或5个
)
氨基酸的片段，其含有
H49
残基
(
或其序列变体
)
；
(xxiv)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组成部分
/
整体包括
(
或由
)
短命哺乳动物
(
例如啮齿动物，例如老鼠
)IF1
蛋白短于
40
个
(
或
35
个
、
或
30
个
、
或
25
个
、
或
20
个
、
或
15
个
、
或
10
个或5个
)
氨基酸的片段，其含有
H49
残基
(
或其序列变体
)
；
(xxv)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成来自将与肽
/
蛋白质
(
和
/
或其组合物
)
一起施用的物种的
IF1
蛋白质片段
(
或其序列变体
)
；
(xxvi)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
来自最长寿命至少与金牛座一样长的物种，更优选来自非常长寿的哺乳动物，例如人类，或
(
更优选
)
蓝鲸或弓头鲸；
(xxvii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包括
(
或由
)
组成来自最长寿命至少与小鼠一样短的哺乳动物的
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
；
(xxviii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体包含
(
或由其组成
)
来自两个或多个不同物种的
IF1
蛋白序列的结合
/
组合片段和
/
或残基，优选地其中这些物种中的至少一个具有高的最大寿命，优选地等于或更长比人长，例如人
、
弓头鲸或蓝鲸，更优选比人长，例如弓头鲸或蓝鲸；
(xxix)
在其
N
‑
和
/
或
C
‑
末端进行修饰，任选地
C
‑
末端的酰胺化
/
酯化和
/
或
N
‑
末端的酰化
(
例如乙酰化
)
；
(xxx)
至少一种
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
，和
/
或包含融合蛋白的
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
，具有在其
N
‑
末端酰化的脂肪酸
(
任选地直链或支链，饱和或不饱和，包含2至
100
个碳原子，更优选地2至
25
个碳原子；或其衍生物
)
，非限制性例如肉豆蔻酰基
/
棕榈酰基
/
硬脂酰基与
N
‑
末端缀合；
(xxxi)
序列，包含一定数量
(
选自1和8之间的整数
)
氨基酸残基
(
任选地其中一个或多个是疏水性的
{
任选地至少与苯丙氨酸一样疏水
}
，和
/
或一个或多个带正电荷
{
例如是赖氨酸和
/
或精氨酸
}
，和
/
或一种或多种具有适度疏水性且能够带正电荷
(
例如组氨酸
})
，肽键合至
N
‑
末端，任选地其中脂肪酸
(
或其衍生物
)
缀合
/
酰化到该融合蛋白的所得
N
端，和
/
或缀合
/
酰化到一个或多个这些另外的氨基酸残基的侧链，任选地其中这些另外的残基中的至少一个是赖氨酸，并且脂肪酸与其侧链缀合
/
酰化
(
任选地通过“间隔物”部分，其可以是非限制性示例，氨基酸
[
例如
L
‑
γ
‑
谷氨酸
]
或二肽，或
L
‑
γ
‑
谷氨酸和两个
OEG{8
‑
氨基
‑
3,6
‑
二氧辛酸
}
单元
)
，任选地，其中这些添加的残基中的至少一个是半胱氨酸，和胆固醇衍生物
(
例如用半胱氨酸反应性2‑
溴乙酰部分修饰的胆固醇
)
或脂肪酸衍生物
(
例如
[
未显示氢原子
]
：
SCC(COOH)
‑
NC(O)
‑
(C)n
，其中
n
介于2和
100
之间，优选介于2和
25
之间
)
通过以下方式与其侧链缀合一个二硫键，优选地，其中该添加的序列仅具有总共连接的一个亲脂性
(
脂肪酸
/
胆固醇或其衍生物
)
部分，其中优选的脂肪酸是直链或支链的
、
饱和的或不饱和的，包含
2
至
100
个碳原子，更优选2至
100
个碳原子
25
个碳原子，任选其中连接的脂肪酸是肉豆蔻酰基
/
棕榈酰基
/
硬脂酰基；
(xxxii)
氨基酸序列中的至少一个半胱氨酸残基，可选地插入
/
取代到序列中，可选地存在或取代到对应位置的半胱氨酸
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
的第
37
个氨基酸位置
[
顺便说一下，灰鲸
IF1
蛋白在这个位置有一个半胱氨酸残基
]
，它有一个胆固醇衍生物
(
如用半胱氨酸反应性2‑
溴乙酰部分修饰的胆固醇
)
或优选通过二硫键与其缀合的脂肪酸
(
或其衍生物
)
，任选地其中脂肪酸衍生物是
[
氢原子未显示
]
：
SCC(COOH)
‑
NC(O)
‑
(C)n
其中
n
在2和
100
之间，优选在2和
25
之间，其中
(C)n
可以是线性的或支化的，饱和的或不饱和的；
(xxxiii)
部分或全部被环化，在一个或多个循环中；
(xxxiv)
部分或全部通过连接到支架是双环的，任选地通过明智地插入半胱氨酸残基使其成为双环，半胱氨酸残基赋予通过硫醚和
/
或二硫键与支架结构的连接；
(xxxv)
在一处或多处
N
α
‑
烷基化
(
例如
N
α
‑
甲基化
)
；
(xxxvi)
包含一个或多个相应的
(
与其序列
)D
‑
氨基酸；
(xxxvii)
包含一个或多个逆反区域，或全部逆反；
(xxxviii)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
组件
/
整体是逆反的；
(xxxix)
其至少一个羧基被酯化，任选地使得其一个或多个羧基
(COOH)
被以下基团
(
或其类似物
)
取代：其中
RA
是
(
在每个使用点独立地
)
烷基或烷氧基
(
任选地在指定苯环的对位
)
或卤素，
n
是0和3之间，
R
是烷基
、
烯基
、
炔基或氢，
RM
是任选被一个或多个烷基
、
烷氧基
、
芳基
、
烷基芳基
、
卤素
、
卤代烷基或卤代烷氧基取代的烷基
、
烯基
、
炔基
、
环烷基
、
芳基或芳基烷基，例如：
6.
根据权利要求5所述的
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
或其融合蛋白，其中
(
来自一个或多个子列表和
/
或总列表
)x
或更多方面
/
特征
/
描述符
/
修饰是真实的其中
x
是选自以下的整数：
2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20[
不同的
x
值是不同的体现
].7.
根据权利要求6所述的融合蛋白，其包含
(
或由以下组成
)
：
(i)
至少一个线粒体导入序列
(MIS)[
用于输送到线粒体基质中
]
，任选地按顺序
(
首先显示
N
‑
末端
)
：
[MIS]
‑
[IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)]
；或者
(ii)
至少一个表位
/
亲和标签和至少一个
MIS[
用于输送到线粒体基质中
]
，可选顺序
(
首先显示
N
‑
末端
)
：
[
表位
/
亲和标签
]
‑
[MIS]
‑
[IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)]
；或者
(iii)
至少一个
MIS[
用于输送到线粒体基质
]
和至少一个细胞穿透肽
(CPP)
序列，任选
地顺序
(N
‑
末端首先显示
)
：
[CPP]
‑
[MIS]
‑
[IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)]
；或者
(iv)
至少一个表位
/
亲和标签和至少一个
MIS[
用于递送到线粒体基质
]
和至少一个
CPP
序列，任选地按顺序
(N
‑
末端首先显示
)
：
[
表位
/
亲和标签
]
‑
[CPP]
‑
[MIS]
‑
[IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)]。8.
根据权利要求7的融合蛋白，其中以下一项或多项适用于
(
适用于
)
部分或全部
(
其中考虑了所有可能的组合
{
包括元素
/
描述符在不同要点内和跨不同要点的所有可能组合
}
，但相互排斥的组合除外
)
：
(i)
生产
/
分离
/
纯化
/
基本上纯化
/
部分纯化；
(ii)
有关联药学
/
化妆品可接受的盐
[s]
；
(iii)
线粒体导入序列
(MIS)
与一个物种对其从细胞质转运到线粒体基质中的一种或多种其蛋白质所使用的相同，任选地其中
MIS
与一个物种对其天然
IF1
蛋白质所使用的相同；
(iv)MIS
是来自人或小鼠的
IF1
蛋白；
(v)MIS
和
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自不同物种；
(vi)MIS
和
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自不同的物种，任选地，其中前者来自将与融合蛋白一起施用的物种，而后者来自不同的物种，优选来自比其寿命更长的物种主题
(
待管理
)
物种，最好来自非常长寿的物种
(
例如弓头鲸或蓝鲸
)
；
(vii)MIS
和
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自同一物种；
(viii)IF1
蛋白
/
片段来自
Bos taurus/
人
/
弓头鲸
/
蓝鲸
/
小鼠
/
大鼠
/
裸鼹鼠
(
或其序列变体
)
，
MIS
来自不同物种；
(ix)MIS
来自人类，
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自不同物种，可选地为金牛座
/
鲸
/
弓头鲸
/
蓝鲸
/
小鼠
/
大鼠
/
裸鼹鼠；
(x)MIS
来自小鼠，
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自不同物种，可选地为金牛座
/
鲸鱼
/
弓头鲸
/
蓝鲸
/
大鼠
/
裸鼹鼠；
(xi)MIS
来自一个物种，而
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
来自寿命更长的物种
(
更高的最大寿命
)
；
(xii)MIS
来自一个物种，
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
来自寿命较短的物种
(
较低的最大寿命
)
；
(xiii)MIS
来自一个物种，并且
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
的
N
端残基多于
IF1
蛋白的
C
端一半，最好来自寿命更长的物种
(
更高的最大寿命
)
；
(xiv)MIS
来自一个物种，并且
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
的
C
端残基多于
IF1
蛋白的
N
端一半，最好来自寿命较短的物种
(
较低的最大寿命
)
；
(xv)MIS
来自一个物种，并且
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
来自不同的物种，最好是寿命更长的物种
(
更高的最大寿命
)
，并且包含
(
或由以下组成
){
使用“成熟”[
没有
MIS]IF1
蛋白编号
}
一个或多个
(
或其序列变体
)10
‑
47、13
‑
47、14
‑
47、1
‑
56、1
‑
57、1
‑
58、1
‑
59、1
‑
60,10
‑
56,10
‑
57,10
‑
58,10
‑
59,10
‑
60,42
‑
58、42
‑
59
残留物；
(xvi)MIS
来自一个物种，
IF1
蛋白片段
(
或其序列变体
)
来自不同的物种，优选短寿命物种
(
较低的最大寿命
)
，其中短于
40(
或
35
，或
30
，或
25),
或
20,
或
15,
或
10)
个氨基酸，并包含
H49
残基
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白编号
)
；
(xvii)
是
(
全部或部分
[s])
逆反的，任选地其中线粒体导入序列
(MIS)
不是逆反的；
(xviii)MIS
被排除在反逆之外，但其他部分可以；
(xix)MIS
不是逆反的，但
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
是逆反的
(
全部或部分
[s])
；
(xx)MIS
不是逆反的，但
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
和
/
或细胞穿透肽
(CPP)
序列是逆反的
(
全部或部分
[s])
；
(xxi)CPP
组分是一种或多种
Tat
序列
(
和
/
或其本领域的序列变体
)
，
Penetratin
序列
(
和
/
或其本领域的序列变体
)
，聚精氨酸序列
(
和
/
或其本领域的序列变体
)
，可选
YGRKKRRQRRRG[
序列号：
446](
任选地，其中末端甘氨酸不存在
)
，任选地
RRRRRRRG[
序列号：
461](
任选地其中末端甘氨酸不存在
)
，任选地其中一个或多个氨基酸可以是相应的
D
‑
氨基酸，任选地其中部分或全部
CPP
组分是逆反的；
(xxii)
表位
/
亲和标签成分包括
(
或由
)
组成一个或多个聚组氨酸，任何序列号：
130
到序列号：
144
例如
HHHHHHDYDDDDK[
序列号：
136]
；
(xxiii)CPP
组分在一侧或两侧，任选地仅在其
C
‑
末端
(
其与
MIS
组分连接
)
的侧翼，有零个或多个甘氨酸和
/
或脯氨酸残基，任选地0至5个残基，任选地1此类残留物；
(xxiv)CPP
组分通过二硫化物
(
通过明智地插入和
/
或取代半胱氨酸残基
)
或肽键或其混合物
(
即一些
IF1
融合蛋白具有其
CPP)
与融合蛋白的其余部分结合由二硫键结合，其他由肽键结合
)
，任选地，其中半胱氨酸残基位于
CPP
的
C
末端，其与
MIS
或
IF1
蛋白中插入
/
取代的
N
末端
/
内部半胱氨酸二硫键结合
/
融合蛋白的片段
(
或其序列变体
)
组分，任选地其中半胱氨酸是
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)
存在于
(IF1
蛋白质
/
片段或其序列变体的遗产中，例如如果来自灰鲸，则使用
)
或替换为第
37
位；
(xxv)
在其
N
‑
和
/
或
C
‑
末端进行修饰，任选地
C
‑
末端的酰胺化
/
酯化和
/
或
N
‑
末端的酰化
(
例如乙酰化
)
；
(xxvi)
至少一种
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
，和
/
或包含融合蛋白的
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
，具有与其
N
‑
末端共轭
/
酰化的脂肪酸
(
任选直链或支链，饱和或不饱和，含有2至
100
个碳原子，更优选2至
25
个碳原子；或其衍生物
)
，非限制性例如肉豆蔻酰基
/
酰化到
N
‑
末端的棕榈酰
/
硬脂酰基；
(xxvii)
序列，包含一定数量
(
选自1和8之间的整数
)
氨基酸残基
(
任选地其中一个或多个是疏水性的
{
任选地至少与苯丙氨酸一样疏水
}
，和
/
或一个或多个带正电荷
{
例如是赖氨酸和
/
或精氨酸
}
，和
/
或一种或多种具有适度疏水性且能够带正电荷
(
例如组氨酸
})
，肽键合至
N
‑
末端，任选地其中脂肪酸
(
或其衍生物
)
缀合
/
酰化到该融合蛋白的所得
N
端，和
/
或缀合
/
酰化到一个或多个这些另外的氨基酸残基的侧链，任选地其中这些另外的残基中的至少一个是赖氨酸，并且脂肪酸与其侧链缀合
/
酰化
(
任选地通过“间隔物”部分，其可以是非限制性示例，氨基酸
[
例如
L
‑
γ
‑
谷氨酸
]
或二肽，或
L
‑
γ
‑
谷氨酸和两个
OEG{8
‑
氨基
‑
3,6
‑
二氧辛酸
}
单元
)
，任选地，其中这些添加的残基中的至少一个是半胱氨酸，和胆固醇衍生物
(
例如用半胱氨酸反应性2‑
溴乙酰部分修饰的胆固醇
)
或脂肪酸衍生物
(
例如
[
未显示氢原子
]
：
SCC(COOH)
‑
NC(O)
‑
(C)n
，其中
n
介于2和
100
之间，优选介于2和
25
之间
)
通过以下方式与其侧链缀合一个二硫键，优选地，其中该添加的序列仅具有总共连接的一个亲脂性
(
脂肪酸
/
胆固醇或其衍生物
)
部分，其中优选的脂肪酸是直链或支链的
、
饱和的或不饱和的，包含2至
100
个碳原子，更优选2至
100
个碳原子
25
个碳原子，任选其中连接的脂肪酸是肉豆蔻酰
基
/
棕榈酰基
/
硬脂酰基；
(xxviii)
氨基酸序列中的至少一个半胱氨酸残基，可选地插入
/
取代到序列中，可选地存在或取代到对应位置的半胱氨酸
(
使用“成熟”[
无
MIS]IF1
蛋白质编号
)IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
的第
37
个氨基酸位置
[
顺便说一下，灰鲸
IF1
蛋白在这个位置有一个半胱氨酸残基
]
，它有一个胆固醇衍生物
(
如用半胱氨酸反应性2‑
溴乙酰部分修饰的胆固醇
)
或优选通过二硫键与其缀合的脂肪酸
(
或其衍生物
)
，任选地其中脂肪酸衍生物是
[
氢原子未显示
]
：
SCC(COOH)
‑
NC(O)
‑
(C)n
其中
n
在2和
100
之间，优选在2和
25
之间，其中
(C)n
可以是线性的或支化的，饱和的或不饱和的；
(xxix)
部分或全部是环状的，任选地是双环的，任选地通过明智地插入半胱氨酸残基使其成为双环的，所述半胱氨酸残基赋予通过硫醚和
/
或二硫键与支架结构的连接，任选地，其中，对于包含融合蛋白的
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
，如果存在，
CPP
序列
(
可选地，文献中以双环形式使用的
CPP
序列
)
被限制在一个循环中，而
MIS
和
IF1
蛋白质
/
片段
(
或其序列变体
)
被限制在另一个循环中双环结构的循环，任选地，其中连接到支架的序列具有以下形式
(
其中下面的
IF1
可以指“成熟”IF1
蛋白和
/
或其
IF1
序列变体
/
片段
/
片段序列变体：
Cys
‑
CPP
‑
Cys
‑
MIS
‑
IF1
‑
Cys
；
(xxx)
在一处或多处
N
α
‑
烷基化
(
例如
N
α
‑
甲基化
)
；
(xxxi)
包含
(
或由其组成
)
一种或多种对应的
(
与其序列
)D
‑
氨基酸；
(xxxii)
是
(
全部或部分
[s])
逆反的，任选地其中如果它包含线粒体导入序列
(MIS)
，这不是逆反的，任选地其中线粒体导入序列
(MIS)
不是逆反的，并且
IF1
蛋白
/
片段
(
或其序列变体
)
和
/
或细胞穿透肽
(CPP)
序列是逆反的
(
全部或部分
[s])
；
(xxxiii)
其至少一个羧基被酯化，任选地使得其一个或多个羧基
(COOH)
被以下基团
(
或其类似物
)
取代：其中
RA
是
(
在每个使用点独立地
)
烷基或烷氧基
(
任选地在指定苯环的对位
)
或卤素，
n
是0和3之间，
R
是烷基
、
烯基
、
炔基或氢，
RM
是任选被一个或多个烷基
、
烷氧基
、
芳基
、
烷基芳基
、
卤素
、
卤代烷基或卤代烷氧基取代的烷基
、
烯基
、
炔基
、
环烷基
、
芳基或芳基烷基，例如：
9.
一个
(
可选生产的
/
分离的
/
纯化的
/
基本上纯化的
/
部分纯化的
)
包含
(
或由其组成
)
至少一个选自
SEQ ID NO:166
至
SEQ ID NO:438
的序列或其片段的肽
/
蛋白质
(
对于非限制性实例，其中表位
/
亲和标签成分
[
如果存在
]
是不存在，和
/
或细胞穿透肽组分
[
如果存在
]
不存在
)
，或其串联片段，和
/
或其序列变体
(
非常优选功能性
{
可以抑制
/
减少细胞中的
F1F0 ATP
水解和
/
或在亚线粒体粒子
[SMP]
测定中
F1F0 ATP
水解
},
任选地并入一个或多个保守取代
)
，任选地，其中权利要求5‑8中的一项或多项中列出的选项中的一项或多项适用于序列
(
非限制性的，例如与药学
/
化妆品可接受的盐
[s]
，酯化
、N
‑
和
/
或
C
‑
末端修饰
、N
‑
末端前序列连接
、
胆固醇衍生物和
/
或脂肪酸
[
或其衍生物
]
连接
、
环化
、
双环
、
相应一处或多处
D
‑
氨基酸，一处或多处逆反，
N
α
‑
烷基化
{
例如
N
α
‑
甲基化
}
等等
[
除了那些相互排斥的组合之外的所有组合
])。10.
一个
(
可选生产的
/
分离的
/
纯化的
/
基本上纯化的
/
部分纯化的
)
多核苷酸，任选地
cDNA
，编码至少一个来自权利要求5‑9中的一项或多项的肽
/
蛋白质序列
,
任选地，其中用于每个氨基酸的一个或多个密码子，任选地所有密码子是在将表达该多核苷酸的至少一个物种的密码子偏倚中最常用于每个氨基酸的密码子
(
或最频繁使用的密码子之一
)
；和
/
或其中多核苷酸包含
(
或由以下组成
)
一种或多种选自
SEQ ID NO:1426
至
SEQ ID NO:1684
的序列
,
或其药物
/
化妆品组合物
。11.
本领域的载体
/
质粒
(
非限制性的，例如脂质体
、
纳米颗粒
、
脂质纳米颗粒
[LNP]
等
)
，或其药物
/
化妆品组合物，包含至少一种权利要求
10
的多核苷酸；一种或多种
(
本领域的
)
载体
/
质粒，每个包含至少一种权利要求
10
的多核苷酸
。12.
包含至少一种权利要求
11
的载体
/
质粒的细胞；一种或多种细胞，每个细胞包含至少一种权利要求
11
的载体
/
质粒；任选地，其中细胞可以是细菌
(
非限制性例如大肠杆菌
)、
酵母
(
非限制性例如酿酒酵母
)、
永生化哺乳动物
(
非限制性例如人
)
细胞系
、
昆虫细胞或其他细胞类型
(s)
用于本领域的重组蛋白表达
。13.
一种从中生产
/
制造蛋白质
/
肽的方法
/
过程索赔5‑9包括在适合表达权利要求
10
的至少一种多核苷酸的条件下培养
(
例如在营养培养基中
/
之上
)
权利要求
12
的一种或多种细胞，并从中回收所述蛋白质
/
肽，任选地通过表位
/
亲和标签序列组分的分离，任选地，其中随后移除该标签，任选地通过将表位
/
亲和标签序列连接到所需肽
/
蛋白质序列的一端，任选地
N
末端，通过被切割的可切割接头序列
。14.
本领域的基因疗法
/
载体或其药物
/
化妆品组合物，其包含至少一种权利要求
10
的多核苷酸
,
可选用于
(
不成比例
)
递送至以下领域的基因疗法
/
载体：
(
我
)
一个或多个皮肤
/
头皮细胞；和
/
或
(
二
)
一只或两只眼睛
/
耳朵；和
/
或
(
三
)
一个或多个大脑区域和
/
或一个或多个脑细胞
/
神经元
/
胶质细胞类型
/
群体；和
/
或
(iv)
细胞群
/
身体区域群，例如脑细胞群
/
脑区群
/
眼细胞群，往往衰老得更快，和
/
或在生命早期失去最佳功能，身体的其他部分
(
在该物种中
)
，可选地，其中这种损失是与年龄相关的疾病
/
病症的驱动力，例如神经退行性疾病
(
例如帕金森氏病
)
，例如与年龄相关的眼病
(s)/
疾病，例如年龄相关性黄斑变性
(AMD)
；任选地，其中基因治疗载体是腺相关病毒
(AAV)
，任选地
AAV9
或
AAV2
；
特别优选的是使用用于
FDA/EMA
批准的基因治疗和
/
或已经通过
I
期临床试验或
/
和以其他方式证明对人类安全的基因治疗载体
。15.
一种转基因生物，优选地
/
限制性地是非人转基因生物，任选地是转基因微生物，任选地是非人转基因哺乳动物，任选地是转基因小鼠，其含有至少一种权利要求
10
的多核苷酸
.16.
至少一种肽
/
蛋白质权利要求5‑9的顺序，和
/
或其至少一种药学上
/
化妆品上可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其本领域的其他载体，和
/
或权利要求
10
的至少一种多核苷酸
[
和
/
或权利要求
11
的至少一种载体
,
和
/
或权利要求
14
的基因疗法，和
/
或权利要求
12
的至少一种细胞，和
/
或权利要求
15
的至少一种转基因生物
]
用于制造药物或药物
/
化妆品组合物；至少一种肽
/
蛋白质权利要求5‑9的顺序，和
/
或其至少一种药学上
/
化妆品上可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其本领域的其他载体，和
/
或权利要求
10
的至少一种多核苷酸
[
和
/
或权利要求
11
的至少一种载体，和
/
或权利要求
14
的至少一种基因疗法，和
/
或至少一种细胞
(s)
权利要求
12
的和
/
或权利要求
15
的至少一种转基因生物
]
在制造药物中的用途治疗
/
改善
/
预防
/
对抗
/
逆转
/
减缓
/
延缓衰老
(
和
/
或延长寿命和
/
或健康寿命
)
，和
/
或衰老和
/
或年龄的不想要
/
不受欢迎的方面
/
迹象
‑
受试者中的相关
(
发病风险随受试者年龄增加
)
障碍
/
疾病
(
例如神经退行性疾病
)
；至少一种肽
/
蛋白质权利要求5‑9的顺序，和
/
或其至少一种药学上
/
化妆品上可接受的盐
、
溶剂化物
、
水合物
、
前药
、
脂质体
、
纳米颗粒
(
例如脂质纳米颗粒
、LNP)
或其本领域的其他载体，和
/
或权利要求
10
的至少一种多核苷酸
[
和
/
或权利要求
11
的至少一种载体，和
/
或权利要求
14
的至少一种基因疗法，和
/
或至少一种细胞
(s)
权利要求
12
的和
/
或权利要求
15
的至少一种转基因生物
]
用于制造药物
/
化妆品
/
补充剂的用途治疗
/
改善
/
预防
/
对抗
/
逆转
/
减缓
/
延缓皮肤
/
头皮老化和
/
或一种或多种皮肤
/
头皮老化
/
光老化迹象
/
与年龄相关的损伤
(
非限制性的，例如外眦纹
(
鱼尾纹
)、
肝斑
/
老年斑
、
皱纹
[
例如面部皱纹
]、
皮肤细纹
(
例如眼睛和
/
或嘴巴周围
)
，表情纹
、
黑眼圈
/
眼袋
、
头发变白
/
脱落等
)
，任选地在用于局部
/
皮肤
/
头皮
/
透皮
(
例如人皮肤
/
头皮
)
给药的本领域的药物
/
化妆品
/
补充剂组合物中，任选地，乳膏
/
乳液
/
喷雾剂
/
凝胶
/
油
/
液体
/
泡沫
/
糊剂
/
气溶胶
/
黄油
/
贴剂
/
化妆品
/
洗发水
/
肥皂
。17.
在亚线粒体粒子
[SMP]
测定中筛选至少一种可抑制
/
减少
F1F0 ATP
水解的
IF1
蛋白片段的方法
F1F0ATP
水解，在碱性
pH
值
(
例如
pH 8)
下，其中内源性
/
天然
IF1
蛋白未被去除，优选地，其中许多不同的
IF1
蛋白片段被系统地测试，优选地通过以下方法中的一种或多种：
(1)
其中测试的第一个
IF1
蛋白片段由
IF1
蛋白
(
非限制性例如
Bos taurus)
的最
C
端
(
最后
)
残基组成，测试的第二个片段由最后两个残基组成，第三个片段由最后一个残基组成三个残基，第四个片段由最后四个残基组成，此测试以这种方式迭代，每次添加一个残基
(
可选择测试直到到达
IF1
蛋白的
N
末端，或在此之前停止，可选择停止一旦达到第
47
或第
42
个残基
[
从
...
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