一种应用制造技术

一种应用

【技术实现步骤摘要】
一种应用BSA作为荧光探针检测着色剂浓度的方法


[0001]本专利技术涉及食品添加剂浓度检测
，具体涉及一种应用
BSA
作为荧光探针检测着色剂浓度的方法
。

技术介绍

[0002]食品添加剂可以分为天然添加剂和人工合成添加剂，是食品工业根据人为选择添加的一种辅助试剂，可以对食物起到着色
、
保鲜
、
调味等作用
。
但是由于人工合成的添加剂，在食品中的残留会对人体造成严重的危害，有些危害甚至是不可逆的，已经威胁到了人们的身体健康
。
因此对于食品中添加剂的使用具有很严格的标准，对于食品中添加剂的残留剂量也有严格要求
。
尤其是各种着色剂
、
抗氧化剂
、
甜蜜素等化学合成品，其安全性问题一直收到社会各界的广泛关注
。
作为化学合成品，人工食品添加剂可以与人体中的生物成分结合，如与人体中的蛋白质发生反应，或者与
DNA
结合，改变人体生理结构，威胁身体健康，所以对食品添加剂进行定性
、
定量的研究非常有必要
。
目前最常见的光学研究方法主要包括紫外
‑
可见吸收光谱
、
红外吸收光谱等
。
[0003]着色剂属于食品添加剂的一种，此类添加剂在荧光检测中的效果不是十分理想，在着色剂浓度较高的情况下荧光强度也较低，浓度变化较大时荧光强度峰值也会过于离散而重合在一起难以区分，对于实验中直接进行荧光光谱法检测也无法实现
。

技术实现思路

[0004]针对上述着色剂无法直接通过荧光光谱法进行检测得到的技术问题，本技术方案提供了一种应用
BSA
作为荧光探针检测着色剂浓度的方法，利用牛血清白蛋白
(BSA)
溶液荧光强度高
、
荧光检测效果好的特点，利用着色剂与
BSA
反应造成荧光猝灭来推测出相应荧光强度的着色剂浓度，实现对于着色剂浓度的检测；能有效的解决上述问题
。
[0005]本专利技术通过以下技术方案实现：
[0006]一种应用
BSA
作为荧光探针检测着色剂浓度的方法，具体的步骤包括：
[0007]步骤1：配制牛血清白蛋白
BSA
标准溶液和着色剂标准溶液；
[0008]步骤2：取适量着色剂溶液添加到
BSA
标准溶液中，对不同浓度的
BSA
‑
着色剂混合溶液进行荧光检测，获得其光谱特性；具体的操作方式为：
[0009]分别将不同体积的着色剂加入到牛血清白蛋白溶液中，充分混合后配制为不同浓度的
BSA
‑
着色剂混合溶液；应用荧光光谱仪对混合溶液进行荧光检测，获得混合溶液荧光光谱；
[0010]步骤3：对荧光光谱数据进行拟合处理，建立混合溶液荧光强度与着色剂浓度之间的关系模型；具体的操作方式为：
[0011]对荧光光谱数据进行拟合处理并建立关系模型，应用多组
BSA
‑
着色剂混合溶液的光谱数据，建立混合溶液荧光强度与着色剂浓度的拟合关系；
[0012]步骤4：应用关系模型实现着色剂含量的检测；
[0013]将真实测量的荧光强度带入模型计算出检测浓度，然后将检测浓度与真实浓度进行比较
。
[0014]进一步的，步骤1所述的配制牛血清白蛋白
BSA
标准溶液，具体的操作方式为：用电子秤称取适量的牛血清白蛋白固体粉末，用纯水进行充分溶解后，配制成浓度为5×
10
‑7mol/L
的标准溶液
。
[0015]进一步的，步骤1所述的配制着色剂标准溶液是指，具体的操作方式为：用电子秤称量适量的着色剂固体粉末，用纯水进行充分溶解后，配置浓度为
0.2mg/ml
的标准溶液
。
[0016]进一步的，步骤2所述的荧光光谱仪为荧光分光光度计
LS55
，设置发射波长的扫描范围为
200
～
600nm
，狭缝宽度
10.0nm
，扫描速度
1000nm/min
，激发波长为
280nm。
[0017]进一步的，步骤3所述的对荧光光谱数据进行拟合处理包括至采用
Savitzky
‑
Golay
滤波器对数据中的荧光强度进行平滑处理
。
[0018]Savitzky
‑
Golay
滤波器是一种数字滤波器，可以应用于一组数据，以平滑数据，能够在不改变信号趋势
、
宽度的情况下提高数据的精度
。
[0019]Savitzky
‑
Golay
滤波器通过卷积的过程实现，即通过线性最小二乘法将相邻数据点的连续子集与一个低次多项式拟合
。
[0020]Savitzky
‑
Golay
滤波器的优点是，在同一段曲线上，任意位置可以任意选取不同的窗宽，满足不同平滑滤波的需要；尤其是处理时序数据时，对于不同阶段的序列处理优势明显
。
原理如下：考虑一组以
n
＝0为中心的
(2M+1)
个数据
x[n]，利用多项式对其拟合：
[0021][0022]得到最小二乘拟合残差为：
[0023][0024]利用卷积运算可以求取拟合多项式的常数项，即对输入数据进行加权平均：
[0025][0026]由微积分知识可知，若要
ε
最小，
ε
对各个参数的偏导数都应为0，即：
[0027][0028]式中：
i
＝0，1，
…
，
N
，化简得到：
[0029][0030]引入一个
(2M+1)
行
、(N+1)
列的辅助矩阵
A
，令：
[0031]A
＝
{a
n
,i}
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(1
‑
6)
；
[0032]式中：
a
n
,i
＝
n
i
，
‑
M≤n≤M
，
0≤i≤N。
引入另一个辅助矩阵
B
，使得：
[0033]B
＝
A
T
gA
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
(1
‑
7)
；
[0034]经计算可得：...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种应用
BSA
作为荧光探针检测着色剂浓度的方法，其特征在于，具体的步骤包括：步骤1：配制牛血清白蛋白
BSA
标准溶液和着色剂标准溶液；步骤2：取适量着色剂溶液添加到
BSA
标准溶液中，对不同浓度的
BSA
‑
着色剂混合溶液进行荧光检测，获得其光谱特性；具体的操作方式为：分别将不同体积的着色剂加入到牛血清白蛋白溶液中，充分混合后配制为不同浓度的
BSA
‑
着色剂混合溶液；应用荧光光谱仪对混合溶液进行荧光检测，获得混合溶液荧光光谱；步骤3：对荧光光谱数据进行拟合处理，建立混合溶液荧光强度与着色剂浓度之间的关系模型；具体的操作方式为：对荧光光谱数据进行拟合处理并建立关系模型，应用多组
BSA
‑
着色剂混合溶液的光谱数据，建立混合溶液荧光强度与着色剂浓度的拟合关系；步骤4：应用关系模型实现着色剂含量的检测；将真实测量的荧光强度带入模型计算出检测浓度，然后将检测浓度与真实浓度进行比较
。2.
根据权利要求1所述的一种应用
BSA
作为荧光探针检测着色剂浓度的方法，其特征在于：步骤1所述的配制牛血清白蛋白
BSA
标准溶液，具体的操作方式为：用电子秤称...

【专利技术属性】
技术研发人员：季仁东，王徐阳，王晓燕，陈旭，胡文静，陈会昌，何莹，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：