一种抗体金纳米笼载药系统技术方案

本发明专利技术公开了一种抗体金纳米笼载药系统

【技术实现步骤摘要】
一种抗体金纳米笼载药系统、制备方法和用途


[0001]本专利技术属于纳米药物
，涉及一种抗体金纳米笼载药系统
、
制备方法和用途
。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤严重威胁人类健康，由于肿瘤高度异质性和肿瘤微环境特殊性，使抗肿瘤药物难以在肿瘤病灶富集，无法深层扩散
、
渗透至肿瘤实质发挥作用从而限制其临床疗效
。
利用肿瘤微环境特点，构建靶向性强
、
副作用小并实现多种治疗联合的智能型抗肿瘤纳米药物，具有十分重要的临床意义
。B7
‑
H3
在肿瘤及其相关血管等细胞上特异高表达，是肿瘤治疗的优良靶点
。
金纳米笼
(GNCs)
具有良好的生物相容性
、
表面可修饰性和高效的光热转换效率，中空结构使其成为优质的药物载体
。
纳米药物精准靶向肿瘤部位，光热治疗不仅能杀伤手术难以切除肿瘤细胞，光热
/
化疗协同治疗还能加速药物的细胞内化增强抗肿瘤疗效
。
[0003]光热治疗使肿瘤组织暴露于高温环境下
(41
～
47℃)
，肿瘤细胞由于高温不耐受使其蛋白质变性并且细胞膜被破坏，通过凋亡途径引起细胞死亡
。
此外，许多研究表明，光热治疗不仅具有直接杀灭肿瘤细胞的作用，还可以抑制肿瘤的转移
。
肿瘤局部的光热治疗也诱导肿瘤细胞的免疫原性死亡，该过程受死亡细胞释放的肿瘤抗原和热休克蛋白调控，随后被抗原呈递细胞捕获，激活体内免疫系统，识别和进攻远处转移肿瘤
。
例如，有研究发现对接受静脉注射金纳米壳的黑色素肿瘤模型裸鼠给予光热治疗，肿瘤生长被显著抑制甚至缩小，其未接受关照的皮下种植瘤部位也有
CD4
+
辅助性
T
细胞和
CD8
+
细胞毒
T
细胞浸润
。
但单一光热疗法无法有效的根除肿瘤，这是由于光热治疗可能上调肿瘤细胞内的热休克蛋白
(Heat Shock Proteins
，
HSPs)
，增加癌细胞的热应激耐受性，导致产生的热量不足以杀死肿瘤细胞
。
常将光热疗法联合传统化疗，构建多模式联合治疗体系达到抗癌效果联合增效的目的，还能防止单独使用化疗药物后癌症复发和耐药性等问题
。
光热治疗产生的肿瘤局部高温能够抑制化疗后肿瘤细胞中
DNA
修复酶的活性，扰乱细
DNA
合成和修复，增强化疗药物的细胞毒性
。
另外，局部高温通过引发线粒体功能障碍来抑制
ATP
的生成，抑制多药耐药基因和多药耐药相关蛋白的表达，避免产生肿瘤耐药性
。
此外，还可以提高药物在肿瘤微环境的溶解度并加速热运动，促进药物与细胞
DNA
的交联反应，增强化疗效果
。
[0004]此外，光热疗法产生的肿瘤局部高温能够改善肿瘤微环境的生理条件，对于纳米药物在肿瘤组织的渗透有积极作用
。
当肿瘤加热到
43℃
时
(
通常在肿瘤组织外围
)
，肿瘤血管的血流量可以增加大约两倍，改善新生血管的无效血流现象，引起血管压力升高
。
并且热诱导的细胞骨架损伤引起内皮细胞损伤，使血管间隙开孔进一步扩大，这种变化促使纳米药物从血管渗入肿瘤组织
。
增强的血流灌注还增加肿瘤新生血管和细胞膜的渗透性，促进肿瘤细胞对纳米药物的摄取，使更多的纳米药物穿透到肿瘤中
。
有研究发现将金纳米棒静脉注射到小鼠肉瘤
(S
‑
180)
肿瘤模型中，经过光热治疗对比不同温度下伊文思蓝染料进入肿瘤部位的含量，可观察到当肿瘤温度达到
43℃
或以上时，染料在肿瘤部位的含量增高
(
高
达
1.8
倍
)
，结果说明通过光热作用增加肿瘤部位药物渗透的可行性
。
[0005]现有技术中最接近本专利技术的金纳米符合载体可克服化疗药物突释及单一化疗效果不佳等缺陷，但对肿瘤细胞缺乏主动靶向性
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于针对现有技术中的不足，提供一种可精准靶向肿瘤组织并在肿瘤微环境
pH
响应释放
DOX
化疗药物的金纳米笼载药系统，在金纳米笼表面修饰
B7
‑
H3
抗体片段和智能响应性材料
。
在所述的金纳米笼表面修饰
B7
‑
H3
抗体片段，赋予金纳米笼复合体对肿瘤组织的主动靶向性；通过对其表面
B7
‑
H3
抗体片段的修饰，更好地实现特异性靶向肿瘤组织
。
当纳米药物在肿瘤局部富集
。
在近红外光照射下，金纳米笼因表面等离子体共振效应，将光能转换成热能，导致局部温度急剧升高
(
高温可有效杀伤肿瘤细胞
)
和加速
DOX
药物在肿瘤微环境热疗温度下的脉冲释药
(
肿瘤弱酸性微环境使修饰
DOX
的腙键断裂，并且金纳米笼的高温可加快化疗药物的释放，使其产生药物的脉冲释放
)
，实现光热治疗与化疗的联合治疗作用
。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供一种抗体金纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，
[0008]S1.
合成
LA
‑
DOX
‑
mPEG
，所述功能性
LA
‑
DOX
‑
mPEG
中聚乙二醇的分子量为
1kDa
～
5kDa
；
[0009]S2.
金纳米笼的制备：电化学置换法制备得到粒径为
30
～
200nm
的金纳米笼；
[0010]S3.S1
所得
LA
‑
DOX
‑
mPEG
与
S2
所得金纳米笼溶液反应得到
DOX@GNC
：
[0011]S4.B7
‑
H3
抗体的修饰：将
S3
所得
DOX@GNC
和
HS
‑
PEG
‑
COOH
，抗体反应，得到单克隆抗体金纳米载药系统
。
[0012]进一步，所述
S1
为，
[0013]先制备硫辛酸乙酯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种抗体金纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，
S1.
合成
LA
‑
DOX
‑
mPEG
，所述功能性
LA
‑
DOX
‑
mPEG
中聚乙二醇的分子量为
1kDa
～
5kDa
；
S2.
金纳米笼的制备：电化学置换法制备得到粒径为
30
～
200nm
的金纳米笼；
S3.S1
所得
LA
‑
DOX
‑
mPEG
与
S2
所得金纳米笼溶液反应得到
DOX@GNC
：
S4.B7
‑
H3
抗体的修饰：将
S3
所得
DOX@GNC
和
HS
‑
PEG
‑
COOH
，抗体反应，得到单克隆抗体金纳米载药系统
。2.
如权利要求1所述抗体金纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述
S1
为，先制备硫辛酸乙酯，再将硫辛酸乙酯溶于无水有机溶剂后与水合阱，乙酸乙酯溶液反应，经过萃取干燥离心浓缩分离，得到硫辛酸酰阱
LA
‑
NHNH2；再将其与盐酸多柔比星溶于无水有机溶剂后滴加三氟乙酸反应得到硫辛酸酰多柔比星；聚乙二醇单甲醚和三乙胺分别溶于无水有机溶剂中，滴加含氯甲酸4‑
硝基苯酯的二氯甲烷溶液进行反应，洗涤，分离，得到
mPEG
‑
NPC
；将所得硫辛酸酰多柔比星与
mPEG
‑
NPC
溶于无水二甲基甲酰胺中，加入
TEA
反应，再纯化得到
LA
‑
DOX
‑
mPEG。3.
如权利要求1所述抗体金纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述
S2
为，乙二醇加热后依次加入硫化钠，聚乙烯吡咯烷酮的乙二醇溶液，硝酸银的乙二醇溶液反应，反应结束后洗涤得到银立方体；将聚乙烯吡咯烷酮加入到上述所得银立方体溶液中，再在加热搅拌下加入氯金酸溶液反应，反应结束后离心，洗涤，重悬得到金纳米笼溶液即
GNC
溶液
。4.
如权利要求1所述抗体金纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述
S3
为，
S2
步骤所得的金纳米笼溶液与
mPEG
‑
SH
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈冰，林新华，林基祯，方树彬，
申请(专利权)人：福建医科大学，
类型：发明
国别省市：