一种负载姜黄素的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种负载活性成分的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法，包括，将酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉溶解在磷酸盐缓冲液中，室温下搅拌充分溶解后，离心除去不溶性颗粒，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液；将酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液经过加热处理，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液；将姜黄素分散在油相后，将油相与酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液混合，均质形成乳液；将乳液与葡萄糖酸内酯混合，室温下静置，制得所述凝胶

【技术实现步骤摘要】
一种负载姜黄素的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法


[0001]本专利技术属于食品及生物医药领域，具体涉及到一种负载姜黄素的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法
。

技术介绍

[0002]人们越来越关注所消费食品的安全性
、
营养
、
健康和可持续性，对以一种或多种促进健康的成分创造出的功能性性食品感兴趣
。
然而，许多疏水性保健品，如姜黄素，在氧气
、
光和热的存在下会发生化学降解
。
此外，许多疏水性保健品在游离状态下的生物利用度和生物活性较低，并且，乳状液是热力学不稳定的分散体系，容易团聚和破乳，导致上述包裹的药物
、
生物活性物的量及其生物利用度降低
。
[0003]因此，为了在食品加工后保持这些分子的性质，有必要构建更加稳定的食品级递送载体，以保护此类营养食品在储存过程中免受环境降解，并提高其摄入后的生物利用度
。
乳液凝胶因可以为含脂产品提供稳定性和类似固体的功能，也可以用作脂溶性
(
疏水性
)
化合物的载体，在医药和食品工业中应用广泛
。
乳液凝胶作为一种新的复合体系，能够集合乳液和凝胶的优点，即溶解疏水和亲水组分的能力以及良好的热力学稳定性，因此，乳液凝胶可以作为双重控制释放系统，具有很大的研究意义和应用价值
。
[0004]近几十年来，天然的乳化剂如蛋白质和多糖被广泛运用于制备乳液凝胶，与单一的蛋白质或多糖系统相比，蛋白质和多糖的混合物通常在调节乳液稳定性及凝胶质地方面更有效
。
蛋白质和多糖属于不同类别的生物聚合物，在化学结构
、
物理性质和功能上表现出很大的差异
。
因此在蛋白质和多糖的混合物中可以产生更广泛的相行为
。
[0005]另一方面，通过结合蛋白质和多糖的各自优势，可生产出具有多结构和更高营养价值的混合凝胶
。
由于热定型乳液凝胶需要直接加热成型，因而不宜用作热不稳定生物活性剂的载体
。
而以冷固化方法得到的乳液凝胶为载体制备热不稳定生物活性化合物属于比较新颖的研究方向，目前用于药物
、
食品添加剂等方面的凝胶一般都是非变性的，即所谓“冷固化”乳液凝胶
。
冷固化乳液凝胶有用于开发健康食品和药物输送系统的潜力，因为它们是益生菌
、
酶
、
维生素以及挥发性化合物及热敏成分的良好载体
。
卵清蛋白
(OVA)
由于具有良好的凝胶性
、
双亲性
、
营养性和生物学活性等逐渐成为制备递送多种功能性成分的理想载体，在食品及药品领域具有广阔的应用前景
。
[0006]然而，在实际递送载体应用中
OVA
依然存在乳化性
、
稳定性较低的缺陷，其优良性能亦尚未完全被开发利用
。
由于糖基化修饰对蛋白质抗氧化性
、
乳化性
、
抗菌性及凝胶特性等方面的突出作用成为修饰食品蛋白质功能特性最直接且有希望的方法
。
美拉德反应进行蛋白质的糖基化
、
揭示糖基化与功能性质之间的关系的研究很多，但是应用美拉德反应于蛋白质的修饰时，反应过程复杂，除了所希望发生的蛋白质
‑
糖类缩合反应外，还存在其他的副反应，导致食品安全问题
。
[0007]相较于美拉德糖基化反应，基于谷氨酰胺转胺酶
(TGase)
催化的酶促糖基化改性由于其操作简单
、
无有害副产物
、
反应易控
、
效率高等优势成为了蛋白质糖基化改性的理想
手段
。
而作为
TG
酶的反应底物，卵清蛋白与壳寡糖是否也可以通过
TGase
作用进行蛋白质糖基化修饰并制备稳定的冷固化乳液凝胶，目前尚未见有该方面的报道
。

技术实现思路

[0008]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例
。
在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分
、
说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围
。
[0009]鉴于上述和
/
或现有技术中存在的问题，提出了本专利技术
。
[0010]因此，本专利技术的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种负载姜黄素的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法
。
[0011]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：包括，
[0012]将酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉溶解在磷酸盐缓冲液中，室温下搅拌充分溶解后，离心除去不溶性颗粒，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液；
[0013]将酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液经过加热处理，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液；
[0014]将姜黄素分散在油相后，将油相与酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液混合，均质形成乳液；
[0015]将乳液与葡萄糖酸内酯混合，室温下静置，制得所述凝胶
。
[0016]作为本专利技术所述制备方法的一种优选方案，其中：所述酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉，其制备方法包括，
[0017]将卵清蛋白溶解在磷酸缓冲溶液中，然后在
4℃
下静置过夜，制得水化后的卵清蛋白溶液；
[0018]室温条件下，向卵清蛋白溶液加入多糖，混合均匀后，调节
pH
到
7.0
，制得蛋白多糖混合物；
[0019]向蛋白多糖混合物中加入谷氨酰胺转胺酶，在
37℃
下连续搅拌1～
5h
，制得酶促糖基化卵清蛋白
‑
多糖溶液；
[0020]将酶促糖基化卵清蛋白
‑
多糖溶液灭酶处理
、
透析
、
干燥制得酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉
。
[0021]作为本专利技术所述制备方法的一种优选方案，其中：所述水化后的卵清蛋白溶液中卵清蛋白浓度为
10
‑
80mg/mL,
优选
50mg/mL。
[0022]作为本专利技术所述制备方法的一种优选方案，其中：所述向卵清蛋白溶液加入多糖，其中，卵清蛋白与多糖的质量配比为
4:1
～
1:1。
[0023]作为本专利技术所述制备方法的一种优选方案，其中：所述多糖包括壳寡糖
。
[0024]作为本专利技术所述制备方法的一种优选方案，其中：所述向蛋白多糖混合物中加入谷氨酰胺转胺酶，其中，酶添加量为
10...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种负载姜黄素的酶促糖基化修饰蛋白乳液凝胶的制备方法，其特征在于：包括，将酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉溶解在磷酸盐缓冲液中，室温下搅拌充分溶解后，离心除去不溶性颗粒，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液；将酶促糖基化修饰卵清蛋白溶液经过加热处理，制得酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液；将姜黄素分散在油相后，将油相与酶促糖基化修饰卵清蛋白热聚集体溶液混合，均质形成乳液；将乳液与葡萄糖酸内酯混合，室温下静置，制得所述凝胶
。2.
如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉，其制备方法包括，将卵清蛋白溶解在磷酸缓冲溶液中，然后在
4℃
下静置过夜，制得水化后的卵清蛋白溶液；室温条件下，向卵清蛋白溶液加入多糖，混合均匀后，调节
pH
到
7.0
，制得蛋白多糖混合物；向蛋白多糖混合物中加入谷氨酰胺转胺酶，在
37℃
下连续搅拌1～
5h
，制得酶促糖基化卵清蛋白
‑
多糖溶液；将酶促糖基化卵清蛋白
‑
多糖溶液灭酶处理
、
透析
、
干燥制得酶促糖基化修饰卵清蛋白冻干粉
。3.
如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述水化后的卵清蛋白溶液中卵清蛋白浓度为
10
‑
80mg/mL,
优选
50mg/mL。4.
如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述向卵清蛋白溶液加入多糖，其中，卵清蛋白与多糖的质量配比为

【专利技术属性】
技术研发人员：饶胜其，胡欣，伍能建，杨振泉，刘卉，胡文宣，李华前，代佳圆，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：