钩藤生物碱单体及制备方法和用途，其制备方法的步骤为：将钩藤药材粉碎成粉末状。第一次采用药材质量５～８倍的比例加入９５％醇热回流提取２～３ｈ；第二次按照药材质量２～５倍的比例加入９５％醇热回流提取１～２ｈ。两次的提取液合并浓缩至干，加适量水溶解，用４Ｍ的浓盐酸调ｐＨ值到１～２，静置１２～１６ｈ后抽滤。滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调ｐＨ值到９～１１，然后用中极性有机溶剂萃取２～４次，萃取液合并浓缩至干，得到钩藤总生物碱提取物；钩藤总生物碱通过ＭＣＩ－ｇｅｌ柱层析甲醇－水梯度洗脱，其梯度分别为：５０％，６０％，７０％，８０％，９０％，１００％，收集８０％和９０％甲醇－水洗脱部分，浓缩至干，加丙酮溶解后，重结晶得到钩藤生物碱单体；其用途能够作为强的乙酰胆碱酯酶抑制剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物碱单体的制备以及用途。
技术介绍
阿尔茨海默病(Alzheimer disease，即老年性痴呆，简称AD)是一种慢性进行性 脑变性疾病，临床上以认知功能减退为核心症状。AD的发病率与年龄呈正相关，是老年痴 呆的主要类型。近年来，国内外临床研究表明，乙酰胆碱酯酶抑制剂是治疗AD最有效的药 物，另外对青光眼、重症肌无力、肠梗阻等症的治疗也有较好的作用(金有豫.药理学(第 五版)，2001 ； 54-55.)。早期神经化学研究表明，AD患者脑部乙酰胆碱明显缺乏，脑组织中胆碱乙酰转移 酶活性降低，乙酰胆碱合成减少，造成突触前胆碱能神经元明显退化。乙酰胆碱酯酶抑制剂 与乙酰胆碱酯酶结合，使酶失去活性，内源性的乙酰胆碱大量堆积，脑内神经突触间乙酰胆 碱的含量增加，从而发挥治疗AD的作用。钩藤(Uncaria rhynchophylla(Miq. )Jacks.)为茜草科(Rubiaceae)钩藤 属(Uncaria)植物，主要有效成分为生物碱，如钩藤碱(rhynchophyl 1 ine)、异钩藤碱 (isorhynchophylline)等。钩藤为中医常用药，具有清热平肝，息风定惊，降血压之功效 (杨成金.云南植物研究，1995，17 =209-214.)。但到目前为止，尚未见钩藤生物碱单体成 分geissoschizine methyl ether关于乙酰胆碱酯酶抑制活性的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供钩藤生物碱单体单体及制备方法和用途.本专利技术是钩藤生物碱单体及制备方法和用途，钩藤生物碱单体的化学结构为<formula>formula see original document page 4</formula>钩藤生物碱单体的制备方法，其步骤为将钩藤药材粉碎成粉末状。第一次采用药 材质量5 8倍的比例加入95%醇热回流提取2 3h ；第二次按照药材质量2 5倍的 比例加入95%醇热回流提取1 2h。两次的提取液合并浓缩至干，加适量水溶解，用4M的 浓盐酸调PH值到1 2，静置12 16h后抽滤。滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH值 到9 11，然后用中极性有机溶剂萃取2 4次，萃取液合并浓缩至干，得到钩藤总生物碱 提取物；钩藤总生物碱通过MCI-gel柱层析甲醇-水梯度洗脱，其梯度分别为50%，60%， 70 %，80 %，90 %，100 %，收集80 %和90 %甲醇-水洗脱部分，浓缩至干，加丙酮溶解后，重 结晶得到钩藤生物碱单体。钩藤生物碱单体的用途，能够作为强的乙酰胆碱酯酶抑制剂。本专利技术的钩藤生物碱单体成分geissoschizine methyl ether的结构鉴定如下无色棱状结晶(丙酮)，mp 190-192°C。Dragendorff试剂显橙红色。ESI-MSm/ z :367 +。i-WR(600MHz，CDC13) 8 ppm 55 (3H, d, J = 7. 2Hz, H-18)，1. 87 (1H, ddd. J = 12. 0,5. 0,2. 4Hz, H-14a) ,2. 33 (1H, ddd. J = 12. 0，12. 0,2. 4Hz, H_14b)，2. 64 (1H, m, H-5a)，2. 72 (1H, br d, J = 15. 0Hz, H_6a) 2. 97 (1H, m, H_6b)，3. 06 (1H, m, H_5b)，3. 15 (1H, br d, J = 12. 0Hz, H_21a)，3. 42 (1H, d, J = 12. 0Hz, H_21b)，3. 49 (1H, Br d, J = 12. 0Hz, H-3)，3. 70 (1H, d, J = 12. 0Hz, H—15)，3. 73 (3H, s, _C00CH3)，3. 80 (3H, s_0CH3)，5. 42 (1H, q, J = 7. 2Hz, H-19)，7. 06 (1H, dt, J = 7. 8，1. 2Hz, H_10)，7. 10 (1H, dt, J = 7. 8，1. 2Hz, H-ll)，7. 26 (1H, dt, J = 7. 8，1. 2Hz, H-12)，7. 35 (1H, s, H-17)，7. 46 (1H, dt, J = 7. 8， 1. 2Hz, H-9) ,7. 92 (1H, s, _NH)。13C_NMR(125MHz，CDC13) 8 ppm 134. 0 (C-2), 58. 7 (C3), 51. 4 (C5) ,21. 4 (C6)，108. 2 (C7)，127. 3 (C8), 118. 1 (C9) ,119. 2 (C10)，120. 4 (Cn), 110. 7 (C12)， 136. 0(C13) ,34. 2(C14) ,36. 4 (C15) ,112. 5 (C16)，159. 6 (C17)，13. 0 (C18)，121. 1 (C19)， 134. 9 (C20)，64. 5 (C21)，168. 7 (_C00CH3) ,51. 4 (C00CH3) ,61. 7 (C17_0Me)，以上光谱数据与文 献(H. Takayama et al. Tetrahedron Letters, 1992,33(45) :6831_6834)完全一致。所以 该钩藤生物碱单体成分鉴定为geissoschizine methyl ether。本专利技术采用改良的Ellman方法(EllmanG. L. . Biochemical Pharmacology, 1961 ； 7 :88-95)，研究了钩藤生物碱单体成分geissoschizine methyl ether的抗乙酰胆碱酯 酶活性，并且研究了对东莨菪碱诱导的痴呆小鼠的学习记忆能力的影响(姜红柳.中国药 理学通报，2008 ；24(10) =1399-1400) ο结果显示，钩藤生物碱单体成分geissoschizine methyl ether是良好的天然乙酰胆碱酯酶抑制剂；能明显改善痴呆小鼠的学习记忆能力。 与药学上可以接受的载体或其它赋型剂相结合，按照常规方法制成经口服给药的内用型和 非口服给药的注射剂或其它剂型，可以在临床上用于开发抗乙酰胆碱酯酶活性药物与治疗 神经退行性疾病(阿尔茨海默病等)。具体实施例方式本专利技术是钩藤生物碱单体及制备方法和用途，钩藤生物碱单体的化学结构为<formula>formula see original document page 5</formula>geissoschizine methyl ether钩藤生物碱单体的制备方法，其步骤为将钩藤药材粉碎成粉末状。第一次采用药 材质量5 8倍的比例加入95%醇热回流提取2 3h ；第二次按照药材质量2 5倍的 比例加入95%醇热回流提取1 2h。两次的提取液合并浓缩至干，加适量水溶解，用4M的 浓盐酸调PH值到1 2，静置12 16h后抽滤。滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH值 到9 11，然后用中极性有机溶剂萃取2 4次，萃取液合并浓缩至干，得到钩藤总生物碱 提取物；钩藤总生物碱通过本文档来自技高网...
【技术保护点】
钩藤生物碱单体，其化学结构为：＊＊＊ｇｅｉｓｓｏｓｃｈｉｚｉｎｅｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨中铎，段东柱，杨明俊，任晋，张东博，
申请(专利权)人：兰州理工大学，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。