高血糖家蚕模型的建立方法及应用技术

本发明专利技术涉及高血糖家蚕模型的建立方法及应用，其包括如下步骤：A、动物选择：选择家蚕幼虫作为建立高血糖模型的对象；B、制备高糖饲料：利用普通的家蚕饲料添加高浓度的糖，制备得到高糖饲料；C、模型建立：给家蚕饲喂所述高糖饲料1～3天。还公开了本申请的方法所建立的高血糖家蚕模型的应用。本申请中的模型建立方法，以家蚕幼虫作为建立高血糖模型的对象，通过向普通饲料中添加高浓度的糖，能够迅速诱导家蚕的高血糖，使家蚕血淋巴中的葡萄糖浓度显著升高；同时，相较于其他常见动物模型，具有成本低，饲养简单，造模周期短，模型稳定等优点，可用于大规模快速筛选降血糖新药物，且能够用于探究糖尿病及其药物的相关机制。于探究糖尿病及其药物的相关机制。于探究糖尿病及其药物的相关机制。

【技术实现步骤摘要】
高血糖家蚕模型的建立方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及高血糖家蚕模型的建立方法及应用。

技术介绍

[0002][0003]糖尿病是由遗传和环境等多因素引起，是机体内胰岛素分泌缺陷或/和胰岛素抵抗而导致的糖、脂、蛋白质代谢紊乱的一种慢性内分泌代谢疾病，其中II型糖尿病占90
‑
95％，后期会导致一系列严重的并发症。由于糖尿病发病机制复杂，探究其发病机理一直是科研工作者及医疗人员的研究热点。另外，传统的糖尿病药物(如双胍类、磺酰脲类)长期服用具有一定的副作用，因此，寻找更加天然、安全、无副作用的药物是另一研究热点。常见的研究糖尿病以及筛选糖尿病药物的模型为大小鼠模型，虽然这些模型能够模拟人的糖尿病，且可用于筛选抗糖尿病的药物，但是成本较高，饲养周期较长，操作较复杂。
[0004]为了解决上述问题，本专利技术提供了高血糖家蚕模型的建立方法及应用。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供了高血糖家蚕模型的建立方法，以解决现有动物模型存在的成本高、周期长等问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]高血糖家蚕模型的建立方法，其步骤如下：
[0008]A、动物选择：选择家蚕幼虫作为建立高血糖家蚕模型的对象；
[0009]B、高糖饲料的制备：向家蚕的普通饲料中加入高浓度的糖，制备得到高糖饲料；
[0010]C、模型建立：给家蚕饲喂高糖饲料。
[0011]进一步的，在所述动物选择步骤中，所选家蚕为3
‑
5龄的幼虫，优选为5龄的家蚕。
[0012]进一步的，所述高糖饲料为饲料一，所述饲料一为家蚕的普通人工饲料添加10w/w％～15w/w％的蔗糖。
[0013]进一步的，所述高糖饲料为饲料二，所述饲料二为家蚕的普通人工饲料添加10w/w％～15w/w％的葡萄糖。
[0014]进一步的，所述高糖饲料为饲料三，所述饲料三为桑叶添加10w/w％～15w/w％的蔗糖。
[0015]进一步的，所述高糖饲料为饲料四，所述饲料四为桑叶添加10w/w％～15w/w％的葡萄糖。
[0016]进一步的，在建立模型时，家蚕培养于温度为24
±
1℃，湿度为65％～70％的培养箱中。
[0017]进一步的，给所述家蚕饲喂所述高糖饲料的时间为1～3天，用以建立高血糖家蚕模型。
[0018]高血糖家蚕模型在筛选与评价降血糖药物中的应用，所述筛选与评价降血糖药物
℃，湿度70％～80％，光周期(明/暗)：12h/12h。1和2龄各饲喂1次，3和4龄各饲喂2次。
[0038](3)动物分组及实验设计
[0039]选取5龄第1天的蚕，分成3组：对照组(n＝100)，10％蔗糖组(n＝100)，15％蔗糖组(n＝10)。对照组饲喂普通的人工饲料，10％蔗糖组饲喂含10％蔗糖的人工饲料，15％蔗糖组饲喂含15％蔗糖的人工饲料。对照组和10％蔗糖组分别于0h，3h，6h，18h，24h，72h时，各取10头家蚕，15％蔗糖组则只在6h时取10头家蚕，用罗氏血糖仪检测各组家蚕血淋巴中葡萄糖水平，判断家蚕高血糖模型是否构建成功，当家蚕餐后的血糖值大于11.1则说明家蚕的高血糖模型构建成功，如果家蚕餐后的血糖值低于11.1，则选用新的家蚕，调整蔗糖的浓度继续上述过程进行饲喂，直至家蚕的高血糖模型构建成功。
[0040](4)实验结果
[0041]各组家蚕在不同时间点的血淋巴中平均葡萄糖浓度如图1所示，在饲喂含10％蔗糖的人工饲料3h时，家蚕血淋巴葡萄糖水平显著增加为11.3mmol/L，且在72h之内能够一直维持这种高水平的葡萄糖浓度；而饲喂普通人工饲料的家蚕，其葡萄糖浓度仅为1.1mmol/L，且在72h之内一直保持这种低水平。如图2所示，含15％蔗糖的人工饲料饲喂家蚕时，家蚕血淋巴中葡萄糖水平能够达到18.8mmol/L。以上数据表明含10％～15％高浓度蔗糖的人工饲料能够成功构建家蚕高血糖模型。
[0042]实施例2：以高浓度的葡萄糖人工饲料构建高血糖家蚕模型
[0043](1)实验前期准备与实验设计
[0044]含10％葡萄糖人工饲料的制备方法与实施例1中含10％蔗糖人工饲料制备方法相同；家蚕饲养方法及动物分组和实验设计也与实施例1中相同。
[0045](2)实验结果
[0046]如图3所示，在饲喂含10％葡萄糖的人工饲料3h时，家蚕血淋巴葡萄糖水平显著增加为23.7mmol/L，且在72h之内能够一直维持这种高水平的葡萄糖浓度。以上数据表明含高浓度葡萄糖的人工饲料也能够成功构建家蚕高血糖模型。
[0047]实施例3：向桑叶中添加高浓度的葡萄糖或蔗糖构建高血糖家蚕模型
[0048](1)实验前期准备
[0049]含10％蔗糖的桑叶的制备：用去离子水配置50％(w/v)的蔗糖溶液，取新鲜去掉叶柄的桑叶10g，向桑叶表面均匀喷涂50％(w/v)的蔗糖溶液2ml，晾干备用。
[0050]含10％葡萄糖的桑叶的制备：制备方法与含10％蔗糖桑叶的方法相同。
[0051]对照组桑叶的制备：取新鲜去掉叶柄的桑叶10g，向桑叶表面均匀喷涂去离子水2ml，晾干备用。
[0052](2)家蚕饲养
[0053]以新鲜采摘桑叶饲养家蚕至4龄眠起，饲养条件为温度25
±
1℃，湿度为70％～80％，光周期(明/暗)：12h/12h。每天饲喂3次新鲜桑叶。
[0054](3)动物分组及实验设计
[0055]选取5龄第1天的蚕，分成3组：对照组(n＝10)，10％蔗糖组(n＝10)，10％葡萄糖组(n＝10)。对照组饲喂桑叶，10％蔗糖组饲喂含10％蔗糖的桑叶，10％葡萄糖组饲喂含10％葡萄糖的桑叶。于6h时分别取各组的10头家蚕，用罗氏血糖仪检测各组家蚕血淋巴中葡萄糖水平，判断家蚕高血糖模型是否构建成功，当家蚕餐后的血糖值大于11.1则说明家蚕的
高血糖模型构建成功，如果家蚕餐后的血糖值低于11.1，则选用新的家蚕，调整蔗糖的浓度继续上述过程进行饲喂，直至家蚕的高血糖模型构建成功。
[0056](4)实验结果
[0057]如图4所示，只饲喂桑叶的对照组家蚕血淋巴中葡萄糖浓度为4.4mmol/L，而饲喂含10％蔗糖或10％葡萄糖桑叶组的家蚕，其血淋巴中葡萄糖浓度均显著高于对照组，分别为14.2mmol/L和24.8mmol/L。以上数据表明用添加高浓度的葡萄糖或者蔗糖的桑叶也可作为家蚕的饲料构建高血糖家蚕模型。
[0058]实施例4：以添加10％蔗糖的桑叶所构建的高血糖家蚕模型验证II型糖尿病药物阿卡波糖的降血糖效果
[0059](1)实验前期准备
[0060]含10％蔗糖的桑叶的制备：用去离子水配置50％(w/v)的蔗糖溶液，取新鲜去掉叶柄的桑叶10g，向桑叶表面均匀喷涂50％(w/v)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.高血糖家蚕模型的建立方法，其特征在于：其步骤如下：A、动物选择：选择家蚕幼虫作为建立高血糖家蚕模型的对象；B、高糖饲料的制备：向家蚕的普通饲料中加入高浓度的糖，制备得到高糖饲料；C、模型建立：给家蚕饲喂高糖饲料。2.根据权利要求1所述的高血糖家蚕模型的建立方法，其特征在于：在步骤A中，所选家蚕为3
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5龄的幼虫，优选为5龄的家蚕。3.根据权利要求2所述的高血糖家蚕模型的建立方法，其特征在于：在步骤B中，普通人工饲料中添加10w/w％～15w/w％的蔗糖为饲料一。4.根据权利要求2所述的高血糖家蚕模型的建立方法，其特征在于：在步骤B中，普通人工饲料中添加10w/w％～15w/w％的葡萄糖为饲料二。5.根据权利要求2所述的高血糖家蚕模型的建立方法，其特征在于：在步骤B中，在桑叶上添加10w/w％～15w/w％的蔗糖为饲料三。6.根据权利要求2所述的高...

【专利技术属性】
技术研发人员：代方银，童晓玲，曾珠，宋润润，杨怡，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：