西南獐牙菜或其提取物的新用途、以及治疗急性肝衰竭的活性标志物的筛选方法技术

本发明专利技术提供了西南獐牙菜或其提取物在制备治疗肝衰竭的药物中的用途。本发明专利技术还提供了一种筛选治疗肝衰竭的西南獐牙菜乙醇提取物的活性标志物的方法。本发明专利技术西南獐牙菜乙醇提取物用于治疗肝衰竭，药效明确，综合运用提取、检测活性成分及靶点预测等方法，阐明了西南獐牙菜用于治疗肝衰竭，尤其是急性肝衰竭的物质基础及作用机制，为该植物的进一步开发应用提供了可靠的研究基础。供了可靠的研究基础。供了可靠的研究基础。

【技术实现步骤摘要】
西南獐牙菜或其提取物的新用途、以及治疗急性肝衰竭的活性标志物的筛选方法


[0001]本专利技术涉及西南獐牙菜或其提取物的新用途、以及治疗急性肝衰竭的活性标志物的筛选方法，属于药物领域。

技术介绍

[0002]獐牙菜属是龙胆科的一个大属，包括170多种植物，在我国存在80种，主要分布于西南地区仅云南省就有38种，目前已有70种獐牙菜属植物在临床上应用，在我国应用于临床的该属植物约40种。在传统中医体系中它们常用于退热、驱虫、补胆、保肝和治疗黄疸。国内外学者对该属植物的化学成分进行了深入地研究，从中分离出黄酮、环烯醚帖及其苷类、甾体、三萜及其苷类等多种化学成分。活性评价后发现其中多种化合物具有显著生物活性，近年来研究表明该属植物具有降血糖、保肝、抗癌、抗炎、抗病毒等药理作用。
[0003]西南獐牙菜(Swertia cincta Burkill)是龙胆科獐牙菜属的植物，在西南地区被广泛应用于治疗各种肝脏疾病。治小儿发热，口苦潮热，湿热黄疸，咽喉肿痛，消化不良，胃炎，口疮，牙痛，火眼。毒蛇咬伤。有文献报道西南獐牙菜对实验性肝损伤具有保护作用(孙学惠等，西南獐牙菜对实验性肝损伤保护作用的初步研究，《贵阳中医学院学报》1984年03期)；专利申请号：CN201510384806.X，专利技术名称：一种环烯醚萜类化合物及其制备方法、制剂与应用，本专利技术公开了一种环烯醚萜类化合物及其制备方法、制剂与应用，所述的环烯醚萜类化合物是从西南獐牙菜中分离得到，其分子式为C
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，该化合物命名为：Eustomoside。制备方法是以西南獐牙菜为原料，经原料处理、浸膏提取、有机溶剂萃取、洗脱、分离步骤制备得到。制剂为环烯醚萜类化合物中加入药用辅料和/或赋形剂制成水剂、片剂、颗粒剂或微乳剂，应用为所述的环烯醚萜类化合物在制备防治TMV药物中的应用。
[0004]急性肝功能衰竭(acute hepatic failure.AHF)是指在原来无肝脏基础性疾病而短时间内发生大量肝细胞坏死及严重肝功能损害，并引起肝性脑病的一组严重临床综合征。其临床特点是以往无慢性肝病史，骤然起病，迅速出现黄疸、肝功能衰竭、出血和神经精神症状等。短期内可合并多器官功能障碍综合征。本病病死率高，属于危重病症之一，目前无特效治疗方法。
[0005]目前针对急性肝衰竭的治疗方法有：1.病因治疗：针对病毒性肝炎所致的急性肝功能衰竭可以采用抗病毒疗法。对于药物性肝功能衰竭，应首先停用可能导致肝损害的药物；对乙酰氨基酚中毒所致者可给予N
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乙酰半胱氨酸静脉滴注及活性炭口服治疗。2.免疫调节治疗：使用免疫调节剂能够减少炎症反应、调节机体免疫功能、减少感染等并发症。常用药物有胸腺肽类、免疫球蛋白、糖皮质激素等。3.促肝细胞生长和改善肝脏微循环：为减少肝细胞坏死，促进肝细胞再生，可酌情使用肝细胞生长因子和前列素E2；改善肝脏微循环可酌情使用N
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乙酰半胱氨酸和还原型谷胱甘肽治疗。4.防治并发症：(1)肝性脑病去除诱因，限制蛋白质的摄入，清除肠道内的积食、积血或其他含氮物质。(2)脑水肿和肺水肿限制液体输入量和速度，补充白蛋白和血浆，酌情使用脱水剂和利尿药。(3)急性肾功能衰竭预
防和消除诱发肾功能衰竭的因素，如不适当的抽取腹水、利尿、使用肾毒性药物，监测并维持足够的有效血容量。5.人工肝治疗：人工肝是指通过体外的机械、物理、化学或生物装置，清除各种有害物质，补充必需物质，改善内环境，暂时替代衰竭肝脏部分功能的治疗方法。目前常用的有血浆置换、血液灌注、血液滤过等。6.肝移植：原位肝移植是目前治疗肝功能衰竭最有明确效果的方法。
[0006]目前尚无文献报道西南獐牙菜具有治疗急性肝衰竭的报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了西南獐牙菜或其提取物的新用途。本专利技术还提供了筛选西南獐牙菜中活性标志物的方法。
[0008]本专利技术提供了西南獐牙菜或其提取物在制备治疗肝衰竭的药物中的用途。
[0009]其中，所述的药物是治疗急性肝衰竭的药物。
[0010]其中，所述的提取物为有机溶剂提取物。
[0011]其中，所述的有机溶剂是50
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95％乙醇。进一步优选地，所述的有机溶剂是75％乙醇。
[0012]其中，所述的药物是通过调控EGFR/ERK1/2和PI3K/AKT信号通路发挥治疗急性肝衰竭的药物。
[0013]本专利技术还提供了一种筛选治疗肝衰竭的西南獐牙菜乙醇提取物的活性标志物的方法，它包括如下步骤：
[0014]a、基于UHPLC
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QE Orbitrap平台，对西南獐牙菜乙醇提取物的活性成分鉴定，通过网络数据库依据其药代动力学性质、生物利用度和毒理学性质进行成分鉴定、活性成分筛选；
[0015]b、将a步骤筛选出的活性成性，预测治疗急性肝衰竭的靶点：对急性肝衰竭的潜在靶点和a步骤筛选出的活性成性的药物靶点取交集，获得交集靶点；c、构建与分析PPI网络；
[0016]d、基因本体论(Gene ontology，GO)和KEGG富集分析；
[0017]e、GEO数据库验证核心靶点；
[0018]f、急性肝衰竭的关键成分与核心靶点的分子对接、分子动力学模拟。
[0019]其中，所述的UHPLC检测方法为：
[0020]a)供试品溶液制备：西南獐芽菜粉碎过筛，称取2g，精密称定；加75％乙醇加热回流提取，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味，
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80℃冷冻干燥成粉末；称取50mg西南獐牙菜乙醇提取物冻干粉末，加入1000μL甲醇：乙腈：水体积比为2:2:1的提取液，再加入20μL内标，涡旋混匀30秒；加入钢珠，45Hz研磨处理4min，冰水浴超声5min；零下20℃静置一小时，之后将样本4℃，12000rpm离心15min；取200μL上清于自带内插管的进样瓶中，每个样本各取20μL混合成QC样本，再取200μL上机检测；
[0021]b、色谱条件：安捷伦1290超高效液相控制下如下流动相参数进行分析，正模式：流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈；负模式：流动相A：5mM醋酸铵水溶液，流动相B：乙腈，进样体积为1μL；流速500μL/min；洗脱条件如下表所述：
[0022][0023]所述的质谱条件为：Thermo Q Exactive Orbitrap质谱仪，轰击能量(NCE模式)：20eV、40eV、60eV，扫描速率：7Hz，质谱参数如下表所示：
[0024][0025][0026]本专利技术还提供了该筛选方法筛选的治疗肝衰竭的西南獐牙菜乙醇提取物的活性标志物，它包含木犀草素、圣草酚、山奈酚。
[0027]本专利技术西南獐牙菜乙醇提取物用于治疗肝衰竭，药效明确，综合运用提取、检测活性成分及靶点预测等方法，阐明了西南獐牙菜用于治疗肝衰竭，尤其是急性肝衰竭的物质基础及作用机制，为该植物的进一步开发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.西南獐牙菜或其提取物在制备治疗肝衰竭的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的药物是治疗急性肝衰竭的药物。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述的提取物为有机溶剂提取物。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述的有机溶剂是50
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95％乙醇。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述的有机溶剂是75％乙醇。6.根据权利要求1
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5任意一项所述的用途，其特征在于：所述的药物是通过调控EGFR/ERK1/2和PI3K/AKT信号通路发挥治疗急性肝衰竭的药物。7.一种筛选治疗肝衰竭的西南獐牙菜乙醇提取物的活性标志物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a、基于UHPLC
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QE Orbitrap平台，对西南獐牙菜乙醇提取物的活性成分鉴定，通过网络数据库依据其药代动力学性质、生物利用度和毒理学性质进行成分鉴定、活性成分筛选；b、将a步骤筛选出的活性成性，预测治疗急性肝衰竭的靶点：对急性肝衰竭的潜在靶点和a步骤筛选出的活性成性的药物靶点取交集，获得交集靶点；c、构建与分析PPI网络；d、基因本体论和KEGG富集分析；e、GEO数据库验证核心靶点；f、急性肝衰竭的关键成分与核心靶点的分子对接、分子动力学模拟。8.根据权利要求7...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓阳，张明芝，张丹，李刚，吴鑫岩，唐华侨，叶刚，罗忠永，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：