【技术实现步骤摘要】
and 5'UTR
‑
intron editing improves grain quality in rice.Plant Biotechnol J,2020,18(12):2385
‑
2387)。
但是，鲜有通过生物钟基因对水稻优良亲本进行重要育种价值的抗逆性
、
产量等基因编辑改良的报道
。
本专利技术通过基因编辑和改造，可用于水稻缩短生育期的精准育种
。
技术实现思路
[0004]针对现有技术中的上述技术问题，本专利技术提供了一种水稻生物钟基因
OsPRR37
启动子区引导
RNA
双靶点序列及其应用，所述的这种水稻生物钟基因
OsPRR37
启动子区引导
RNA
双靶点序列及其提供解决现有技术中的缩短水稻生长周期的新方法
。
[0005]本专利技术提供了一种水稻基因
OsPRR37
启动子双靶点引导
RNA
序列，所述的核苷酸序列为：
[0006]37T7:5
’‑
GACGTGGAACAAATGGAAGTGGG
‑3’
(SEQ ID NO.9)
[0007]37T8:5
’‑
ATATCTAGTAGCAGTAGCAGCGG
‑3’
(SEQ ID NO.10)。
[0008]本专利技术还提供了一种水稻生物钟基因
OsPRR37
，其核
【技术保护点】
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.
一种水稻生物钟基因
OsPRR37
启动子区引导
RNA
双靶点序列，其特征在于，所述的核苷酸序列为：
37T7:5
’‑
GACGTGGAACAAATGGAAGTGGG
‑3’
37T8:5
’‑
ATATCTAGTAGCAGTAGCAGCGG
‑3’
。2.
一种水稻生物钟基因
OsPRR37
，其核苷酸序列如
SEQ ID NO.2
所示
。3.
权利要求2所述的一种水稻生物钟基因
OsPRR37
的制备方法，其特征在于：利用
PCR
扩增的方法构建含有权利要求1所述的引导
RNA
靶点序列的
sgRNA
表达盒；将两个
sgRNA
表达盒装载到同一个
CRISPR/Cas9
载体上，得到含双靶点序列的
CRISPR/Cas9
‑
sgRNA
载体；将携带两个靶点
CRISPR/Cas9
‑
sgRNA
载体转化水稻愈伤组织，得到水稻生物钟基因
OsPRR37
启动子区域发生片段缺失的突变体，即权利要求2所述的一种水稻生物钟基因
OsPRR37。4.
一种用于检测水稻基因
OsPRR37
启动子双靶点编辑产生片段缺失突变体
T78Pm
的分子标记，其特征在于，所述的水稻突变体
T78Pm
的分子标记的正反向引物的核苷酸序列为：
37Pm
‑
1F:5
’‑
ctcggggagcgcaagggagc
‑3’
37Pm
‑
1R:5
’‑
aggcggaagcgagtaatcgg
‑3’
37Pm
‑
2F:5
’‑
gcgctccccactcagcggag
‑3’
技术研发人员：余舜武，王玉岚，杨访问，吴金红，罗利军，
申请(专利权)人：上海市农业生物基因中心，
类型：发明
国别省市：
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