一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用，过程包括：蜂胶提取物作用靶点基因筛选；肌少症的基因靶点的获取；绘制

【技术实现步骤摘要】
一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用


[0001]本专利技术涉及肌少症药物研发
，更具体地说是涉及一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法及应用
。

技术介绍

[0002]蜂胶具有多种生物活性，包括抗菌
、
抗氧化
、
抗炎等，因此被广泛应用于功能性食品和药物中
。
研究表明，蜂胶醇提取物可以缓解衰老小鼠的肌肉萎缩，因此具有潜在的优势用于缓解肌少症
。
[0003]但是，目前还没有特效药被批准用于治疗肌少症，因此寻找新的治疗肌少症的药物具有重要意义
。
天然产物是发现新药的一个很有希望的来源
。
作为一种重要的功能性食品和药物，蜂胶自古以来就被广泛使用
。
蜂产品富含类黄酮
、
酚类和氨基酸等多种成分，具有多种药理活性如：抗衰老
、
抗炎
、
抗癌
、
抗菌等，已被用于治疗多种易引起肌少症的慢性病如：高血压
、
糖尿病
、
心血管疾病和癌症
。
由于具有促进健康的作用，蜂胶在许多国家被广泛用作膳食补充剂
。
肌少症是一个公共卫生问题，它会导致老年人活动能力逐渐下降，增加老年人跌倒和住院的风险
。
因此，确定蜂胶对肌少症的作用机制并发现其中的有效成分具有重要意义
。
我们前期的研究发现蜂胶提取物可以通过调节肌肉蛋白代谢和激素水平缓解衰老小鼠的肌肉萎缩
。
然而，由于蜂胶组成成分复杂，其作用于肌少症的有效成分及其作用机制尚未完全明确
。
[0004]因此，如何筛选蜂胶提取物中抗肌少症的成分，并将其核心成分应用于制备抗肌少症的药物中是本领域技术人员亟需解决的问题
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术通过网络药理方法对蜂胶提取物缓解肌少症的活性成分和作用机制进行预测，并将获得的主要成分与关键靶点进行分子对接验证，最后通过
D
‑
gal
诱导的
C2C12
细胞模型验证了预测结果，发现蜂胶提取物中芹菜素为抗肌少症的核心成分，为肌少症的防治提供了理论依据
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法，过程包括：
[0008](1)
蜂胶提取物作用靶点基因筛选；
[0009](2)
肌少症的基因靶点的获取；
[0010](3)
使用
BioVenn
在线平台获得药物靶点与疾病靶点交集靶点并绘制
V ENNY
图，然后将交集靶点导入
STRING
数据库，将物种限制为
Homo sapie ns
，最低要求的作用值设置为
medium confidence
，得到蛋白间的相互作用信息，将
STRING
数据库中获得的数据导入
Cytoscape3.9.1
软件得到每个靶点的
Degree
值；
[0011](4)
将交集靶点输入
DAVID
数据库，物种限定为
Homosapiens
，进行
G O
功能富集分析和
KEGG
通路富集
。
以
P<0.05
为基本标准，筛选
GO
功能富集分析通路，以条形图的形式展示
结果；以
P<0.01
为基本标准，筛选
KEGG
功能富集分析通路，以气泡图的形式展示结果；将
GO
富集分析结果
、
交集靶点和交集靶点对应的蜂胶提取物成分信息导入
Cytoscape3.9.1
软件进行拓扑分析，构建
PE“成分
‑
靶点
‑
通路”网络，根据
Degree
网络拓扑参数判断
PE
的核心靶点和主要活性成分；
[0012](5)
在
PubChem
数据库下载
PEE
成分中的主要活性成分和核心靶点蛋白的
3D
结构，通过
AutoDock
软件进行分子对接，根据低能量和构象合理的原则选择最佳对接构象，并计算
PEE
主要活性成分与核心靶点的结合能力；
[0013](6)
通过
D
‑
gal
诱导的
C2C12
细胞模型验证预测结果
。
[0014]优选地，蜂胶提取物作用靶点基因筛选具体为：依据蜂胶提取物的成分信息，从
PubChem
数据库获取其
InChI
结构信息
。
将这些信息输入
BATMA N
数据库，“Scorecutoff”设置为
20
，
P
‑
value
设置为
0.05
，确定
PE
成分的作用靶点
。
[0015]优选地，肌少症的基因靶点的获取具体为：在
DisGeNET
数据中输入“Sa rcopenia”限定物种为“Homo sapiens”，获得
Sarcopenia
的基因靶点
。
[0016]优选地，通过
D
‑
gal
诱导的
C2C12
细胞模型验证预测结果具体为：
[0017]C2C12
细胞中加入生长培养基
(
高糖
DMEM
培养基
+10
％胎牛血清
)
，于
37℃
，5％
CO2的恒温培养箱中孵育
。
培养细胞至
85
％左右，收集细胞并分组，分为对照组
(Ctrl)、
衰老模型组
(D
‑
gal)、
筛选成分组
(D
‑
gal+Screen ing components)
；随后将各组培养基换为分化培养基
(
高糖
DMEM
培养基
+2
％马血清
)
，根据试验目的，在试验结束前向生长
/
分化培养基中添加
D
‑
gal、
筛选得到的成分等药物处理，衰老模型组向培养基中加浓度为
111mM
的
D
‑
gal...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法，其特征在于，过程包括：
(1)
蜂胶提取物作用靶点基因筛选；
(2)
肌少症的基因靶点的获取；
(3)
使用
BioVenn
在线平台获得药物靶点与疾病靶点交集靶点并绘制
VENNY
图，然后将交集靶点导入
STRING
数据库，将物种限制为
Homo sapie ns
，最低要求的作用值设置为
medium confidence
，得到蛋白间的相互作用信息，将
STRING
数据库中获得的数据导入
Cytoscape3.9.1
软件得到每个靶点的
Degree
值；
(4)
将交集靶点输入
DAVID
数据库，物种限定为
Homosapiens
，进行
GO
功能富集分析和
KEGG
通路富集
。
以
P<0.05
为基本标准，筛选
GO
功能富集分析通路，以条形图的形式展示结果；以
P<0.01
为基本标准，筛选
KEGG
功能富集分析通路，以气泡图的形式展示结果；将
GO
富集分析结果
、
交集靶点和交集靶点对应的蜂胶提取物成分信息导入
Cytoscape3.9.1
软件进行拓扑分析，构建
PE“成分
‑
靶点
‑
通路”网络，根据
Degree
网络拓扑参数判断
PEE
的核心靶点和主要活性成分；
(5)
在
PubChem
数据库下载
PEE
成分中的主要活性成分和核心靶点蛋白的
3D
结构，通过
AutoDock
软件进行分子对接，根据低能量和构象合理的原则选择最佳对接构象，并计算
PEE
主要活性成分与核心靶点的结合能力；
(6)
通过
D
‑
gal
诱导的
C2C12
细胞模型验证预测结果
。2.
根据权利要求1所述的一种筛选蜂胶提取物中抗肌少症成分的方法，其特征在于，蜂胶提取物作用靶点基因筛选具体为：依据蜂胶提取物的成分信息，从
PubChem
数据库获取其
InChI
结构信息
。
将这些信息输入
BATMA N
数据库，“Scorecutoff”设置为
20
，
P
‑
value
设置为
0.05
，确定
PE
成分的作用靶点
。3.
根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：田嵩浩，姜玉锁，
申请(专利权)人：山西医科大学汾阳学院，
类型：发明
国别省市：