鸡骨香提取物及其制备方法和在制备具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用的产品中的应用技术

本发明专利技术公开了一种鸡骨香提取物及其制备方法和在制备具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用的产品中的应用。所述的鸡骨香提取物的制备方法，其包含如下步骤：(1)取中药材鸡骨香，用乙醇进行提取得提取液，将提取液去除溶剂得鸡骨香粗提物；(2)将鸡骨香粗提物以乙醇为流动相进行大孔树脂柱层析，收集洗脱液去除溶剂后得鸡骨香提取物。所述的鸡骨香提取物具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用；因此，将本发明专利技术所述方法制备得到的鸡骨香提取物用于制备具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用的产品；用于制备具有治疗线粒体疾病的产品；用于制备具有治疗神经退行性疾病作用的产品，具有重要的应用价值。有重要的应用价值。有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
鸡骨香提取物及其制备方法和在制备具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用的产品中的应用


[0001]本专利技术涉及天然药物化学
，具体涉及一种鸡骨香提取物及其制备方法和在制备具有促进线粒体自噬和/或改善记忆作用的产品中的应用。

技术介绍

[0002]线粒体是细胞的动力源，通过呼吸氧化链、脂肪酸氧化与三羧酸循环的氧化磷酸化持续供给ATP并维持细胞的基本代谢。作为半自主细胞器，线粒体DNA可自主复制、转录、翻译线粒体蛋白。同时，线粒体在维持钙稳态，产生和清除氧化剂，隔离促凋亡蛋白、维持细胞存活等方面也发挥作用。因此，线粒体对调控细胞能量稳定、维持细胞功能起着十分重要的作用。在应激条件下，ATP合成被打断，线粒体受损、功能紊乱，产生过量的活性氧和相关蛋白，激活细胞死亡通路。线粒体是一类高度动态的细胞器，在正常情况下，它的形态始终处于融合和分裂的动态平衡中。然而，损伤的线粒体如果没有得到有效的清除，会引发一系列线粒体相关的疾病，比如神经退行性疾病(帕金森病、阿尔茨海默病和亨廷顿病等)、癌症、免疫，甚至老化过程。一方面损伤的线粒体释放促凋亡因子，诱导细胞进入凋亡；另一方面，损伤的线粒体通过自噬自我清除，即线粒体自噬(mitophagy)，维持细胞的存活。
[0003]线粒体自噬是指细胞通过自噬的机制选择性地清除线粒体的过程，对于整个线粒体网络的功能完整性十分关键，决定细胞的生存和死亡。以细胞生物学为基础将线粒体自噬分为三个类型：一型线粒体自噬是在营养缺乏的条件下，前自噬小泡形成杯状的吞噬泡，逐渐包裹和隔离个别线粒体，包裹后随着线粒体外膜去极化，线粒体自噬小泡外膜被酸化，最终在溶酶体中被水解，常需要磷脂酰肌醇
‑3‑
激酶(phosphatidylinositol
‑3‑
Kinase,PI3K)参与并与线粒体分裂紧密相关。二型线粒体自噬是受损线粒体在线粒体外膜与包含LC
‑
3的自噬体结合，发生线粒体去极化，囊泡被酸化降解，不需PI3K的参与，不发生线粒体分裂，也不形成吞噬泡。三型线粒体自噬，也被称为微线粒体自噬，与线粒体衍生囊泡(Mitochondria
‑
derived vesicles,MDVs)形成有关，被氧化的线粒体蛋白通过出芽的方式形成线粒体衍生囊泡，囊泡逐渐融合成多泡体，最后被溶酶体水解形成线粒体碎片。
[0004]很多研究已经表明线粒体自噬在神经退行性疾病(帕金森病、阿尔茨海默病和亨廷顿病等)，细胞衰老方面起着重要作用。因此，线粒体自噬对于线粒体疾病是一个重要的靶点。目前，越来越多研究报道了很多提高线粒体自噬的化合物，对阿尔茨海默病、肿瘤耐药、细胞衰老等起到很显著的作用，而且很大一部分化合物都来源于中药植物的提取。可见天然产物中的小分子化合物或提取物对于寻找安全有效的线粒体自噬激动剂是一个很好的方向。
[0005]鸡骨香为大戟科巴豆属植物，又称土沉香、千人打、黄牛香等，我国常见于广东、广西、海南等南方省份。作为一种传统中药，鸡骨香以根部入药，在民间主要用于治疗风湿骨痛、腰腿痛、胃痛、咽喉肿痛、黄疸。现代药理学研究表明其具有抗炎、抗血管生成和抗流感病毒等活性。目前对鸡骨香的使用，主要是对鸡骨香药材进行传统煎煮或制成粉末使用，该
方法并未充分发挥鸡骨香的药用价值，造成了鸡骨香药材中活性成分的过度浪费。
[0006]本专利技术专利技术人在专利CN113476441 A中公开了从鸡骨香中分离出来的化合物Crassifolin A具有促进线粒体自噬作用。但是，在具体应用过程中，化合物Crassifolin A的制备较复杂，制备成本高。因此，急需提供一种有促进线粒体自噬作用的鸡骨香提取物。为了解决该问题，专利技术人在研究中发现，并不是采用任意方法制备得到的鸡骨香提取物均能显示出促进线粒体自噬作用；因此，开发一种具有促进线粒体自噬作用的鸡骨香提取物具有重要的应用价值。

技术实现思路

[0007]为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本专利技术首先提供了一种鸡骨香提取物的制备方法。
[0008]本专利技术所要解决上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
[0009]一种鸡骨香提取物的制备方法，其包含如下步骤：
[0010](1)取中药材鸡骨香，用有机溶剂进行提取得提取液，将提取液去除溶剂得鸡骨香粗提物；
[0011](2)将鸡骨香粗提物以乙醇为流动相进行大孔树脂柱层析，收集洗脱液去除溶剂后得鸡骨香提取物。
[0012]专利技术人在研究中发现，将中药材鸡骨香用有机溶剂提取，然后用大孔树脂柱制备得到的鸡骨香提取物具有促进线粒体自噬以及改善记忆作用；因此，将本专利技术所述方法制备得到的鸡骨香提取物用于制备具有促进线粒体自噬作用和/或改善记忆的产品、用于制备具有治疗线粒体疾病作用的药物以及用于制备具有治疗神经退行性疾病作用的产品，具有重要的应用价值。
[0013]优选地，步骤(1)中所述的有机溶剂为乙醇。
[0014]优选地，步骤(1)中的提取是指加热回流提取；提取温度为30～90分钟，提取温度为40～80℃；
[0015]进一步优选地，提取时间为60～80分钟，提取温度为60～80℃；
[0016]最优选地，提取时间为75分钟，提取温度为75℃。
[0017]优选地，步骤(1)中的乙醇是指体积分数为40％～80％的乙醇。
[0018]最优选地，步骤(1)中的乙醇是指体积分数为70％的乙醇。
[0019]优选地，步骤(1)中鸡骨香与乙醇的重量比为1:6～1:16。
[0020]最优选地，步骤(1)中鸡骨香与乙醇的重量比为1:8。
[0021]优选地，步骤(2)中以乙醇
‑
水为流动相进行大孔树脂柱层析的具体方法为：
[0022]将鸡骨香粗提物上大孔树脂柱，先用体积分数为45％～55％的乙醇洗脱除杂；然后再用体积分数为65％～75％的乙醇洗脱，收集洗脱液去除溶剂后得65％～75％的乙醇洗脱部位，即所述的鸡骨香提取物。
[0023]进一步优选地，步骤(2)中以乙醇
‑
水为流动相进行大孔树脂柱层析的具体方法为：
[0024]将鸡骨香粗提物上大孔树脂柱，先用5～10倍柱体积的体积分数为45％～55％的乙醇洗脱除杂；然后再用10～20倍柱体积的体积分数为65％～75％的乙醇洗脱，收集洗脱
液去除溶剂后得65％～75％的乙醇洗脱部位，即所述的鸡骨香提取物。
[0025]专利技术人在研究中进一步发现，大孔树脂柱的洗脱条件对于制备得到的鸡骨香提取物是否具有促进线粒体自噬作用具有决定性作用。在不同的大孔树脂柱的洗脱条件下制备得到的鸡骨香提取物，其促进线粒体自噬作用的大小的差别是巨大的；大孔树脂洗脱条件的选择不当，甚至制备不到具有促进线粒体自噬作用的鸡骨香提取物；专利技术人在大量的实验中惊奇的发现，先用体积分数为45％～55％的乙醇洗脱除杂，然后再用体积分数为65％～75％的乙醇洗脱得到的鸡骨香提取物其促进线粒体自本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鸡骨香提取物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)取中药材鸡骨香，用有机溶剂进行提取得提取液，将提取液去除溶剂得鸡骨香粗提物；(2)将鸡骨香粗提物以乙醇
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水为流动相进行大孔树脂柱层析，收集洗脱液去除溶剂后得鸡骨香提取物。2.根据权利要求1所述的鸡骨香提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的有机溶剂为乙醇。3.根据权利要求1所述的鸡骨香提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中以乙醇
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水为流动相进行大孔树脂柱层析的具体方法为：将鸡骨香粗提物上大孔树脂柱，先用体积分数为45％～55％的乙醇洗脱除杂；然后再用体积分数为65％～75％的乙醇洗脱，收集洗脱液去除溶剂后得65％～75％的乙醇洗脱部位，即所述的鸡骨香提取物。4.根据权利要求3所述的鸡骨香提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中以乙醇
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水为流动相进行大孔树脂柱层析的具体方法为：将鸡骨香...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉波，王国才，肖飞，潘君平，凌志鹏，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：