本发明专利技术属于PSR快速检测试剂盒，具体公开了一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，包括试剂盒底壳(100)、正向引物存放区(110)、反向引物存放区(120)、耗材区(130)、耗材安放槽(131)、缓冲液区(140)、缓冲液安放槽(141)、对照品区(150)、对照品安放槽(151)、去离子水储存区(160)、试剂盒转轴(200)、试剂盒顶盖(300)；进一步的，所述试剂盒顶盖(300)中设置有移液器槽(310)，更进一步的，所述试剂盒顶盖(300)的一侧设置有把手(320)。本发明专利技术所述的禽滑液囊支原体快速检测试剂盒携带方便，灵敏性高，特异性好、可用于MS的检测和临床诊断。可用于MS的检测和临床诊断。可用于MS的检测和临床诊断。
【技术实现步骤摘要】
一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒
[0001]本专利技术属于PSR快速检测试剂盒，具体公开了一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒。
技术介绍
[0002]禽滑液囊支原体感染，又称滑液支原体感染、病原为滑液囊支原体，是鸡和火鸡的一种急慢性传染病，该病病程长，病鸡表现为精神差，羽毛粗乱，消瘦，喜卧，死亡率低，关节肿大，滑液囊和腱鞘发炎症状明显，严重影响鸡的生产能力。
[0003]该病病原为滑液囊支原体，呈多形态的球形体(直径约0.2～0.4unr)比鸡毒支原体(MG)稍小.革兰氏染色阴性。只有一个血清型，不同菌株的致病力有差异.引起的症状也因病原的趋向性而不同。病原具有一般支原体特征。即发酵葡萄糖，不水解精氨酸，不利用尿素。人工培养时，MS的营养要求比MG高。首次培养，培养基内必须加入烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(辅酶I、NAD)，传代后可以由烟酰胺(Nicot inamide)代替：另外还需加入牛或猪的血清，以猪的血清尤好，用鸡血清则不能成功培养.最适温度为37.C。初次分离时.由于组织抗原、抗体和毒素的存在一般需在24h后继代移植1次，转移至Frey氏培养基上培养3～7d后.可见生长。用30倍解剖镜观察，可见圆形、隆起的、略似花格状、有或无中心的菌落，直径为1～3mm。该病的病原体在5～7日龄鸡胚卵黄囊中和鸡的气管培养物上生长良好。
[0004]该支原体的检测主要有以下方法，用于病原分离的组织包括气管、气囊、肝脏、脾脏滑液囊和病变关节渗出液等。渗出液必须取自于发病初期的病变关节，否则可能检测不到病原体。常用的血清学检测方法有平板凝集反应、试管凝集反应与血凝抑制试验等。也有关于酶联免疫吸附试验、PSR扩增技术等的报道。最常用的方法为平板凝集反应。
[0005]病原分离，取急性发病鸡的关节渗出液、肝脏、脾脏等为材料，用营养肉汤1：10倍稀释后接种于Frey氏培养平板上3～7d后观察结果或接种于5～7日龄鸡胚卵黄囊中，5～10日后观察结果。血清学检查，取病原分离物接种于滑液囊支原体平板抗原上作凝集试验。呈现阳性即可做判定。该病应与葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等病菌引起的关节炎及病毒性关节炎相区别，在病原学和血清学检查时，还应与鸡毒支原体(MG)相区别。
[0006]CN201910248991.8公开了一种禽滑液囊支原体的聚合酶螺旋扩增检测引物组和试剂盒，根据其vlhA基因保守区设计合成特异性PSR引物，包括上游引物S1和下游引物S2，并通过反应温度和时间的优化，建立了聚合酶螺旋扩增检测方法。检测试剂包括如下组分反应缓冲液、dNTPs、MgSO4、Bst DNA聚合酶、去离子水、显色试剂和上述引物。本上述专利技术的检测试剂在应用时具有灵敏特异、简便快捷等优点，可用于MS的检测和临床诊断。但是上述专利技术并未公开具体的试剂盒结构和形态，传统试剂盒体积较大，无法方便的转移和携带。
技术实现思路
[0007]针对目前存在的技术上的问题，本专利技术提供了一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒。
[0008]本专利技术包括以下技术方案：
[0009]一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，包括试剂盒底壳、正向引物存放区、反向引物存放区、耗材区、耗材安放槽、缓冲液区、缓冲液安放槽、对照品区、对照品安放槽、去离子水储存区、试剂盒转轴、试剂盒顶盖；
[0010]所述正向引物存放区和反向引物存放区均位于所述试剂盒底壳的一侧；
[0011]所述正向引物存放区存放有含有上游引物S1＝SEQ ID NO：1＝acttacgaattcgtacatagaagtatag
‑
GTGATCAAACTCCRGAC的试剂瓶；
[0012]所述反向引物存放区存放有含有下游引物S2＝SEQ ID NO：2＝tcaagatatgaagatacatgcttaagca
‑
ACCTGGGTTTTCTGGGTT的试剂瓶；
[0013]所述耗材区位于所述正向引物存放区和反向引物存放区的正下方；
[0014]所述耗材区为矩形，其中设置有若干耗材安放槽；
[0015]所述缓冲液区设置于所述耗材区的一侧，其中设置有缓冲液安放槽；
[0016]所述对照品区设置于缓冲液区的上侧，其中设置有对照品安放槽；
[0017]所述去离子水储存区设置于缓冲液区的另一侧，用于存放去离子水；
[0018]所述剂盒底壳通过一侧长边上的试剂盒转轴与试剂盒顶盖连接。
[0019]进一步的，上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，所述缓冲液安放槽中安放由缓冲液储瓶，含有以下试剂：10
×
反应缓冲液、dNTPs、Mg 2+
、BstDNA聚合酶、去离子水、模板DNA和显色试剂中的一种或者多种。
[0020]进一步的，上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，所述试剂中Mg 2+
的浓度为6mM、所述试剂中dNTPs的浓度为1.5mM；作为优选，所述试剂中显色试剂为0.025mM酚红和0.08mM甲酚红混合指示剂。
[0021]进一步的，上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，在对照品区存放有阳性对照品。
[0022]进一步的，上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，所述试剂盒顶盖中设置有移液器槽。
[0023]进一步的，上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，所述试剂盒顶盖的一侧设置有把手。
[0024]另一方面，本专利技术还公开了上述一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒在如下任一中的应用：
[0025](1)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测或辅助检测禽滑液囊支原体；
[0026](2)制备用于检测或辅助检测禽滑液囊支原体的产品；
[0027](3)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体；
[0028](4)制备用于检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体的产品；
[0029](5)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测待测病毒是否为禽滑液囊支原体；
[0030](6)制备用于检测或辅助检测待测病毒是否为禽滑液囊支原体的产品。
[0031]进一步的，本专利技术还公开了一种检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体的方法，该方法不以疾病的诊断和治疗为目的，包括以下步骤：
[0032](1)从待测动物样品中提取基因组DNA作为模板，采用权利要求1
‑
6任一项所述试
剂盒进行聚合酶螺旋扩增，得到扩增产物；作为优选，所述聚合酶螺旋扩增的反应条件为恒温63℃作用40min；
[0033](2)按照下述任一方法确定待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体：
[0034]A、扩增产物呈现橙黄色则待测动物样品感染禽滑液囊支原体；扩增产物呈现紫红色则待测动物样品未感染禽滑液囊支原体；
[0035]B、将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳条带呈梯状分布，则待测动物样品感染禽滑液囊支原体；仅有一条引物条带，则待测动物样品未感染禽滑液囊本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，其特征在于，包括试剂盒底壳(100)、正向引物存放区(110)、反向引物存放区(120)、耗材区(130)、耗材安放槽(131)、缓冲液区(140)、缓冲液安放槽(141)、对照品区(150)、对照品安放槽(151)、去离子水储存区(160)、试剂盒转轴(200)、试剂盒顶盖(300)；所述正向引物存放区(110)和反向引物存放区(120)均位于所述试剂盒底壳(100)的一侧；所述正向引物存放区(110)存放有含有上游引物S1＝SEQ ID NO：1＝acttacgaattcgtacatagaagtatag
‑
GTGATCAAACTCCRGAC的试剂瓶；所述反向引物存放区(120)存放有含有下游引物S2＝SEQ ID NO：2＝tcaagatatgaagatacatgcttaagca
‑
ACCTGGGTTTTCTGGGTT的试剂瓶；所述耗材区(130)位于所述正向引物存放区(110)和反向引物存放区(120)的正下方；所述耗材区(130)为矩形，其中设置有若干耗材安放槽(131)；所述缓冲液区(140)设置于所述耗材区(130)的一侧，其中设置有缓冲液安放槽(141)；所述对照品区(150)设置于缓冲液区(140)的上侧，其中设置有对照品安放槽(151)；所述去离子水储存区(160)设置于缓冲液区(140)的另一侧，用于存放去离子水；所述剂盒底壳(100)通过一侧长边上的试剂盒转轴(200)与试剂盒顶盖(300)连接。2.根据权利要求1所述的一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液安放槽(141)中安放由缓冲液储瓶，含有以下试剂：10
×
反应缓冲液、dNTPs、Mg 2+、Bst DNA聚合酶、去离子水、模板DNA和显色试剂中的一种或者多种。3.根据权利要求1所述的一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，其特征在于，所述试剂中Mg 2+的浓度为6mM、所述试剂中dNTPs的浓度为1.5mM；作为优选，所述试剂中显色试剂为0.025mM酚红和0.08mM甲酚红混合指示剂。4.根据权利要求1所述的一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，其特征在于，在对照品区(150)存放有阳性对照品。5.根据权利要求1所述的一种禽滑液囊支原体快速检测试剂盒，...
【专利技术属性】
技术研发人员：冀君，许鑫，徐书奇，姚伦广，阚云超，
申请(专利权)人：南阳师范学院，
类型：发明
国别省市：
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