ClPR1制造技术

本发明专利技术公开了

【技术实现步骤摘要】
ClPR1蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，特别是涉及
ClPR1
蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用
。

技术介绍

[0002]病毒性病害是农作物病害中一类特殊的病害，传播快
、
防治难，号称“植物癌症”，植物受侵染后主要症状表现为花叶
、
枯斑
、
坏死
、
畸形
、
黄化等
。
近年来随着气候和种植模式的变化，病毒病的发生日趋频繁，严重影响葫芦科作物包括西瓜
、
甜瓜
、
黄瓜等的生产
。
葫芦科作物包括西瓜
、
甜瓜
、
黄瓜等生产中，常见的病毒病害有小西葫芦黄花叶病毒
(ZYMV)
，黄瓜绿斑驳花叶病毒
(CGMMV)
，西瓜花叶病毒
(WMV)
，南瓜蚜传黄化病毒
(CABYV)
等
。
这类病害危害大
、
传播快
、
分布广
、
无特效农药
。
[0003]病程相关蛋白
(pathogenesis
‑
related proteins,PRs)
是植物受病原菌侵染或非生物因子诱导之后产生的一类低分子量水溶性蛋白
。PR
蛋白于
20
世纪
70<br/>年代在感染烟草花叶病毒的烟草中首次被鉴定，之后在其它植物中也先后有报道，这些报道的植物均受到病原性卵菌
、
真菌
、
细菌和病毒的感染
。
其家族中的
PR1
蛋白是植物先天免疫的固有成分，主要参与植物系统获得抗性
(SAR)
反应，在植物防卫反应中起重要作用，但其生化活性和作用模式仍然不清楚，长期以来一直被用作增强抗病性的标志物，是唯一没有功能注释的
PR
蛋白
。
在植物中
PR1
蛋白被证明具有抗真菌病害的作用，如提高小麦对叶锈菌的抗性；提高番茄
、
烟草和马铃薯对致病疫霉菌的抗性；提高棉花对黄萎病的抗性；参与大豆抵抗大豆胞囊线虫的防御反应等
。
然而，在大量关于
PR1
蛋白提高寄主抗病能力的研究报道中，有关该蛋白提高植物病毒病抗性的应用却鲜有报道，葫芦科作物中具有抗病毒病功能的
PR
蛋白还没有报道
。
因此开发具有抗病毒病功能的
PR
蛋白，提高葫芦科作物综合抗病能力对于葫芦科作物病害防治具有重要意义
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供
ClPR1
蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用，以解决上述现有技术存在的问题，
ClPR1
蛋白能够显著提高西瓜
、
甜瓜等葫芦科植物的抗病毒病的能力
。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供
ClPR1
蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用，所述
ClPR1
蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：2所示
。
[0007]本专利技术还提供表达
ClPR1
蛋白的编码基因在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用，所述编码基因的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示
。
[0008]本专利技术还提供包含所述的编码基因的重组载体在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用
。
[0009]本专利技术还提供包含所述的重组载体的宿主菌在提高葫芦科植物抗病毒病方面的
应用
。
[0010]优选的是，过表达所述
ClPR1
蛋白降低葫芦科植物中的病毒含量，提高所述葫芦科植物的抗病毒病的能力
。
[0011]优选的是，所述葫芦科植物包括甜瓜和西瓜
。
[0012]优选的是，所述病毒为马铃薯
Y
病毒属的病毒
。
[0013]优选的是，所述马铃薯
Y
病毒属的病毒包括小西葫芦黄花叶病毒
。
但不限于小西葫芦黄花叶病毒
。
[0014]本专利技术还提供一种提高葫芦科植物抗病毒病的方法，通过将表达
ClPR1
蛋白的编码基因导入葫芦科植物中，过表达所述
ClPR1
蛋白，以提高所述葫芦科植物的抗病毒病的能力；其中，所述
ClPR1
蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：2所示，所述编码基因的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示
。
[0015]优选的是，所述葫芦科植物包括甜瓜和西瓜，所述病毒病包括小西葫芦黄花叶病毒引起的病毒病
。
[0016]本专利技术公开了以下技术效果：
[0017]本专利技术将西瓜抗病蛋白
ClPR1
在葫芦科植物如甜瓜
、
西瓜中过表达，发现可以明显降低甜瓜
、
西瓜中的病毒含量，表明
ClPR1
具有提高寄主抗病毒病的功能，因此，
ClPR1
蛋白及其编码基因可用于农业和生态环境治理所需的抗病毒病植物品种的培育与鉴定，在植物抗病育种领域中具有重要作用
。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图
。
[0019]图1为利用病毒侵染性克隆载体在甜瓜中过表达
ClPR1
基因后
15
天植株表型；图中
Mock
‑
1、OE
‑
eGFP
表示阳性对照，
OE
‑
ClPR1
表示过表达
ClPR1
；
[0020]图2为利用病毒侵染性克隆载体在西瓜中过表达
ClPR1
基因后
15
天植株表型
(a)
及体内病毒含量
(b)
；
Mock
表示阳性对照，
OE
‑
ClPR1
表示过表达
ClPR1
，
Heathy
表示阴性对照；
[0021]图3为利用病毒侵染性克隆载体在甜瓜中过表达
ClPR1
基因...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ClPR1
蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用，其特征在于，所述
ClPR1
蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：2所示
。2.
表达
ClPR1
蛋白的编码基因在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如
SEQ ID NO
：1所示
。3.
包含权利要求2中所述的编码基因的重组载体在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用
。4.
包含权利要求3中所述的重组载体的宿主菌在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用
。5.
如权利要求1‑4任一项所述的应用，其特征在于，过表达所述
ClPR1
蛋白降低葫芦科植物中的病毒含量，提高所述葫芦科植物的抗病毒病的能力
。6.
如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述葫芦科植物包括甜...

【专利技术属性】
技术研发人员：康保珊，古勤生，刘莉铭，
申请(专利权)人：中国农业科学院郑州果树研究所，
类型：发明
国别省市：