金丝桃苷抗马疱疹病毒8型感染的用途制造技术

本发明专利技术公开了金丝桃苷抗马疱疹病毒8型感染的用途。通过qPCR、Western Blot等实验技术在多个层面上揭示了金丝桃苷能够显著抑制EHV

【技术实现步骤摘要】
金丝桃苷抗马疱疹病毒8型感染的用途


[0001]本专利技术属于中药
，涉及防治马疱疹病毒8型(Equine Herpesvirus 8，EHV
‑
8)感染的药物，具体涉及金丝桃苷在制备抗EHV
‑
8药物中的应用。

技术介绍

[0002]EHV
‑
8是一种有囊膜的双链DNA病毒，属于α疱疹病毒亚科。EHV
‑
8基因组全长约150kb，包含80个开放阅读框，编码76个蛋白。相关研究发现，EHV
‑
8的感染可导致马属动物(马、驴)出现呼吸道疾病、流产和引起病毒性脑炎，严重危害马属动物的健康。EHV
‑
8最早是从驴鼻腔中分离得到，被命名为驴疱疹病毒3型(Asinine herpesviruses 3，AHV
‑
3)；随后在马体内分离得到EHV
‑
8wh毒株；之后又从成年公驴体内分离到EHV
‑
8351076/2019毒株。
[0003]近年来伴随着驴产业快速发展，规模化驴场疫病逐渐增多，其中流产和呼吸道疾病严重困扰驴产业的可持续发展，每年都会造成巨大的经济损失。前期研究发现，EHV
‑
8是导致驴流产和呼吸道疾病的主要致病原。目前对EHV
‑
8尚无有效的疫苗和药物可供使用，亟需开发经济、高效的抗病毒药物以实现对EHV
‑
8的防控。
[0004]金丝桃苷(Hyperoside，Hyp)是从中药材中提取的一种具有抗病毒作用的黄酮类化合物，结构为槲皮素
‑3‑
O
‑
半乳糖苷，多分布于金丝桃科、桔梗科、唇形科、蔷薇科、杜鹃花科、葵科、小檗科、藤黄科、豆科以及卫矛科等植物的果实及全草中。金丝桃苷具有抗癌、抗炎、抗抑郁、降血脂、抗乙肝病毒和肝细胞保护等多种效应。目前尚无利用金丝桃苷防治EHV
‑
8感染的相关报道。
[0005]尽管有文献报道了包括金丝桃苷在内的槲皮素
‑3‑
O
‑
糖苷类化合物具有抗病毒功效，但是利用该类化合物如芦丁、曲克芦丁等开发的药物并未直接用于临床抗病毒治疗。另外，中国专利CN101744829A中，鉴于金丝桃苷较低的抗病毒指数，其利用金丝桃苷凝胶与抗病毒药物利巴韦林、无环鸟苷、聚肌胞以及B族维生素联合治疗人带状疱疹。目前尚未见到金丝桃苷在EHV
‑
8相关抗病毒药物开发应用中的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供金丝桃苷抗马疱疹病毒8型感染的用途。
[0007]为达到上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0008]金丝桃苷在制备抗EHV
‑
8药物中的应用。
[0009]优选的，所述金丝桃苷对EHV
‑
8易感细胞(如RK
‑
13、NBL
‑
6)的最大安全质量浓度为80μM(μmol/L)，即金丝桃苷对EHV
‑
8易感细胞无毒性。
[0010]优选的，所述金丝桃苷显著抑制EHV
‑
8的复制。
[0011]优选的，所述金丝桃苷对EHV
‑
8毒株EHV
‑
8SDLC66、EHV
‑
8SD2020113、EHV
‑
8donkey/Shandong/10/2021的复制均具有抑制作用，表明金丝桃苷对分离自患病(呼吸道疾病、流产、病毒性脑炎等)动物的不同EHV
‑
8毒株具有广谱抗感染作用。
[0012]优选的，所述金丝桃苷阻断EHV
‑
8的内化过程。
[0013]优选的，所述金丝桃苷用于防治由EHV
‑
8感染引起的病毒血症，例如可以显著降低血液中的病毒载量。
[0014]含有金丝桃苷的植物提取物在制备抗EHV
‑
8药物中的应用。
[0015]含有金丝桃苷的中药复方在制备抗EHV
‑
8药物中的应用。
[0016]金丝桃苷在制备用于防治呼吸道疾病、流产和病毒性脑炎的药物中的应用。
[0017]优选的，所述治呼吸道疾病、流产和病毒性脑炎是由机体(如马科动物)感染EHV
‑
8引起。
[0018]本专利技术的有益效果体现在：
[0019]本专利技术通过所进行的金丝桃苷相关药理学实验研究，揭示了金丝桃苷能够显著抑制EHV
‑
8的复制，可以作为防治EHV
‑
8感染的药物有效成分，并充分发挥植物来源的天然化合物毒副作用小的优势，对EHV
‑
8临床用药提供有价值的理论依据和参考。
附图说明
[0020]图1为金丝桃苷对EHV
‑
8易感细胞的毒性试验结果。
[0021]图2为金丝桃苷对EHV
‑
8毒株复制中gD基因转录(A)及gD蛋白表达(B)的作用结果；其中：**P<0.01，***P<0.001。
[0022]图3为金丝桃苷对EHV
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8不同毒株感染滴度(A)及gD蛋白表达(B)的作用结果；其中：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
[0023]图4为金丝桃苷不同处理方法与EHV
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8感染的试验设置示意图。
[0024]图5为金丝桃苷不同处理方法对EHV
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8复制的抑制作用结果：(A)gD基因转录水平变化；(B)gD蛋白表达水平变化；**P<0.01，***P<0.001。
[0025]图6为金丝桃苷在EHV
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8感染引起的病毒血症中的作用结果；其中：*P<0.05，**P<0.01。
具体实施方式
[0026]下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的详细说明。所述实施例仅用于解释本专利技术，而非对本专利技术保护范围的限制。
[0027](一)金丝桃苷对EHV
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8易感细胞的毒性试验
[0028]将兔肾细胞RK
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13和马真皮细胞NBL
‑
6分别接种于96孔培养板中(1
×
104个/孔)，待细胞生长至约70％
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80％汇合时，试验组每孔加入不同浓度(0、10μM、20μM、40μM、80μM、160μM)的金丝桃苷溶液100μL(溶剂为DMSO)。同时设立阴性对照(DMSO处理组)及空白对照，每组3个重复孔。置于37℃、5％ CO2培养箱中共同孵育24h后，每孔加入CCK
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8溶液10μL，继续培养2h。利用酶标仪读取450nm处的吸光值，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.金丝桃苷在制备抗EHV
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8药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述金丝桃苷的最大安全质量浓度为80μM。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述金丝桃苷抑制EHV
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8的复制。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述金丝桃苷对EHV
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8毒株EHV
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8SDLC66、EHV
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8SD2020113、EHV
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8donkey/Shandong/10/2021的复制均具有抑制作用。5.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亮亮，王彤彤，胡乐玉，徐萌，王长法，
申请(专利权)人：聊城大学，
类型：发明
国别省市：