NfADH1制造技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体提供

【技术实现步骤摘要】
NfADH1抗逆基因及其编码氨基酸序列在提高大肠杆菌渗透胁迫耐受性中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及
NfADH1
抗逆基因及其编码氨基酸序列在提高大肠杆菌渗透胁迫耐受性中的应用
。

技术介绍

[0002]发状念珠藻
(Nostoc flagelliforme)
主要分布在北半球的干旱或半干旱的荒漠地区，经常受到极度干旱
、
较大温差
、
高浓度盐碱
、
营养缺乏
、UV
‑
B
辐射等非生物因素的胁迫
。
胁迫因子可能会对细胞产生一系列的损伤，包括核酸损伤
、
蛋白质损伤
、
膜脂损伤等，从而扰乱正常的细胞代谢
。
经过长期的环境选择和自身结构功能的适应，发状念珠藻已经进化出一系列的生理生态和分子的机制来抵抗各种逆境
。
因此，发状念珠藻已经成为研究逆境适应机制和发掘抗逆基因的最佳材料之一
。
[0003]大肠杆菌的遗传背景清楚，目标基因表达水平高，表达系统成熟完善，并且培养方法简单
、
生长快
、
培养周期短
、
抗污染能力强
、
成本低，因此大肠杆菌常作为基因功能研究的模式微生物
。
乙醇脱氢酶
(alcohol dehydrogenase
，
ADH)
是一种重要的含锌酶，是脱氢酶
/
还原酶
(Dehydrogenase/reductase
，
MDR)
蛋白基因超家族成员之一
。ADH
基因广泛存在于各种物种中，包括原核生物
、
真菌
、
植物和动物
。1971
年，
Schwartz
首次报道了玉米内核和花药中
ADH
酶的活性
。
近年来，科研工作者研究了在正常和各种胁迫处理条件下
ADH
酶的活性以及基因的表达
。ADH
酶在植物抵抗涝害
、
冷害
、
干旱等胁迫环境中起着非常重要的作用
。
[0004]水稻是重要的粮食作物之一，其生产需要大量消耗淡水资源，提高水稻等农作物的节水抗旱性能，是保障粮食安全和生态安全，保障农业可持续发展的重大需求
。
目前转基因技术已被广泛应用到抗旱水稻的培育中，所采用的策略就是在水稻中表达干旱诱导或抗旱相关基因
。
因此，对发状念珠藻抗逆基因的克隆和挖掘，并应用在生物基因工程上具有非常重要意义
。

技术实现思路

[0005]本专利技术发现一种来源于发状念珠藻的
NfADH1
抗逆基因，基于发状念珠藻失水胁迫转录得到，其在失水胁迫下表达量明显上升
(
图
2)。
鉴于此，本专利技术的目的是提供
NfADH1
抗逆基因在提高渗透胁迫耐受性及抗旱性中的应用
。
[0006]本专利技术的上述目的通过以下技术方案实现：
[0007]第一方面，本专利技术提供
NfADH1
抗逆基因在增强微生物渗透胁迫耐受能力中的应用，所述
NfADH1
抗逆基因的核苷酸序列为以下任一所示：
[0008](1)
如
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列及其互补序列；
[0009](2)
所述的核苷酸序列为如
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列经取代
、
缺失和
/
或增加一个或多个核苷酸，表达相同功能的蛋白质的核苷酸序列；
[0010](3)
所述
NfADH1
抗逆基因的核苷酸序列为在严格条件下与
SEQ ID NO.1
所示序列
杂交的核苷酸序列；
[0011](4)
与
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列具有至少
85
％
、90
％
、91
％
、92
％
、93
％
、94
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％同一性的序列，其编码蛋白具有调控微生物渗透胁迫耐受能力的功能
。
[0012]本专利技术所提供的
NfADH1
抗逆基因及其编码氨基酸在提高大肠杆菌渗透胁迫耐受性中的应用，所述
NfADH1
抗逆基因编码蛋白的氨基酸序列为以下任一所示：
[0013]1)SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列；
[0014]2)
与
SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列具有至少
85
％
、90
％
、91
％
、92
％
、93
％
、94
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％同一性的氨基酸序列，且具有调控大肠杆菌渗透胁迫耐受能力的功能；或
[0015]3)
在
SEQ ID NO.2
所示的序列中取代和
/
或缺失和
/
或增加一个或多个氨基酸残基所得的具有调控微生物渗透胁迫耐受能力的氨基酸序列
。
[0016]本专利技术所提供的
NfADH1
抗逆基因及其编码氨基酸在提高大肠杆菌渗透胁迫耐受性中的应用，所述微生物为大肠杆菌，所述渗透胁迫为失水胁迫
。
更具体地，
NfADH1
抗逆基因，来源于发状念珠藻，其核苷酸序列如
SEQ ID NO.1
所示，序列长度为
1170bp
，具体为：
[0017]ATGAAAGCAGTTTGCTGGAACGGTGCTAATGATGTGCGGGTACAGTCGGTACCAGATCCGACAATTCTTAACCCGCGTGATGCGATTATTAAAATTACTTCCACGGCGATTTGTGGCTCTGATCTACATATATATGGCGGCTATATTCCCACAGTGCAACAGGGTGACATTATCGGTCACGAATTCATGGGGGAAGTCGTGGAAGTTGGTAAGGGAGTCAACAATTTAAAAATAGGCGATCGCGTTGTTGTTCCTTCCACAATTGGTTGTGGTAA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.NfADH1
抗逆基因在增强微生物渗透胁迫耐受能力中的应用，其特征在于，所述
NfADH1
抗逆基因的核苷酸序列为以下任一所示：
(1)
如
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列及其互补序列；
(2)
所述的核苷酸序列为如
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列经取代
、
缺失和
/
或增加一个或多个核苷酸，表达相同功能的蛋白质的核苷酸序列；
(3)
所述
NfADH1
抗逆基因的核苷酸序列为在严格条件下与
SEQ ID NO.1
所示序列杂交的核苷酸序列；
(4)
与
SEQ ID NO.1
所示的核苷酸序列具有至少
85
％
、90
％
、91
％
、92
％
、93
％
、94
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％同一性的序列，其编码蛋白具有调控微生物渗透胁迫耐受能力的功能
。2.
根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述
NfADH1
抗逆基因编码蛋白的氨基酸序列为以下任一所示：
1)SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列；
2)
与
SEQ ID NO.2
所示的氨基酸序列具有至少
85
％
、90
％
、91
％
、92
％
、93
％
、94
％
、95
％
、96
％
、97
％
、98
％
、99
％同一性的氨基酸序列，且具有调控大肠杆菌渗透胁迫耐受能力的...

【专利技术属性】
技术研发人员：高宁宁，刘灶长，叶水烽，罗利军，
申请(专利权)人：上海市农业生物基因中心，
类型：发明
国别省市：